實驗二放線菌真菌形態(tài)觀察_第1頁
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實驗二放線菌真菌形態(tài)觀察第1頁/共12頁實驗二放線菌、真菌形態(tài)的觀察

細(xì)菌芽孢染色第2頁/共12頁目的要求學(xué)習(xí)觀察放線菌和真菌形態(tài)的基本技術(shù)；加深對放線菌和真菌形態(tài)特征的理解；掌握細(xì)菌芽孢染色的方法。第3頁/共12頁原理放線菌與真菌雖然都有分支狀菌絲，但兩者在系統(tǒng)發(fā)育學(xué)上分屬兩大界：放線菌---原核生物，16SrRNA；真菌---真核生物（低等），18SrRNA。鏈霉菌是放線菌的重要類群，其菌絲體分為基內(nèi)菌絲（營養(yǎng)菌絲）、氣生菌絲兩部分，氣生菌絲的頂端分化為孢子絲，生長到一定時期形成成熟的孢子?？捎貌迤ㄓ^察鏈霉菌的孢子。酵母菌是單細(xì)胞真核微生物，其細(xì)胞比細(xì)菌細(xì)胞大，呈卵圓形或柱形。可制成水浸片在高倍鏡下觀察酵母菌的形態(tài)和繁殖方式（芽殖）。第4頁/共12頁原理（2）美藍(lán)染色可區(qū)分死活細(xì)胞，因為在活細(xì)胞中美藍(lán)被還原為無色，死細(xì)胞不能使美藍(lán)發(fā)生還原反應(yīng)，故死細(xì)胞呈現(xiàn)為藍(lán)色。本實驗中芽孢染色采用石炭酸復(fù)紅初染（加熱）和美藍(lán)復(fù)染法，基于石炭酸復(fù)紅為酸性染料，與菌體結(jié)合差，易被水沖洗掉，而芽孢中的復(fù)紅染料卻難以脫去（芽孢壁較厚，芽孢一旦著色后難以脫色）。結(jié)果是菌體被染成藍(lán)色，芽孢呈紅色。第5頁/共12頁第6頁/共12頁插片法高氏1號瓊脂培養(yǎng)基倒平板無菌蓋玻片斜插（45oC）入瓊脂劃線接種放線菌

28oC培養(yǎng)6-7d

取出蓋玻片固定染色水洗鏡檢第7頁/共12頁水浸片滴加呂氏美藍(lán)于載玻片

接種環(huán)取酵母培養(yǎng)物

蓋上蓋玻片（防止氣泡產(chǎn)生）鏡檢第8頁/共12頁Streptomycesscabies第9頁/共12頁Saccharomycescerevisiae第10頁/共12

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