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第三章消毒與滅菌詳解演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有74頁\編輯于星期五優(yōu)選第三章消毒與滅菌現(xiàn)在是2頁\一共有74頁\編輯于星期五

防腐指抑制物品中微生物繁殖的方法。用來防腐的化學(xué)藥品稱防腐劑,它與消毒劑無嚴(yán)格的界限,同種化學(xué)藥品高濃度時為消毒劑,低濃度時為防腐劑。

無菌是指沒有活微生物的狀態(tài)。防止微生物進(jìn)入動物機(jī)體或其他物體的操作技術(shù)稱無菌操作。現(xiàn)在是3頁\一共有74頁\編輯于星期五殺菌--即滅菌。抑菌--即防腐??咕?-包括防腐和殺菌。

現(xiàn)在是4頁\一共有74頁\編輯于星期五第一節(jié)物理性滅菌、消毒及抑菌方法現(xiàn)在是5頁\一共有74頁\編輯于星期五一、熱力消毒、滅菌法

現(xiàn)在是6頁\一共有74頁\編輯于星期五高溫殺菌的機(jī)理高溫對微生物有明顯的致死作用,高溫可直接破壞菌體蛋白、核酸及酶系統(tǒng),導(dǎo)致菌體死亡。高溫滅菌干熱滅菌濕熱滅菌現(xiàn)在是7頁\一共有74頁\編輯于星期五(一)干熱滅菌法1、火焰滅菌法用火直接燒死物體中的微生物,是一種最徹底的滅菌法。燒灼接種環(huán)、試管口、瓶口等焚燒動物尸體、污染廢棄物等現(xiàn)在是8頁\一共有74頁\編輯于星期五

酒精燈(左)電子火焰滅菌器(右)現(xiàn)在是9頁\一共有74頁\編輯于星期五

火焰滅菌轉(zhuǎn)盤(左)無火焰高溫滅菌器(右)現(xiàn)在是10頁\一共有74頁\編輯于星期五

滅菌操作現(xiàn)在是11頁\一共有74頁\編輯于星期五2、熱空氣滅菌法又稱干烤滅菌,是在干烤箱中用熱空氣滅菌。該法以輻射傳導(dǎo)熱,穿透性差,需用較高溫度及較長時間。主要用于玻璃器皿、瓷器、金屬器械等的滅菌。通常用160~170℃維持2h,能殺死一切微生物及芽孢。現(xiàn)在是12頁\一共有74頁\編輯于星期五現(xiàn)在是13頁\一共有74頁\編輯于星期五現(xiàn)在是14頁\一共有74頁\編輯于星期五(二)濕熱滅菌(消毒)法包括以下5種煮沸高壓蒸汽滅菌法巴氏消毒法間歇滅菌法流通蒸汽滅菌法現(xiàn)在是15頁\一共有74頁\編輯于星期五1、煮沸煮沸15~20min可殺死細(xì)菌的繁殖體、真菌和病毒,但殺不死芽孢。此法常用于刀剪、注射器、針頭及橡膠制品的消毒。現(xiàn)在是16頁\一共有74頁\編輯于星期五

煮沸消毒盒煮沸消毒器現(xiàn)在是17頁\一共有74頁\編輯于星期五2、高壓蒸汽滅菌法即利用高壓蒸汽滅菌器(高壓鍋)滅菌,是應(yīng)用最廣、最有效的滅菌法。用15磅的壓力(溫度為121.3℃)維持15~20min,可殺死一切微生物及芽孢。一切耐高溫的物品均可用此法滅菌?,F(xiàn)在是18頁\一共有74頁\編輯于星期五

高壓蒸汽滅菌器現(xiàn)在是19頁\一共有74頁\編輯于星期五現(xiàn)在是20頁\一共有74頁\編輯于星期五3、巴氏消毒法用于液態(tài)食品的一種消毒法,常用于牛奶、啤酒、果酒、葡萄酒和一些飲料。特點:利用盡可能的低溫和短的時間,最大限度的殺死食品中的病原菌和一般雜菌,同時最大限度地保持食品的營養(yǎng)成分和風(fēng)味不發(fā)生改變現(xiàn)在是21頁\一共有74頁\編輯于星期五巴氏消毒的三種方法:①低溫維持法62~65℃維持30min②高溫瞬時法71~72℃保持15s③超高溫法132℃保持1~2s現(xiàn)在是22頁\一共有74頁\編輯于星期五

巴氏消毒裝置現(xiàn)在是23頁\一共有74頁\編輯于星期五二、輻射滅菌法

現(xiàn)在是24頁\一共有74頁\編輯于星期五(一)非電離輻射包括:紫外線日光可見光紅外線微波現(xiàn)在是25頁\一共有74頁\編輯于星期五1、紫外線波長200~300nm的紫外線具有殺菌作用,其中253~265nm段殺菌力最強(qiáng)。殺菌機(jī)理:主要破壞菌體細(xì)胞DNA的構(gòu)型,使DNA分子中間形成胸腺嘧啶二聚體,干擾DNA的復(fù)制,造成菌體的死亡,此外,紫外線也能破壞菌體蛋白和酶?,F(xiàn)在是26頁\一共有74頁\編輯于星期五缺點:穿透力差,普通玻璃、塵埃等均可阻擋紫外線,所以,紫外線只適合空間及物體表面的消毒,如無菌室、手術(shù)室等空間、墻壁及實驗臺表面的消毒?,F(xiàn)在是27頁\一共有74頁\編輯于星期五(二)電離輻射包括放射性同位素的射線(α、β、γ射線)、X射線等。小計量可誘發(fā)微生物變易,大計量具有抑菌及殺菌作用。在實際工作中主要是用X、β、γ射線,用于消毒、食品保鮮和微生物育種等方面。現(xiàn)在是28頁\一共有74頁\編輯于星期五三、超聲波現(xiàn)在是29頁\一共有74頁\編輯于星期五殺菌機(jī)理超聲波幾乎對所有的微生物都有殺滅作用,主要是以機(jī)械作用和氧化作用破壞菌體細(xì)胞壁、細(xì)胞膜,使內(nèi)容物逸出。用途可用超聲波裂解菌體細(xì)胞,研究菌體的構(gòu)造、化學(xué)組成、核酸、抗原、酶等。也可用超聲波從組織中提取病毒。現(xiàn)在是30頁\一共有74頁\編輯于星期五四、濾過除菌現(xiàn)在是31頁\一共有74頁\編輯于星期五濾過除菌是通過機(jī)械阻留作用除去液體及氣體中的細(xì)菌,所用裝置叫濾器。濾器上含有很多微細(xì)小孔,可使液體及氣體通過,細(xì)菌等大于孔徑的物體不能通過,借以獲得無菌液體及氣體?,F(xiàn)在是32頁\一共有74頁\編輯于星期五用途主要用于不耐高溫的物體,如血清、毒素、抗毒素、酶、抗生素、維生素、氨基酸及特殊培養(yǎng)基等的除菌。濾器不能除去病毒、霉形體和L型細(xì)菌?,F(xiàn)在是33頁\一共有74頁\編輯于星期五濾器的種類與型號濾器的種類很多,每種又有許多不同的型號,型號的區(qū)別主要是濾膜孔徑大小不同。除菌濾器孔徑通常為0.2~0.22μm。實驗室常用濾器耐酸玻璃濾器蔡氏濾器微孔濾膜現(xiàn)在是34頁\一共有74頁\編輯于星期五

玻璃耐酸濾器現(xiàn)在是35頁\一共有74頁\編輯于星期五五、低溫抑菌法

現(xiàn)在是36頁\一共有74頁\編輯于星期五低溫抑菌的機(jī)理大多數(shù)微生物對低溫抵抗力很強(qiáng),在低溫條件下微生物的代謝活動降低到最低水平,生長繁殖停止,但仍可長時間保持生命。低溫在微生物學(xué)工作中的用途主要用于保存微生物,如:0~4℃保存細(xì)菌-20℃以下保存病毒現(xiàn)在是37頁\一共有74頁\編輯于星期五低溫保存微生物注意事項有少數(shù)細(xì)菌和病毒對低溫特別敏感,如淋球菌、巴氏桿菌在4℃保存比室溫保存死亡更快,皰疹病毒在-20℃保存比4℃死亡更快。反復(fù)凍融容易引起微生物死亡。冷凍保存細(xì)菌時,溫度必須迅速降低,以免菌體內(nèi)的水分形成結(jié)晶冰而損傷細(xì)胞膜?,F(xiàn)在是38頁\一共有74頁\編輯于星期五冷凍真空干燥法(凍干法)保存微生物及生物制品最好的方法方法:先將要保存的菌種加上保護(hù)劑(如甘油、蔗糖、脫脂乳、血清、二甲基亞楓等),裝到安瓿中,在凍干機(jī)中迅速冷凍、抽真空、干燥、封口。這樣保存的菌種經(jīng)多年不失去活性。現(xiàn)在是39頁\一共有74頁\編輯于星期五第二節(jié)化學(xué)消毒滅菌法現(xiàn)在是40頁\一共有74頁\編輯于星期五一、化學(xué)消毒劑及防腐劑

消毒劑用于殺滅病原微生物的化學(xué)藥物。防腐劑也稱抑菌劑,是用于抑制微生物生長繁殖的化學(xué)藥物。二者統(tǒng)稱消毒防腐劑現(xiàn)在是41頁\一共有74頁\編輯于星期五化學(xué)消毒防腐劑的種類:根據(jù)對菌體的作用分為:使菌體蛋白變性或凝固的,如酚類(高濃度)、醇類、重金屬鹽類(高濃度)、酸堿類、醛類損傷胞漿膜的,如酚類(低濃度)、表面活性劑、醇類等脂溶劑干擾細(xì)菌酶系統(tǒng)和代謝的,如某些氧化劑、重金屬鹽類(低濃度)改變核酸功能的,如染料、烷化劑等現(xiàn)在是42頁\一共有74頁\編輯于星期五使用方法化學(xué)消毒劑與防腐劑不僅可殺死病原菌,同時對動物的組織細(xì)胞也有損害作用,所以它只能外用,用于體表、環(huán)境及物體的消毒。浸泡擦拭氣體熏蒸噴霧及噴灑等現(xiàn)在是43頁\一共有74頁\編輯于星期五選藥原則在實際工作中應(yīng)根據(jù)用途與消毒劑的特點來選擇藥品、使用方法和濃度。最理想的消毒劑應(yīng)是殺菌力強(qiáng)、價格低、無腐蝕性、能長期保存、對動物無毒性或毒性較小、無殘留或?qū)Νh(huán)境無污染的化學(xué)藥品。現(xiàn)在是44頁\一共有74頁\編輯于星期五二、影響消毒劑作用的因素

1、消毒劑的性質(zhì)2、消毒劑的濃度3、作用時間與其他環(huán)境條件4、微生物的種類現(xiàn)在是45頁\一共有74頁\編輯于星期五三、化學(xué)治療劑

用于消除動物體內(nèi)病原微生物或其他寄生物的化學(xué)藥品稱化學(xué)治療劑(chemo-therapeuticagent)。如磺胺類藥物、呋喃類藥物和其他抗代謝藥物。這些藥物的作用有較強(qiáng)的選擇性,主要作用于病原微生物,而對機(jī)體毒副作用較小,主要用于臨床治療?,F(xiàn)在是46頁\一共有74頁\編輯于星期五第三節(jié)生物因素對微生物的作用現(xiàn)在是47頁\一共有74頁\編輯于星期五一、抗生素、細(xì)菌素和植物殺菌素的殺菌作用

現(xiàn)在是48頁\一共有74頁\編輯于星期五(一)抗生素(antibiotics)是某些微生物在代謝過程中產(chǎn)生的一類能殺死或抑制另一些微生物的化學(xué)物質(zhì)。其主要來源于放線菌和霉菌,細(xì)菌產(chǎn)生的僅有多粘菌素、桿菌肽等少數(shù)幾種。目前發(fā)現(xiàn)的抗生素有2500多種,但臨床常用的僅幾十種。分為廣譜抗生素和窄譜抗生素。抗生素可用于治療細(xì)菌感染和抑菌?,F(xiàn)在是49頁\一共有74頁\編輯于星期五(二)細(xì)菌素(bacteriocin)是某些細(xì)菌產(chǎn)生的一類具有殺菌作用的蛋白質(zhì),只能作用于同種細(xì)菌不同的菌株或與它有親緣關(guān)系的其他細(xì)菌。例如:

大腸菌素作用大腸桿菌其他菌株和與它有親緣關(guān)系的志賀氏菌、沙門氏菌、克雷伯氏菌等。細(xì)菌素目前只用于細(xì)菌的分型和流行病學(xué)調(diào)查,對治療疾病意義不大?,F(xiàn)在是50頁\一共有74頁\編輯于星期五(三)植物殺菌素(phytocide)是某些植物中存在的殺菌物質(zhì),如黃連、板藍(lán)根等都含有殺菌物質(zhì)。現(xiàn)在是51頁\一共有74頁\編輯于星期五二、噬菌體

現(xiàn)在是52頁\一共有74頁\編輯于星期五噬菌體(bacteriophage,phage)是寄生于細(xì)菌、放線菌、霉形體、螺旋體、真菌等其他微生物的一類病毒。在自然界分布及廣,凡是有上述微生物的地方,都有相應(yīng)種類的噬菌體。現(xiàn)在是53頁\一共有74頁\編輯于星期五1、噬菌體的形態(tài)結(jié)構(gòu)噬菌體有四種外形,即蝌蚪形、球形、絲狀和檸檬形。典型的噬菌體呈蝌蚪形,由頭部和尾部組成。頭部由核酸和蛋白質(zhì)衣殼構(gòu)成,呈20面體對稱;尾部主要含蛋白質(zhì),呈螺旋形,分尾領(lǐng)、尾鞘、尾髓、尾板、尾刺和尾絲幾部分,尾部有的能收縮,有的不能收縮?,F(xiàn)在是54頁\一共有74頁\編輯于星期五現(xiàn)在是55頁\一共有74頁\編輯于星期五2、噬菌體的增殖噬菌體只能在活的敏感菌細(xì)胞內(nèi)增殖,并將菌體細(xì)胞裂解。其寄生生活有嚴(yán)格的菌種及菌型的特異性,即一種噬菌體只能寄生及裂解一種和它相應(yīng)的細(xì)菌,或僅作用于該種細(xì)菌的某一型。噬菌體的增殖分4個階段

吸附—侵入—生物合成—成熟和釋放現(xiàn)在是56頁\一共有74頁\編輯于星期五吸附現(xiàn)在是57頁\一共有74頁\編輯于星期五侵入現(xiàn)在是58頁\一共有74頁\編輯于星期五生物合成(復(fù)制和成熟)現(xiàn)在是59頁\一共有74頁\編輯于星期五釋放現(xiàn)在是60頁\一共有74頁\編輯于星期五噬菌體生長跡象的觀察:噬菌體可使混濁的細(xì)菌液體培養(yǎng)物變清朗,在固體培養(yǎng)基上可形成噬菌斑。一個噬菌斑由一個噬菌體繁殖而成,不同噬菌體產(chǎn)生的噬菌斑大小、形態(tài)、邊緣和透明度均不同,所以,噬菌斑可用于噬菌體的鑒定、純種分離和計數(shù)?,F(xiàn)在是61頁\一共有74頁\編輯于星期五3、噬菌體與寄主的關(guān)系有些噬菌體在菌體細(xì)胞增殖后,迅速導(dǎo)致菌體裂解,此種噬菌體稱毒性噬菌體或烈性噬菌體?,F(xiàn)在是62頁\一共有74頁\編輯于星期五烈性噬菌體的溶解周期現(xiàn)在是63頁\一共有74頁\編輯于星期五有些噬菌體感染細(xì)菌后,并不馬上裂解細(xì)菌,而是將其基因整合到細(xì)菌的基因組中,與細(xì)菌的DNA一道復(fù)制,并隨細(xì)菌的分裂而傳給后代,此種噬菌體叫溫和噬菌體,整合到細(xì)菌DNA上的噬菌體基因叫前噬菌體,帶有前噬菌體的細(xì)菌叫溶原性細(xì)菌。溫和噬菌體可能會在某個世代自發(fā)地從菌體DNA上脫離并復(fù)制,引起菌體裂解而釋放出噬菌體?,F(xiàn)在是64頁\一共有74頁\編輯于星期五溫和噬菌體的增殖現(xiàn)在是65頁\一共有74頁\編輯于星期五噬菌體的應(yīng)用由于噬菌體感染具有菌種或菌型的特異性,故可用噬菌體進(jìn)行細(xì)菌的鑒定和分型、檢測未知細(xì)菌、進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查。此外,噬菌體也是分子生物學(xué)及基因工程研究的工具。現(xiàn)在是66頁\一共有74頁\編輯于星期五第四節(jié)微生物實驗室的生物安全現(xiàn)在是67頁\一共有74頁\編輯于星期五一、生物安全的概念和一般要求現(xiàn)在是68頁\一共有74頁\編輯于星期五(一)生物安全是指與生物有關(guān)的各種因素對社會、經(jīng)濟(jì)、人類健康可能產(chǎn)生的潛在的有害影響。而獸醫(yī)微生物實驗室的生物安全是指在轉(zhuǎn)移、檢查和處理病料、污染材料等過程中,避免污染環(huán)境及對人員造成危害?,F(xiàn)在是69頁\一共有74頁\編輯于星期五

微生物實驗室的生物安全有三層含義是指防止病

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