牛人工授精技術培訓

關于牛人工授精技術培訓第1頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五牛冷配改良技術要點1、子宮解剖2、發(fā)情鑒定3、卵泡與黃體4、輸精時間5、輸精部位6、難孕牛治療第2頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第3頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第4頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五1、子宮解剖第5頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第6頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五2、發(fā)情鑒定第7頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第8頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五3、卵泡與黃體第9頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第10頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第11頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五牛冷凍精液配種的工作房間的要求

(1)有3-5平方米的面積，能放下一個液氮罐和一張工作用桌；使用一間獨立的房屋或在一個避靜、衛(wèi)生的房間選用一個角皆可。地面以水泥或磚地為好，易打掃，灰塵少。

(2)房間應有水、電，房間及周圍環(huán)境應干凈、衛(wèi)生、干燥、通風。

(3)每日應打掃地面衛(wèi)生，擦去桌面和器具的塵土，一周(至少一個月)應大掃除一次。

(4)房間內(nèi)不能存放有揮發(fā)性氣味的藥品，室內(nèi)禁止吸煙、禁止堆放與工作無關的物品。

第12頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五牛冷凍精液解凍注意事項

(1)所有直接接觸冷凍精液的器具及容器都應是滅菌消毒過的。防止液氮罐內(nèi)和解凍過程中的污染，如鑷子、裝解凍液和精液的容器等

(2)32－38℃是適宜的解凍溫度，溫度低了影響精子的恢復，高于42℃會使精子迅速死亡；

第13頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五冷凍精液解凍后的存放注意事項

(1)解凍后就應將精液從水浴中取出，長時間放在較高的溫度下，會加速精子的衰竭；

(2)解凍后盡快輸精，常用的解凍液成分比較簡單，不能長時間保存精液，解凍后輸精越快越好，細管冷凍精液最多不能超過1小時，顆粒冷凍精液最多不能超過2小時；

(3)解凍后不能再次急劇的升溫或降溫，否則會影響凍精的活力；

(4)解凍后需要遠距離運輸?shù)?，可?0－15℃解凍，解凍后用棉花等包裹好，低溫保存(5℃)和攜帶，可延長精子的存活時間數(shù)小時。第14頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五用顯微鏡檢查精液活力

載玻片、蓋玻片和其它接觸精液的器具應預熱，加熱時又要注意不能超過40℃。

注意使用器具的衛(wèi)生和溶液的質(zhì)量。

顯微鏡物鏡不要直接沾上了精液。

對焦距時將顯微鏡鏡頭從下往上運動，先將鏡頭靠近蓋玻片，再逐漸輕緩地上移聚焦，以免損壞鏡頭和載玻片。

用放大100－200倍觀察即可，視野大，可看到精液的總體情況，操作容易。

第15頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五輸精時間 發(fā)情開始后8—24h

適宜輸精時間

發(fā)情開始

發(fā)情結(jié)束

0 12 24 排卵

輸精部位 卵泡側(cè)的子宮角基部

子宮頸內(nèi)口處的子宮體基部

輸精次數(shù) 1---2次第16頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五-第17頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第18頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第19頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第20頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第21頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第22頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第23頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第24頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第25頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第26頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第27頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五直把輸精操作技術

(1)輸精員在操作前戴好長臂手套或徒手涂以潤滑劑，輸精器按操作規(guī)程裝好精液備用，配種牛保定牢靠；

(2)將一只手（左手更方便些）伸入母牛直腸內(nèi)，掏出糞便，清洗母牛外陰部并擦干。用伸入直腸的手隔著直腸壁找到子宮頸并輕握，主要用大拇指、食指和中指固定和調(diào)整子宮頸的位置。另一只手持輸精器沿陰道上壁先斜向上，再平直向前，至子宮頸外口處；

(3)雙手憑感覺協(xié)同操作，主要靠伸入直腸的手調(diào)整轉(zhuǎn)動子宮頸的方向通過子宮頸。輸精器通過子宮頸的螺旋皺襞后，把精液輸入剛過子宮頸內(nèi)口的子宮體基部或卵泡側(cè)子宮角內(nèi)。第28頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五直把輸精操作注意事項

(1)插入輸精管時要小心謹慎，不可用力過猛，以防輸精器穿破子宮頸或子宮壁(沒必要輸入太深)。

(2)個別母牛努責，直腸壁收縮緊張，子宮頸也向后移。這時，可把手前伸，刺激腸壁，使其放松，然后握住子宮頸向前推，使陰道壁伸展，以便于輸精管插入。

(3)有些母牛子宮垂入腹腔，可用手握住子宮頸慢慢往上提，才便于輸精管通過。

第29頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五(4)有時輸精管已到達子宮頸口，就是不好插入，這可能是子宮頸開張不好，有炎癥、頸口有疤痕等，或許是已孕母牛假發(fā)情，遇到這些情況要認真檢查，診斷清楚，妊娠牛強行深部輸精會引起流產(chǎn)。

(5)操作時應主要靠直腸內(nèi)的手調(diào)整子宮的位置，不能靠持輸精器的手硬戳。

(6)術者最好先將陰唇掰開(或由助手協(xié)助)，把輸精器插入陰道后再將操作手伸入直腸，也可將伸入直腸的手臂往側(cè)下壓，使陰門裂張開，這樣輸精器頭部不會碰到陰唇外部，不易被污染。第30頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五牛配種時間不宜過早母牛發(fā)情持續(xù)時間18-24小時

排卵發(fā)情結(jié)束后的6-12小時

精子在母牛生殖道的存活時間12-20小時

精子在子宮和輸卵管內(nèi)獲能需數(shù)小時

卵子排出后能夠保證正常受精的時間為數(shù)小時

第31頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五母牛發(fā)情適時輸精時間

母牛發(fā)情后的12-24小時是適宜的輸精時間，6-27小時也可以。

凌晨或上午發(fā)情的?？稍谙挛缁虬砼浞N，下午或傍晚發(fā)情的?？梢栽诘诙焐衔缗浞N。

一次輸精配種，在發(fā)情后18-24小時。

有些發(fā)情持續(xù)時間長、排卵延遲的牛需第三次輸精，以確保精卵能夠結(jié)合受精。第32頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五母牛一次發(fā)情輸精次數(shù)

有經(jīng)驗的技術員，在發(fā)情開始后的18-24小時一次輸精即可達到滿意地受胎率(≥60％)。

兩次輸精法，即在母牛發(fā)情后約12小時(早晨或上午發(fā)情，在下午或傍晚配種，下午發(fā)情的牛第二天早配種)第一次輸精，間隔約12小時第二次輸精。

發(fā)情時間延長的母牛需第三次輸精。

第33頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五輸精部位

卵泡側(cè)的子宮角基部。

子宮頸內(nèi)口處的子宮體基部

兩角及子宮體基部三點輸精

子宮頸難通過的牛也可輸入子宮頸深部，當然這會損失一部分精液。

常規(guī)操作輕緩地將精液輸在剛通過子宮頸內(nèi)口處的子宮體基部。

可用食指在子宮頸內(nèi)口和子宮體部輕輕觸摸輸精器的頭部確定位置。第34頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五為什么輸精部位不能太深？

直把輸精不是越深越好。沒有必要將精液送得超過子宮角的彎曲部，這是因為：

(1)精子在發(fā)情母牛的子宮內(nèi)運行的很快。十多分鐘甚至幾分鐘即可到達輸卵管，精子在子宮內(nèi)運行有助于精子的獲能。

(2)子宮結(jié)構(gòu)

子宮角向下彎曲，發(fā)情時子宮水腫和充血，輸精器插的太深容易損傷子宮內(nèi)膜，影響了受胎。

(3)準確輸精

如果是左手在直腸內(nèi)操作，輸精器很容易進入右側(cè)子宮角內(nèi)；如果是右手在直腸內(nèi)操作，輸精器容易進入左側(cè)子宮角。盲目將精液輸?shù)奶?，可能使排卵?cè)無精子而使卵子無法受精。

第35頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第36頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第37頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五細管冷凍精液的解凍和裝槍

細管取出后首先在空氣中停留幾秒，然后用32-38℃水浴升溫

水浴時間0.25ml細管停留約15秒鐘，

0.5ml裝的細管停留約20秒鐘。

精液溶解后，從水浴中取出，用較干的酒精棉球或滅菌的棉花、衛(wèi)生紙等擦干細管外壁，再用專用細管剪刀將細管的封口端垂直剪開，開口端朝前裝入輸精槍，鋼芯對準細管棉塞部，法式卡蘇槍將槍體放入塑料外套至頭部，固定緊備用。日式金屬輸精槍無外套，將頭部與體部旋緊即可。第38頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五使用細管冷凍精液注意事項

(1)不要在溫水中浸泡時間太長。

(2)水浴解凍的容器最好能將細管凍精解凍時橫置，如果需將細管垂直放入，將棉塞端朝下。

(3)細管凍精取出后不要急忙將細管放入水中，先在空氣中放置幾秒，讓細管口內(nèi)的液氮充分揮發(fā)，以防止細管“放炮”。

(4)剪塑料細管封口時，應使用專用的細管剪刀，這樣剪的口齊而且園，輸精時精液不易倒流。

(5)注意細管和細管剪刀的衛(wèi)生，因為細管口部分要接觸精液。第39頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五(6)往輸精槍里裝細管時，將輸精槍的鋼芯先插入細管的棉塞端口內(nèi)，以防推精液時鋼芯走到細管外。如果推精液時阻力很大，可能就是鋼芯跑到細管外了或是鋼芯不直。

(7)用法式卡蘇槍將金屬槍體放入塑料外套時要行至塑料外套的頭部，否則輸精時頭部的塑料部分可能會打折。塑料外套長了，應剪去一段。

(8)輸精部位不能太深，尤其是使用有塑料外鞘的輸精槍，許多塑料外鞘的頭部不光滑，很容易損傷子宮內(nèi)膜。

(9)輸精器槍體不要碰折，鋼絲彎曲后推細管棉塞困難。

(10)個別青年母牛或土雜種母牛子宮頸開口小，沒有輸精槍體的直徑粗，無法通過子宮頸。碰到這種情況，可用顆粒精液輸精，顆粒精液的輸精器比細管輸精槍細。沒有顆粒精液時，可將細管精液推入試管內(nèi)，加入近1毫升生理鹽水或其它解凍液，用顆粒輸精器輸精。

第40頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第41頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五液氮罐在使用中需要注意什么問題？

(1)液氮罐放置在蔭涼避靜處，室內(nèi)通風。

(2)運輸和搬運中要防止震蕩和碰撞。貯存罐不能作為運輸罐使用。

(3)罐外保持衛(wèi)生，罐內(nèi)注意無菌。許多病菌在液氮低溫下不會死亡，液氮罐內(nèi)也可能傳播病菌，因此不要用不衛(wèi)生的器具接觸液氮，不要將不衛(wèi)生的繩袋等放入罐內(nèi)。每年應將罐內(nèi)清洗一次，液氮罐停用時，應將罐內(nèi)的顆粒等清理干凈，否則罐內(nèi)會生霉菌。

(4)取凍精后及時蓋罐塞。為了減少液氮消耗，罐口處可用塑料、膠皮等適當密封，但仍要留有通氣的縫隙，不可絕對密封。

(5)注意液氮面，絕對不能干罐，干罐后罐內(nèi)保存的東西即報廢，液面高度剩1/3時應補充液氮。如果添加不方便，應將精液沉至罐底，浸入液氮中。第42頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五冷凍精液在取用中應注意什么問題？

(1)取凍精時，提筒只允許提至液氮罐頸口水平線下，嚴禁提出罐口，而且停留時間不能超過10秒，需要繼續(xù)操作時，應將提筒浸入液氮后再提起操作。

(2)向另一液氮罐轉(zhuǎn)移凍精時，提筒離開液氮面的時間不能超過5秒；

(3)顆粒凍精要放入系口的紗布袋內(nèi)，不能直接放入提筒內(nèi)，否則取凍精后提筒再次入液氮時，提筒內(nèi)液氮沸騰，凍精會漂出提筒，可將紗布袋口線繩系一個可滑動的活扣，易開易合，取用方便。

(4)取凍精的鑷子，拴凍精袋的線繩等接觸凍精和液氮的物品要衛(wèi)生。

(5)取顆粒凍精時，用止血鉗比鑷子好，凍精不易滑落。第43頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五6、難孕牛治療第44頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五難孕牛的概念

母牛不孕癥為暫時性或永久性的繁殖障礙。繁殖率降低，則產(chǎn)奶量下降，飼養(yǎng)管理和治療及配種開支增大。診斷標準為全年配種牛的純種奶牛，一般產(chǎn)奶量的母牛產(chǎn)后80天、高產(chǎn)奶牛120天，青年牛20月齡、超過這個時間即屬難孕牛。農(nóng)牧區(qū)飼養(yǎng)的牛，由于季節(jié)和飼養(yǎng)管理條件的限制，常季節(jié)性發(fā)情，正常配種3個情期不孕的?；騾⒓优浞N70天未受胎的牛為難孕牛。

第45頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五難孕牛診斷

(1)調(diào)查病史，查明原因、癥狀、發(fā)病頭數(shù)、年齡、飼養(yǎng)管理、精液品質(zhì)、輸精技術、繁殖史、既往癥等。

(2)臨床檢查全身、陰道、直腸檢查。

(3)實驗室檢查在實驗室做微生物、子宮內(nèi)膜活組織和激素測定等。

第46頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五先天性不孕癥治療

(1)幼稚病—生殖器官發(fā)育不全；

治療：

公畜刺激；

按摩卵巢子宮；

激光穴位照射。

激素治療法有：HCG靜脈注射或肌肉注射2500-5000單位；

PMSG1500IU肌肉注射；

雌二醇或苯甲酸雌二醇5-20mg；

已烯雌酚5-20mg。

第47頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五(2)兩性畸形(雌雄間體，半陰陽)─無法治療、淘汰；

(3)異性孿生不孕—受雄激素影響在性分化中造成，染色體異常，直檢時摸不出正常的子宮和卵巢，陰道短小，為盲端，輸精器無法插入；這種母牛應淘汰。

(4)生殖道畸形

單子宮角

子宮頸閉鎖

雙頸雙口

膣肛第48頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五第49頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五后天性不孕癥治療

(1)營養(yǎng)性：瘦弱、過肥、飼料不全價、品質(zhì)不良。

①VitA

10-20萬單位，間隔5-7天，用3-4次；

②VitD

2.5-10萬單位，間隔7天用3-4次，同時加強運動和光照；

③VitE100-200ml，間隔5-7天使用3次；

④日糧中補充比例適當?shù)牡V物質(zhì)和微量元素。

(2)氣候性：嚴冬、酷暑。

(3)管理性：高產(chǎn)、使役過度。

(4)繁殖技術性：漏配，技術操作不過關。

(5)衰老性：絕情期13-15歲。

第50頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五休情母牛常用的治療方法

FSH100-200單位生理鹽水稀釋3-4ml，肌肉注射；

LH100-200單位生理鹽水稀釋3-4ml，肌肉注射；

HCG靜脈注射2500-5000單位，肌肉注射5000-20000單位；

LHRH-A200-1000微克肌肉注射；

PMSG1000-2000IU肌肉注射；

孕激素注射、埋植或陰道栓法處理9－12天；

雌二醇20-30mg一次肌肉注射。

三合激素按1ml/100kg肌肉注射；

LHRH-A25-100μg，隔9天后PGF2α；

電針、激光或催情的中藥方劑；

垂體后葉素；

胎盤組織液20ml；

濃鹽水灌注子宮。第51頁，共56頁，2023年，2月20日，星期五持久黃體的診斷和治療

未妊娠，近期也未配種的母牛，經(jīng)2-3次檢查，同部位存在著同一黃體20天以上可確診為持久黃體。

治療方法：PGF2α類似物，宮注