河北農(nóng)業(yè)大學免疫學課件第二十二章免疫學檢測原理及臨床應用詳解

河北農(nóng)業(yè)大學免疫學課件第二十二章免疫學檢測原理及臨床應用詳解演示文稿當前1頁，總共44頁。優(yōu)選河北農(nóng)業(yè)大學免疫學課件第二十二章免疫學檢測原理及臨床應用當前2頁，總共44頁。目錄基于抗原-抗體反應的檢測方法免疫細胞檢測免疫分子檢測免疫學診斷與監(jiān)測當前3頁，總共44頁。第一節(jié)基于抗原-抗體反應的檢測方法抗原與抗體在體內(nèi)體外均能發(fā)生特異性結(jié)合反應，因抗體主要來自血清，因此在體外進行的抗原抗體反應又稱為血清學反應或免疫血清學技術(shù)。當前4頁，總共44頁。一、抗原-抗體反應的特點1.特異性與交叉性交叉反應是區(qū)分血清型和亞型的重要依據(jù)?。‘斍?頁，總共44頁。2.抗原-抗體結(jié)合的帶現(xiàn)象與可見性當前6頁，總共44頁。3.可逆性當前7頁，總共44頁。4.反應階段性第一階段：特異性結(jié)合階段

特點：反應快（數(shù)秒至數(shù)分鐘）、無可見反應第二階段：反應的可見階段

特點：反應慢（數(shù)分鐘至數(shù)小時）、表現(xiàn)為凝集、沉淀、補體結(jié)合等反應，所受影響因素較多。當前8頁，總共44頁。二、影響抗原抗體結(jié)合的因素電解質(zhì)：生理鹽水、緩沖液溫度：37或4攝氏度酸堿度：pH值在6~8抗原和抗體的性質(zhì)（抗體特異性和親和力）振蕩：適當雜物和異物當前9頁，總共44頁。三、抗原-抗體反應檢測方法反應類型及試驗名稱反應類型及試驗名稱凝集試驗直接凝集試驗標記抗體技術(shù)免疫熒光抗體技術(shù)間接凝集試驗免疫酶標記技術(shù)乳膠凝集試驗放射免疫測定技術(shù)沉淀試驗絮狀沉淀試驗化學發(fā)光標記技術(shù)瓊脂免疫擴散試驗免疫復合物散射反應免疫電泳血清學新技術(shù)免疫傳感技術(shù)火箭免疫電泳免疫印記技術(shù)補體參與的試驗補體結(jié)合試驗、補體依賴性細胞毒試驗、免疫黏附血凝試驗免疫膠體金技術(shù)免疫沉淀技術(shù)免疫核酸探針技術(shù)中和試驗病毒中和試驗免疫電鏡技術(shù)毒素中和試驗免疫蛋白芯片技術(shù)當前10頁，總共44頁。1.凝集反應

直接凝集

當前11頁，總共44頁。間接凝集當前12頁，總共44頁。間接凝集抑制試驗當前13頁，總共44頁。

協(xié)同凝集試驗

人血清IgG可與葡萄球菌A蛋白（SPA）結(jié)合，將已知特異性抗體IgG結(jié)合至SPA,IgGFab暴露在金黃色葡萄球菌菌體表面，其與相應抗原特異性結(jié)合，導致金黃色葡萄球菌凝集。

當前14頁，總共44頁。2.沉淀反應單向免疫擴散雙向免疫擴散當前15頁，總共44頁。

雙向雙擴散沉淀線與抗原成分的關(guān)系當前16頁，總共44頁。免疫電泳當前17頁，總共44頁。3.補體參與的反應溶血空斑試驗當前18頁，總共44頁。4.免疫標記技術(shù)（1）免疫熒光法當前19頁，總共44頁。唾液腺中的狂犬病毒單純皰疹病毒

當前20頁，總共44頁。（2）酶免疫測定用酶標記的抗體進行抗原抗體反應。一般用酶標儀測定光密度值（OD值）以反應抗原或抗體含量。靈敏度可達ng~pg/ml水平。常用標記的酶為辣根過氧化物酶（HRP）、堿性磷酸酶（AP）等。當前21頁，總共44頁。酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzymelinked-immunosorbentassay,ELISA）:將已知抗原或抗體吸附在固相載體表面，在固相表面經(jīng)行抗原抗體反應，通過洗滌固相表面抗原抗體復合物與液相中游離成分分離。當前22頁，總共44頁。酶標儀當前23頁，總共44頁。當前24頁，總共44頁。當前25頁，總共44頁。酶聯(lián)免疫斑點試驗（enzymelinkedimmunospotassay,ELISPOT）當前26頁，總共44頁。BAS-ELISA（生物素-親和素系統(tǒng)ELISA）當前27頁，總共44頁。免疫組化技術(shù)當前28頁，總共44頁。免疫膠體金技術(shù)當前29頁，總共44頁。當前30頁，總共44頁。免疫膠體金檢測技術(shù)用于懷孕診斷（懷孕）（未懷孕）當前31頁，總共44頁。當前32頁，總共44頁。免疫印跡當前33頁，總共44頁。當前34頁，總共44頁。5.血凝抑制試驗血凝試驗：檢測抗原（新城疫、流感病毒等）血凝抑制試驗：檢測抗體當前35頁，總共44頁。第二節(jié)免疫細胞檢測外周血單個核細胞的分離：

用淋巴細胞分離液（葡聚糖-泛影葡酸）密度梯度離心法。淋巴細胞亞群分離或計數(shù)：

流式細胞術(shù)、磁分離技術(shù)、花環(huán)試驗等。樹突狀細胞誘生和分離：

誘生：IL-4、GM-CSF鑒定：CD1a和CD83一、免疫細胞及其亞類計數(shù)當前36頁，總共44頁。流式細胞技術(shù)的一般過程當前37頁，總共44頁。E玫瑰花環(huán)試驗當前38頁，總共44頁。二、淋巴細胞功能測定1.T細胞轉(zhuǎn)化試驗（T細胞增殖試驗）

當前39頁，總共44頁。2.溶血空斑形成試驗當前40頁，總共44頁。3.巨噬細胞吞噬功能的檢測1234當前41頁，總共44頁。5當前42頁，總共44頁。4.測定淋巴細胞功能的體內(nèi)試驗機體對特定抗原產(chǎn)生初次細胞免疫應答，再用相同抗原做皮膚試驗，出現(xiàn)以局部紅腫為特征的遲發(fā)型超敏反應。結(jié)核桿菌、免疫缺陷病等當前43頁，總共44頁。第三節(jié)免疫分子