第一章樣品前處理-傳統(tǒng)樣品前處理技術(shù)(new)

課程介紹一、課程性質(zhì)現(xiàn)代藥物分析理論：化學(xué)+儀器分析+藥物分析(綜合性學(xué)科)專業(yè)課：藥學(xué)專業(yè)選修課；二、課程目標(biāo)啟發(fā)學(xué)生對實(shí)際樣品分析的思考，培養(yǎng)能解決實(shí)際問題的藥物分析工作者。第一頁，共27頁。三、課程要求熟練掌握現(xiàn)代藥物分析理論的基本內(nèi)容和應(yīng)用，包括各種樣品前處理方法和藥物分析方法的基本原理、特點(diǎn)、適用范圍及實(shí)際應(yīng)用。跟蹤和了解藥物分析新進(jìn)展；第二頁，共27頁。四、課程具體內(nèi)容第一章樣品前處理方法（6-8學(xué)時）第二章高效液相色譜法實(shí)際應(yīng)用（4-6學(xué)時）第三章毛細(xì)管電泳法及其應(yīng)用（2學(xué)時）第三頁，共27頁。1.《環(huán)境樣品前處理技術(shù)》，江桂斌編，化學(xué)工業(yè)出版社,20042.《固相萃取技術(shù)與應(yīng)用》，陳小華、汪群杰編著，科學(xué)出版社，20103.《毛細(xì)管電泳技術(shù)及應(yīng)用》，陳義編，化學(xué)工業(yè)出版社,20064.《毛細(xì)管電泳導(dǎo)論》，林炳承編，科學(xué)出版社,1996五、主要參考書第四頁，共27頁。國內(nèi)：1.分析化學(xué)2.藥物分析3.色譜4.分析試驗(yàn)室5.分析科學(xué)學(xué)報(bào)6.光譜學(xué)與光譜分析主要參考學(xué)術(shù)期刊國外：1.AnalyticalChemistry2.Analyst3.ChromatographyA/B4.Talanta5.AnalyticalScience6.Electrophoresis第五頁，共27頁。六、成績標(biāo)準(zhǔn)學(xué)生成績來自于兩個部分

A.期末考試：85%B.平時成績：15%，出勤及進(jìn)展報(bào)告第六頁，共27頁。第一章

樣品前處理方法

專題介紹一：傳統(tǒng)方法第七頁，共27頁。Fig.1BioanalyticalsamplepreparationprocessJ.DrugDevelopmentResearch,2007,68:107-133第八頁，共27頁。

Complicatedoperations

Time-consuming

Fig.2TimedistributionofanalysisprocessR.E.MajorsLC/GCMagazine,1991,1997,2002第九頁，共27頁。R.E.MajorsLC/GCMagazine,1991,1997,2002

Fig.3Errordistributionofanalysisprocess第十頁，共27頁。生物樣品中小分子的檢測每升尿液中含有500-1000mg蛋白質(zhì)；每分升（0.1L）血清和血漿：含有約1000多種蛋白質(zhì)，總量約為6-8g；0.03mg的氯化鈉0.002mg的氯化鉀0.015-0.0385mg的尿素其他有機(jī)化合物或無機(jī)化合物第十一頁，共27頁。概述“傳統(tǒng)”技術(shù)每個技術(shù)都有一定的技術(shù)基礎(chǔ)，有開拓和發(fā)展針對每種技術(shù)，始終牢記下列問題：用的哪些理論？如何運(yùn)用的？你如何運(yùn)用這些信息去改善你的工作？思考：傳統(tǒng)樣品方法將總會有其一席之地的，但是，其影響力在逐漸示弱；未來的發(fā)展方向：有什么新發(fā)展？大的版圖的轉(zhuǎn)換：如高通量“在線”第十二頁，共27頁。傳統(tǒng)的樣品制備技術(shù)

液-固L-S液固萃?。⊿oxhlet）需要合適的循環(huán)Flushing與draining適當(dāng)?shù)娜軇┝克恳线m水不溶性的溶劑加干燥劑第十三頁，共27頁。傳統(tǒng)的樣品制備技術(shù)

液-固L-S最近的發(fā)展：自動索氏提取“Soxtec”放入沸騰的溶劑中60分鐘用濃縮的溶劑洗滌60分鐘揮發(fā)溶劑優(yōu)勢：比傳統(tǒng)法用較少的溶劑更快第十四頁，共27頁。傳統(tǒng)的樣品制備技術(shù)

液-液L-L（1）連續(xù)液液萃取萃取溶劑要“dripthrough”樣品回流速率常形成乳液最新發(fā)展：集成萃取器溶劑的回收：在萃取中丟失較少；回收溶劑可再用提高萃取效率溶劑比水重溶劑比水輕第十五頁，共27頁。傳統(tǒng)的樣品制備技術(shù)

液-液L-L（2）分離漏斗瓶子必須要有25%以上的空間搖晃：時間很關(guān)鍵，強(qiáng)度不重要排氣排液層次：僅與上次萃取有關(guān)乳液化新進(jìn)展：自動搖床可同時搖晃多個較溫和地?fù)u動仍然要注意排氣第十六頁，共27頁。傳統(tǒng)的樣品制備技術(shù)

液-液L-L（3）其它：相分離紙表面處理：有機(jī)相過，水不過相分離：自動且完全無需分液漏斗VestaSepCLE:Whatman小規(guī)模的LLE系統(tǒng)離心力使得樣品通過膜：增加表面積，提高效率；分離杯分開兩相但是，體積小，K要求高蓋子放樣品分離杯子VersaSepCLE管第十七頁，共27頁。傳統(tǒng)的樣品制備技術(shù)

液-液L-L（4）新近發(fā)展：Mixxor萃取器A：同心罐B：接受器C：活塞桿D：提取溶劑快速提?。?個活塞運(yùn)作等于40次搖晃第十八頁，共27頁。傳統(tǒng)的樣品制備技術(shù)

乳化（Emulsions）什么是乳化？一種液體以極微小液滴均勻地分散在互不相溶的另一種液體中的作用。乳化形成什么？相似者相溶（幾乎）不是完全不相溶的（表面活性劑）在一相中高粘度在兩相表面有固體體積比較?。]有足夠的有機(jī)相）第十九頁，共27頁。傳統(tǒng)的樣品制備技術(shù)

乳化--消除消除乳化的方法等待：機(jī)械擾動和攪拌超聲加“鹽”：提高水溶液的離子強(qiáng)度提高相比例：加多些有機(jī)相通過填充柱：玻璃毛，兩性硅藻土（diatomaceousearth)離心制冷/冷凍第二十頁，共27頁。傳統(tǒng)的樣品制備技術(shù)

溶劑揮發(fā)氮吹旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)較新的發(fā)展：溶劑的回收減少放射溶劑回收溶劑水平的監(jiān)測第二十一頁，共27頁。溫度必須低于B.P.(最少10-20度）避免高速氣流(FastGasFlow)避免蒸發(fā)至干氮?dú)鈸]發(fā)設(shè)備傳統(tǒng)的樣品制備技術(shù)

溶劑揮發(fā)--氮吹氮吹儀第二十二頁，共27頁。傳統(tǒng)的樣品制備技術(shù)

溶劑揮發(fā)--旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀制冷系統(tǒng)放空接受瓶冷卻接受瓶避免漏氣、蒸干施加一定的真空度第二十三頁，共27頁。傳統(tǒng)的樣品制備技術(shù)

過濾（1）：過濾：把物質(zhì)（溶解的或懸浮的）從其所在的相（氣、液）中分出來。過濾的介質(zhì)：深層過濾器：物質(zhì)在過濾介質(zhì)表面和中間都有吸收材料：有紙質(zhì)和玻璃纖維質(zhì)的保留率：98%相應(yīng)的尺寸的物質(zhì)能保留效率：隨厚度增加而提高表面過濾器：物質(zhì)僅在過濾介質(zhì)表面有吸收；常稱“過濾膜”材料：合成聚合物（硝酸纖維素、尼龍、聚四氟）分離特點(diǎn)：尺寸分布較窄效率：低于深層過濾器第二十四頁，共27頁。傳統(tǒng)的樣品制備技術(shù)

過濾（2）：選擇合適的過濾器：應(yīng)考慮樣品多少:大體積要大的直徑樣品中有多少雜物:若需要，應(yīng)加預(yù)過濾樣品介質(zhì)：水相，有機(jī)相，腐蝕性的纖維素類：適用有機(jī)和無機(jī)，無酸堿反應(yīng)玻璃纖維類：穩(wěn)定，但有吸附膜類：相似者相溶過濾后質(zhì)量要求：決定過濾器的選擇樣品體積（升）濾膜尺寸（毫米）0.01130.05250.1-0.3471-5905-20140>20293膜直徑與樣品量玻璃纖維過濾膜選擇第二十五頁，共27頁。傳統(tǒng)的樣品制備技術(shù)

過濾（3）：膜過濾器：其它考慮機(jī)械強(qiáng)度壓力、孔徑、容量不能折過濾膜可萃取物：干擾吸附：分析物的損失（如蛋白結(jié)合）孔徑：0.2um,HPLC:0.45um第二十六頁，共27頁。傳統(tǒng)的樣品制備技術(shù)

過濾（4）：最新進(jìn)展：深膜：孔徑：1）廣泛的選擇；2）多種流速構(gòu)造上：高純，可作為膜分離器的預(yù)分離裝置膜過濾器