【高中生物】微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)(第1課時)課件 高二下學(xué)期生物人教版（2019）選擇性必修3

發(fā)酵工程第1章第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

——微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)本節(jié)聚焦什么是培養(yǎng)基？如何配制？什么是無菌技術(shù)？怎樣進行酵母菌的純培養(yǎng)？食用自制酸奶導(dǎo)致腸胃不適屢見不鮮從社會中來P9主要原因是在制作過程中有雜菌混入防止雜菌污染，獲得純凈的微生物培養(yǎng)物是研究和應(yīng)用微生物的前提，也是發(fā)酵工程的重要基礎(chǔ)那么，怎樣才能保證無處不在的雜菌不混入發(fā)酵物中呢？在實驗室培養(yǎng)微生物的基本思路：——培養(yǎng)基①為微生物提供合適的營養(yǎng)②為微生物提供合適的環(huán)境條件——培養(yǎng)環(huán)境③確保其他微生物無法混入——無菌技術(shù)④將需要的微生物分離出來——分離培養(yǎng)無細胞結(jié)構(gòu)原核細胞真核細胞微生物：真菌：酵母菌、毛霉等；原生生物：草履蟲、變形蟲等微生物的類群病毒：SARS病毒、新冠病毒等RNA病毒；噬菌體等DNA病毒細菌：乳酸菌、醋酸菌藍細菌、大腸桿菌、硝化細菌；放線菌、支原體、衣原體等難以用肉眼觀察的微小生物的統(tǒng)稱本章提及的微生物主要指用于發(fā)酵的細菌和真菌。P9相關(guān)信息天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基一

培養(yǎng)基的配置1.概念：人們按照微生物對

的不同需求，配制出供其_________的營養(yǎng)基質(zhì)。2.作用：用以

微生物或

。3.類型：長有酵母菌菌落的固體培養(yǎng)基(加凝固劑瓊脂)營養(yǎng)物質(zhì)生長繁殖培養(yǎng)、分離、鑒定、保存積累其代謝物P9液體培養(yǎng)基①按功能分類：②按成分組成：③按物理性質(zhì)：工業(yè)生產(chǎn)微生物分離、鑒定、活菌計數(shù)、保藏菌種觀察微生物的運動、分類鑒定工業(yè)生產(chǎn)分類、鑒定培養(yǎng)、分離鑒定液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基微生物在固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長，可以形成肉眼可見的菌落一

培養(yǎng)基的配置P104.培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成①碳源：無機碳源有機碳源例如CO2、CO32-、HCO3-等例如葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等無機氮源有機氮源例如N2、NO3-、NH3、NH4＋等例如牛肉膏、蛋白胨、尿素等提供碳元素的物質(zhì)提供氮元素的物質(zhì)②氮源：培養(yǎng)固氮微生物，不需要添加氮源(1)基本營養(yǎng)物質(zhì)：①碳源、②氮源、③水、④無機鹽自養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物各種有機物是微生物合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)所必需的（培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物，不需要添加碳源）(2)還需滿足微生物對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)、氧氣的需求一

培養(yǎng)基的配置4.培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成④培養(yǎng)厭氧微生物時，需要提供_____的條件。①培養(yǎng)乳酸桿菌時，需要在培養(yǎng)基中添加_______；②培養(yǎng)霉菌時，需要將培養(yǎng)基調(diào)至_____；③培養(yǎng)細菌時，需要將培養(yǎng)基調(diào)至

；維生素酸性中性或弱堿性無氧表1-1

1000ml牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)組成組分含量提供的主要營養(yǎng)牛肉膏5g碳源、氮源、磷酸鹽和維生素等蛋白胨10g碳源、氮源和維生素等NaCl5g無機鹽H2O定容至1000ml水P10主要指生長因子：維生素、氨基酸、堿基等1.下表是某微生物培養(yǎng)基成分，據(jù)表分析：成分KH2PO4NaHPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂水含量1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g適量(1)該培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基？

。

為什么？

。(2)表中的KH2PO4、NaHPO4和MgSO4·7H2O主要為微生物提供

，葡萄糖為微生物提供

，尿素為微生物提供

。(3)該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物同化作用類型是

。理由是什么

。(4)不同微生物所需的pH不同，培養(yǎng)細菌時需要將pH調(diào)至

；培養(yǎng)乳酸桿菌時要在培養(yǎng)基中添加

?！倦S堂練習(xí)】

該微生物的碳源和氮源是有機物異養(yǎng)型微生物固體培養(yǎng)基該培養(yǎng)基成分中含有凝固劑瓊脂無機鹽氮源碳源中性或弱堿性維生素二無菌技術(shù)1.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是

。2.無菌技術(shù)應(yīng)圍繞著如何避免雜菌的污染展開，主要包括

。

防止雜菌污染消毒和滅菌

培養(yǎng)皿接種環(huán)培養(yǎng)基①對操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒。②對用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌。做好消毒和滅菌工作后，要注意：避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍物品接觸。為了避免周圍環(huán)境中微生物的污染，接下來的許多操作應(yīng)在超凈工作臺并在酒精燈火焰附近進行。P103.消毒和滅菌工作主要包括兩個方面：①消毒有些細菌在一定的條件下，細胞里面形成一個橢圓形的休眠體，叫做芽孢芽孢壁很厚，對干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強的抵抗力。例如，有的細菌的芽孢，煮沸3小時以后才死亡

細菌、原生動物、真菌和植物等產(chǎn)生的一種有繁殖作用的無性生殖細胞。能直接發(fā)育成新個體。

芽孢孢子類型條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍消毒滅菌4.常用的消毒和滅菌方法：僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法強烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子煮沸消毒法巴氏消毒法化學(xué)藥劑消毒法紫外線消毒法灼燒滅菌法干熱滅菌法（高壓蒸汽滅菌法）日常用品，如筷子、碗等不耐高溫的液體，如牛奶酒精——擦拭雙手氯氣——消毒水源接種室（箱）、超凈工作臺接種工具玻璃器皿、金屬工具培養(yǎng)基、容器濕熱滅菌P11接種室、接種箱或超凈工作臺在使用前可用紫外線(破壞微生物的DNA結(jié)構(gòu))照射30min。在照射前，適量噴灑石碳酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加強消毒效果常用的滅菌方法：①濕熱滅菌利用沸水、流通蒸汽或高壓蒸汽進行滅菌的方法。高壓蒸汽滅菌效果最好，100kPa、121℃下維持15～30min，常用于培養(yǎng)基、無菌水等的滅菌。原理：高溫蒸汽破壞蛋白質(zhì)、核酸等結(jié)構(gòu)使其變性。優(yōu)點：操作簡便，效果可靠，可以殺滅所有的生物，包括最耐熱的某些微生物的休眠體?；颈３峙囵B(yǎng)基的營養(yǎng)成分不被破壞。注：（1）使用后的培養(yǎng)基必須滅菌后才能丟棄，以免污染環(huán)境。P11(2)使用高壓蒸汽滅菌鍋時，一定要將鍋內(nèi)冷空氣徹底排出，才能密封升溫，否則，可能引起鍋內(nèi)壓力達到設(shè)定值而溫度不能達到要求；②干熱滅菌：干熱滅菌箱內(nèi)160～170℃下加熱2～3h。對象：耐高溫，需保持干燥的物品，適用于玻璃器皿(如試管、培養(yǎng)皿、吸管、注射器)、金屬器具(如針頭、鑷子、剪刀等)的滅菌。干熱滅菌箱常用的滅菌方法：③灼燒滅菌常用于涂布器、接種環(huán)、接種針、試管口或其它金屬用具等的滅菌。以及接種過程中的試管口或瓶口等易被污染部位直接在酒精燈火焰的充分燃燒層（外焰）灼燒P112.無菌技術(shù)的方法、類型和對象[連一連]【隨堂練習(xí)】

3.在生產(chǎn)、生活和科研實踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。回答下列問題： (1)在實驗室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具________(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。 (2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法，與煮沸消毒法相比，這種方法的優(yōu)點是________________________________________。可以在達到消毒目的