動(dòng)物體細(xì)胞雜交技術(shù)過(guò)程

動(dòng)物體細(xì)胞雜交技術(shù)過(guò)程第1頁(yè)/共20頁(yè)雜種植株篩選融合AB的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁脫分化愈傷組織再分化植物細(xì)胞的融合植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A雜種細(xì)胞AB去壁去壁人工誘導(dǎo)方法？促進(jìn)融合的方法？融合完成的標(biāo)志植物細(xì)胞B植物體細(xì)胞雜交技術(shù)過(guò)程原理？原理？第2頁(yè)/共20頁(yè)成果和未解決的問(wèn)題

成果：克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交的障礙，出現(xiàn)自然界沒(méi)有的新品種。未解決的問(wèn)題：未能讓雜種植物按照人們的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良。第3頁(yè)/共20頁(yè)如果將牛的細(xì)胞與植物細(xì)胞雜交，得到綠色的小奶牛，那豈不是只要曬曬太陽(yáng)就可以擠出牛奶啦！動(dòng)物細(xì)胞也能融合嗎？第4頁(yè)/共20頁(yè)一、動(dòng)物細(xì)胞融合1、動(dòng)物融合的過(guò)程請(qǐng)同學(xué)們閱讀課本P52動(dòng)物融合第5頁(yè)/共20頁(yè)不同DNA的兩個(gè)細(xì)胞滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合融合后的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂1、動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程第6頁(yè)/共20頁(yè)思考題1、植物體細(xì)胞雜交時(shí)首先應(yīng)用什么方法去掉細(xì)胞壁？酶解法，如纖維素酶或果膠酶2、動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)需要進(jìn)行去壁處理嗎？為什么？無(wú)需，因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞無(wú)細(xì)胞壁3、植物體細(xì)胞雜交誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的方法有哪些？離心、電激等物理方法；PEG等化學(xué)方法4、動(dòng)物細(xì)胞融合能利用上述兩類(lèi)方法嗎？還有其他方法嗎？能還可以利用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)5、植物體細(xì)胞雜交應(yīng)先進(jìn)行原生質(zhì)體的融合再進(jìn)行組織培養(yǎng)形成完整的雜種個(gè)體，動(dòng)物細(xì)胞融合后能形成雜種動(dòng)物個(gè)體嗎？不能6、你能歸納出什么叫做動(dòng)物細(xì)胞融合嗎？？第7頁(yè)/共20頁(yè)2、動(dòng)物細(xì)胞融合的概念

動(dòng)物細(xì)胞融合也稱(chēng)細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程第8頁(yè)/共20頁(yè)主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒物理（離心、振動(dòng)、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性原理動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較第9頁(yè)/共20頁(yè)7、你推測(cè)一下動(dòng)物細(xì)胞融合有哪些方面的應(yīng)用嗎？思考題

利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)誘導(dǎo)形成雜交瘤細(xì)胞8、在生產(chǎn)實(shí)際中雜交瘤細(xì)胞有怎樣的應(yīng)用？

生產(chǎn)單克隆抗體第10頁(yè)/共20頁(yè)提問(wèn)？1.抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的？２、一個(gè)Ｂ淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)能分泌多種抗體嗎？３、一種抗原侵入機(jī)體之后，引起機(jī)體免疫反應(yīng)產(chǎn)生的抗體只有一種嗎？４.簡(jiǎn)述獲得抗體的傳統(tǒng)途徑？５、這種方法獲得的抗體有什么缺陷？二、單克隆抗體第11頁(yè)/共20頁(yè)

抗原動(dòng)物體刺激漿細(xì)胞

抗體抗體不純特異性差、純度低；產(chǎn)量低、反應(yīng)不夠靈敏傳統(tǒng)血清抗體的制備抗原不純

每個(gè)Ｂ淋巴細(xì)胞只能分泌一種抗體，由一個(gè)Ｂ淋巴細(xì)胞增殖產(chǎn)生的細(xì)胞群分泌的抗體化學(xué)成份是單一的。如何獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體？體外培養(yǎng)淋巴細(xì)胞能無(wú)限增殖嗎?

體外培養(yǎng)單個(gè)Ｂ淋巴細(xì)胞，提取分泌的抗體怎樣解決這個(gè)問(wèn)題？第12頁(yè)/共20頁(yè)設(shè)計(jì)方案：一個(gè)B淋巴細(xì)胞－－只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞－－能無(wú)限增殖雜種細(xì)胞二、單克隆抗體第13頁(yè)/共20頁(yè)2.制備過(guò)程：誘導(dǎo)其融合的方法有哪些？融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞怎樣篩選出雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞有何優(yōu)點(diǎn)注射抗原的目的是什么為何要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專(zhuān)一抗體檢測(cè)，多次篩選大量增殖雜交瘤細(xì)胞獲得單抗的方法第14頁(yè)/共20頁(yè)3.單克隆抗體的應(yīng)用：

①在基礎(chǔ)理論研究中具有重要意義

②在疾病診斷、治療和預(yù)防方面，具有

特異性高、靈敏度高等優(yōu)越性。③生物導(dǎo)彈二、單克隆抗體第15頁(yè)/共20頁(yè)思考題★制備單克隆抗體時(shí)，為什么要選用B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞？

★假如你掌握了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，你想用它來(lái)解決什么問(wèn)題？第16頁(yè)/共20頁(yè)BBBB瘤瘤瘤瘤細(xì)胞融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞？篩選雜種細(xì)胞已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩條DNA合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒(méi)有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管