超敏反應(yīng)性疾病及其免疫檢測(cè)

關(guān)于超敏反應(yīng)性疾病及其免疫檢測(cè)第1頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日超敏反應(yīng)分為四型

（依發(fā)生機(jī)制和臨床特點(diǎn)）：Ⅰ型超敏反應(yīng)(速發(fā)型超敏反應(yīng))Ⅱ型超敏反應(yīng)(細(xì)胞溶解型或細(xì)胞毒型)Ⅲ型超敏反應(yīng)(免疫復(fù)合物型或血管炎型)Ⅳ型超敏反應(yīng)(遲發(fā)型超敏反應(yīng))

第2頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

Ⅰ型超敏反應(yīng)

特點(diǎn)：發(fā)生快，恢復(fù)快；常引起生理功能紊亂，一般無(wú)組織損傷；由IgE介導(dǎo)，肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞參與有明顯的個(gè)體差異和遺傳背景。第3頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

Ⅰ型超敏反應(yīng)一.參與Ⅰ型超敏反應(yīng)的成分(一)變應(yīng)原★藥物或化學(xué)物質(zhì)---青霉素、磺胺等

★

吸入性變應(yīng)原---花粉、屋塵(塵螨、皮屑、真菌的孢子等

★食物變應(yīng)原---魚(yú)、蝦、肉、蛋、牛奶等

★接觸性變應(yīng)原---工業(yè)產(chǎn)品及合成物第4頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

Ⅰ型超敏反應(yīng)(二)抗體IgE(三)細(xì)胞肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞IgEFc受體嗜酸性粒細(xì)胞

第5頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日第6頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

預(yù)先存在的介質(zhì)（脫顆粒）組織胺(histamine)趨化因子激肽原酶蛋白水解酶白三烯（Leucotrienes，LTs）前列腺素（PGD2）即刻\早期晚期I型超敏反應(yīng)發(fā)生的機(jī)制

血小板活化因子（Plateletactivityfactor，PAF）

新合成的介質(zhì)第7頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日Ⅰ型超敏反應(yīng)的常見(jiàn)疾病

（一）過(guò)敏性休克藥物過(guò)敏性休克血清過(guò)敏性休克（二）呼吸道過(guò)敏反應(yīng)過(guò)敏性鼻炎(枯草熱)、支氣管哮喘（三）消化道過(guò)敏反應(yīng)（四）皮膚過(guò)敏反應(yīng)蕁麻疹、濕疹、血管神經(jīng)性水腫。

第8頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

蕁麻疹

濕疹第9頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日結(jié)膜炎哮喘病第10頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

I型超敏反應(yīng)免疫學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目第11頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日皮膚試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理：變應(yīng)原致敏者皮膚Ag+IgE（M、B)皮膚挑刺、劃痕皮內(nèi)注射釋放生物活性介質(zhì)20-30m局部皮膚出現(xiàn)紅暈、紅斑、風(fēng)團(tuán)

陽(yáng)性第12頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日皮膚試驗(yàn)皮內(nèi)試驗(yàn)方法皮膚消毒→變應(yīng)原提取液注入前臂內(nèi)側(cè)皮內(nèi)（0.01-0.02ml）→2-3mm的皮丘→兩種間距2.2-5.0cm→15-25分鐘觀察結(jié)果陰性對(duì)照--生理鹽水陽(yáng)性對(duì)照--鹽酸組胺第13頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日皮膚試驗(yàn)假陽(yáng)性原因變應(yīng)原稀釋液偏酸或偏堿患者有皮膚劃痕癥抗原不純和被污染抗原量注射過(guò)多假陰性原因變應(yīng)原抗原性喪失或濃度過(guò)低患者皮膚反應(yīng)較低受試者正使用抗組胺類(lèi)藥或激素類(lèi)藥注射部位過(guò)深或注射量太少

第14頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日Ⅰ型超敏反應(yīng)臨床意義尋找變應(yīng)原預(yù)防藥物或疫苗過(guò)敏應(yīng)用評(píng)價(jià)過(guò)敏原有限食物過(guò)敏與皮膚試驗(yàn)相關(guān)性較差選擇過(guò)敏原應(yīng)結(jié)合實(shí)際情況第15頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日Ⅰ型超敏反應(yīng)血清總IgE檢測(cè)常用方法：免疫比濁法化學(xué)發(fā)光免疫法酶聯(lián)免疫吸附法---適用于中小實(shí)驗(yàn)室臨床意義：升高見(jiàn)于Ⅰ型超敏反應(yīng)性疾病，寄生蟲(chóng)感染，

IgE型多發(fā)性骨髓瘤應(yīng)用評(píng)價(jià)：應(yīng)建立當(dāng)?shù)厝巳篒gE水平的參考區(qū)間

臨床實(shí)驗(yàn)室常用第16頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日Ⅰ型超敏反應(yīng)特異性IgE檢測(cè)（sIgE）放射變應(yīng)原吸附試驗(yàn)免疫印跡測(cè)定法第17頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

斑點(diǎn)酶免疫印跡法實(shí)驗(yàn)原理

用NC膜作為固相支持物，檢測(cè)區(qū)的不同區(qū)域包被有特異性的過(guò)敏原。檢測(cè)時(shí)將稀釋的病人血清加入反應(yīng)槽內(nèi)，血清中的sIgE與NC膜上的相應(yīng)過(guò)敏原結(jié)合，再加入酶標(biāo)記的抗人IgE抗體，此抗體會(huì)與檢測(cè)區(qū)NC膜上的sIgE結(jié)合，然后加入底物顯色。通過(guò)顯色區(qū)帶確定血清中含有哪種sIgE，進(jìn)而判斷待檢者對(duì)哪種過(guò)敏原過(guò)敏。第18頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日第19頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日稀釋好的洗液將檢測(cè)條要充分浸透，放在搖床上搖10分鐘倒掉洗液，加入稀釋好的測(cè)試者血清，放于搖床室溫反應(yīng)1.5小時(shí)倒掉小槽中的血清，依次加入洗液，震蕩10分鐘，重復(fù)三次

每槽加入堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgE，放于搖床上室溫反應(yīng)30分鐘將堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgE倒掉，用洗液洗三次，每次10分鐘

加入堿性磷酸酶底物，放于搖床，避光反應(yīng)約10分鐘去掉底物溶液，用純水洗三次，每次5分鐘操作步驟將檢測(cè)條放在干燥紙上，等檢測(cè)條完全干燥后判定檢測(cè)結(jié)果第20頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日結(jié)果分析通過(guò)顯色區(qū)帶確定血清中含有哪種sIgE，進(jìn)而判斷待檢者對(duì)哪種過(guò)敏原過(guò)敏。臨床意義

slgE測(cè)定是體外檢測(cè)變應(yīng)原的重要手段，主要用于Ⅰ型超敏反應(yīng)的診斷。該檢測(cè)條包被有多種特異性過(guò)敏原，通過(guò)檢測(cè)血漿（血清）中過(guò)敏原slgE，篩查待檢者對(duì)何種過(guò)敏原過(guò)敏，為臨床進(jìn)行脫敏治療奠定基礎(chǔ)。第21頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

II型超敏反應(yīng)定義：

II型超敏反應(yīng)又稱(chēng)細(xì)胞毒型（cytotoxictype）或細(xì)胞溶解型（cytolytictype）超敏反應(yīng)，它是由靶細(xì)胞表面的抗原與相應(yīng)IgG或IgM類(lèi)抗體結(jié)合后，在補(bǔ)體、巨噬細(xì)胞和NK細(xì)胞參與下，引起的以細(xì)胞溶解或組織損傷為主的病理性免疫反應(yīng)。第22頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

II型超敏反應(yīng)特點(diǎn)：1.直接或間接與細(xì)胞有關(guān)2.IgG或IgM介導(dǎo)3.補(bǔ)體、吞噬細(xì)胞、NK細(xì)胞參與4.造成細(xì)胞溶解或功能紊亂第23頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

II型超敏反應(yīng)靶細(xì)胞：正常組織細(xì)胞、改變的自身組織細(xì)胞、修飾的自身組織細(xì)胞抗原：同種異型抗原、共同抗原、變性自身抗原、外來(lái)抗原抗體：IgG和IgM類(lèi)抗體參與細(xì)胞損傷的物質(zhì)：補(bǔ)體、吞噬細(xì)胞、NK細(xì)胞第24頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日第25頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日變應(yīng)原第26頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日輸血反應(yīng)（transfusionreaction）新生兒溶血（hemolyticofthenewborn）自身免疫性溶血性貧血（autoimmunehemolyticanemia）藥物過(guò)敏性血細(xì)胞減少甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)（Gravesdisease）鏈球菌感染后腎小球腎炎TypeIIHypersensitivityReactions:ExamplesofDiseases第27頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日第28頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)(Grave’s病)

第29頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日5第30頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日II型超敏反應(yīng)免疫學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目第31頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日＋患者紅細(xì)胞Coombs試劑檢測(cè)紅細(xì)胞上不完全抗體直接Coombs試驗(yàn)第32頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日試管法操作步驟用生理鹽水配5%紅細(xì)胞懸液取潔凈小試管2支，1管加1滴5%紅細(xì)胞懸液，另一管加生理鹽水作對(duì)照

在生理鹽水和5%紅細(xì)胞懸液中分別加入診斷試劑一滴，使其混勻，室溫稍待片刻1000r離心1min或3000r離心15s。

取出試管先以肉眼觀察有無(wú)溶血，再輕輕搖動(dòng)試管，如有凝集，則為陽(yáng)性結(jié)果；如無(wú)凝集，應(yīng)在室溫延長(zhǎng)15~30min的反應(yīng)時(shí)間，再離心看結(jié)果。第33頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日結(jié)果分析

生理鹽水對(duì)照不應(yīng)發(fā)生凝集，為均勻渾濁的乳狀液。在紅細(xì)胞懸液中，如紅細(xì)胞凝集成片狀，邊緣皺褶如花邊狀或邊緣松散為陽(yáng)性。如與對(duì)照相同，為陰性。第34頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

臨床意義

直接Coombs試驗(yàn)用于檢測(cè)患者紅細(xì)胞上不完全抗體，Coombs試驗(yàn)陽(yáng)性可見(jiàn)于自身免疫性溶血性貧血、冷凝集素綜合征、藥物誘發(fā)的免疫性溶血性貧血、新生兒同種免疫性溶血病、某些高球蛋白血癥患者，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類(lèi)風(fēng)濕、惡性腫瘤等。第35頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日患者血清靶紅細(xì)胞致敏紅細(xì)胞Coombs試劑檢測(cè)血清中的抗紅細(xì)胞抗體間接Coombs試驗(yàn)第36頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日微柱法操作步驟撕開(kāi)微柱凝膠卡密封紙，標(biāo)記加1%篩選紅細(xì)胞50μl及受檢者血清25μl37℃孵育15min離心機(jī)離心10min，1000r/min

觀察結(jié)果，如紅細(xì)胞懸浮在反應(yīng)管頂部或凝膠中，則為陽(yáng)性結(jié)果；反之，如紅細(xì)胞沉于凝膠底部（管底尖部），則為陰性結(jié)果。第37頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日結(jié)果分析

-100%的紅細(xì)胞沉在微管的底部+/-100%的紅細(xì)胞沉在微管的下端1/3之內(nèi)1+80%的紅細(xì)胞沉在微管的下端2/3之內(nèi)2+80%的紅細(xì)胞沉在微管的上端2/3之內(nèi)3+80%的紅細(xì)胞沉在微管的上端1/3之內(nèi)4+凝集的細(xì)胞全部處于微管的頂部d.p.雙群Hemo.溶血反應(yīng)格局及判斷標(biāo)準(zhǔn)第38頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

臨床意義

間接Coombs試驗(yàn)用于檢測(cè)患者游離血清中的不完全抗體。此實(shí)驗(yàn)多用于檢測(cè)母體Rh（D）抗體，以便及早發(fā)現(xiàn)和避免新生兒溶血癥的發(fā)生，亦可對(duì)紅細(xì)胞不相容的輸血所產(chǎn)生的血型抗體進(jìn)行檢測(cè)。第39頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

III型超敏反應(yīng)

定義：

III型超敏反應(yīng)是指由可溶性免疫復(fù)合物沉積于局部或全身多處毛細(xì)血管基底膜，通過(guò)激活補(bǔ)體,并在血小板、嗜堿性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等的參與下，引起的以充血水腫、局部壞死和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)為主要特征的炎癥反應(yīng)和組織損傷。第40頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日BloodcellantigenAdsorbeddrugorDrugmetaboliteAntibodytodrugcomplementLysis藥物過(guò)敏性血細(xì)胞減少第41頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

III型超敏反應(yīng)

特點(diǎn)：1.形成中等大?。?06Da）、可溶性（19s）復(fù)合物（IC)，IC沉積在血管基底膜上2.IgG,IgM或IgA介導(dǎo)3.補(bǔ)體、中性粒細(xì)胞參與4.造成血管及周?chē)M織炎癥第42頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

免疫復(fù)合物易于形成與沉積的因素1.抗原成分在體內(nèi)長(zhǎng)期滯留2.血管通透性增強(qiáng)3.組織的解剖學(xué)及血流動(dòng)力學(xué)

免疫復(fù)合物易沉積于靜脈壓較高及形成渦流的毛細(xì)血管迂回處，如腎小球基底膜及關(guān)節(jié)滑膜、肝、脾、血管等部位。4.免疫復(fù)合物的性質(zhì)

中等大小，可溶性免疫復(fù)合物組織內(nèi)沉積。

III型超敏反應(yīng)第43頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日第44頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日Arthus反應(yīng)及類(lèi)Arthus反應(yīng)(局部免疫復(fù)合物病)血清病（serumsickness）鏈球菌感染后腎小球腎炎類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoidarthritis）系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）等臨床常見(jiàn)的III型超敏反應(yīng)性疾病

III型超敏反應(yīng)第45頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

RA患者手指關(guān)節(jié)實(shí)質(zhì)性損傷第46頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日III型超敏反應(yīng)免疫學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目第47頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

PEG比濁法實(shí)驗(yàn)原理

本試驗(yàn)是檢測(cè)抗原非特異性循環(huán)免疫復(fù)合物的一種方法。PEG是環(huán)氧乙烷和水的多聚物，為一種不帶電荷的直鏈大分子多糖。終濃度為3%～4%的PEG能相對(duì)選擇性地沉淀CIC。用分光光度計(jì)測(cè)定濁度，反應(yīng)沉淀物含量。第48頁(yè)，共57頁(yè)，2023年，2月20日，星期日

臨床意義

循環(huán)免疫復(fù)合物（Circulationimmunecomplex，CIC）又稱(chēng)可溶性免疫復(fù)合物，分子量為50萬(wàn)～100萬(wàn)，沉降系數(shù)8.8～19S，它不易被吞噬細(xì)胞吞噬，又不能經(jīng)腎小球排出，可較長(zhǎng)時(shí)間在血液中循環(huán)，一旦大量循環(huán)免疫復(fù)合物沉積于組織中，則引起組織損傷及相關(guān)的免疫復(fù)合物病。CIC陽(yáng)性常見(jiàn)于：1.部分自身免疫性疾病，如SLE，類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等；2.膜增殖性腎炎，鏈球菌感染后腎炎；