弧菌科及檢驗(yàn)

弧菌科及檢驗(yàn)第1頁(yè)/共37頁(yè)弧菌科種類(lèi)弧菌屬氣單胞菌屬鄰單胞菌屬發(fā)光菌屬等第2頁(yè)/共37頁(yè)弧菌科共同特征革蘭陰性菌需氧兼性厭氧營(yíng)養(yǎng)要求不高氧化酶＋發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣第3頁(yè)/共37頁(yè)弧菌科三個(gè)菌屬的鑒別試驗(yàn)弧菌屬氣單胞菌屬鄰單胞菌屬甘露醇+/-+-鳥(niǎo)氨酸+/--+精氨酸+/-+/-+O/129敏感SRSTCBS生長(zhǎng)+--嗜鹽性+/---第4頁(yè)/共37頁(yè)霍亂弧菌是引起烈性腸道傳染病霍亂的病原體包括古典生物型和ElTor生物型O139是新的流行菌株第5頁(yè)/共37頁(yè)形態(tài)染色革蘭陰性弧形或逗點(diǎn)狀單鞭毛，運(yùn)動(dòng)呈“穿梭樣”或“流星樣”無(wú)芽孢，無(wú)莢膜在新鮮糞便中成“魚(yú)群樣”排列第6頁(yè)/共37頁(yè)霍亂弧菌革蘭染色鞭毛染色第7頁(yè)/共37頁(yè)培養(yǎng)特性兼性厭氧營(yíng)養(yǎng)要求不高耐堿不耐酸，常用pH8.4～9.2堿性培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中形成菌膜菌落圓形、較大、扁平第8頁(yè)/共37頁(yè)霍亂弧菌常用培養(yǎng)基堿性蛋白胨水堿性瓊脂平板慶大霉素瓊脂平板（含亞碲酸鉀）硫代硫酸鈉-枸櫞酸鹽-膽鹽-蔗糖瓊脂平板（TCBS）亞碲酸鉀瓊脂平板第9頁(yè)/共37頁(yè)生化反應(yīng)試驗(yàn)名稱(chēng)結(jié)果試驗(yàn)名稱(chēng)結(jié)果氧化酶+吲哚+硝酸鹽還原+葡萄糖+賴(lài)氨酸+蔗糖+鳥(niǎo)氨酸+甘露醇+精氨酸雙水解-0％、1％NaCl+V-Pd7％、10％NaCl-明膠液化+第10頁(yè)/共37頁(yè)抗原結(jié)構(gòu)和分型O抗原H抗原第11頁(yè)/共37頁(yè)霍亂弧菌生物型O1群霍亂弧菌分為古典生物型和ElTor生物型兩種生物型具有相同的抗原結(jié)構(gòu)兩種生物型多數(shù)生物學(xué)性狀相似第12頁(yè)/共37頁(yè)霍亂弧菌兩種生物型的鑒別鑒別試驗(yàn)古典生物型ElTor生物型V-P-+羊紅細(xì)胞溶解-+50U多粘菌素SR雞紅細(xì)胞凝集-+Ⅳ組噬菌體裂解+-Ⅴ組噬菌體裂解-+第13頁(yè)/共37頁(yè)霍亂弧菌分群、型O抗原是霍亂弧菌分群和型的基礎(chǔ)根據(jù)O抗原不同分為139個(gè)血清群O1群包括古典生物型和ElTor生物型其他群稱(chēng)為非O1群（非凝集弧菌）O1群血清型（見(jiàn)下表）血清型A抗原B抗原C抗原小川型（AB）++-稻葉型（AC）+-+彥島型（ABC）+++第14頁(yè)/共37頁(yè)抵抗力與變異ElTor型抵抗力較古典型強(qiáng)，在水中存活時(shí)間長(zhǎng)對(duì)酸性物質(zhì)敏感對(duì)慶大霉素耐受多次傳代可失去典型形態(tài)而成為桿狀第15頁(yè)/共37頁(yè)臨床意義致病物質(zhì)：霍亂腸毒素，導(dǎo)致小腸上皮細(xì)胞分泌功能亢進(jìn)，分泌大量腸液。所致疾?。航?jīng)腸道傳染，引起烈性腸道傳染病－－霍亂，為甲類(lèi)傳染病。典型病人糞便呈“米泔水”樣病后可獲得牢固免疫，以SIgA為主。我國(guó)霍亂流行菌株以ElTor小川型為主。第16頁(yè)/共37頁(yè)作用機(jī)制示意圖第17頁(yè)/共37頁(yè)第18頁(yè)/共37頁(yè)微生物檢驗(yàn)－－標(biāo)本采集發(fā)病早期采集標(biāo)本以“米泔水”樣便為主，及時(shí)送檢卡－布培養(yǎng)基保存嚴(yán)密包裝，專(zhuān)人送檢第19頁(yè)/共37頁(yè)檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌培養(yǎng)堿性蛋白胨水分離培養(yǎng)（TCBS、堿性平板）生化鑒定分型血清學(xué)鑒定確診報(bào)告初步報(bào)告快速診斷直接涂片動(dòng)力、制動(dòng)試驗(yàn)第20頁(yè)/共37頁(yè)檢驗(yàn)方法－－顯微鏡檢查涂片染色：標(biāo)本直接涂片革蘭染色，注意形態(tài)、排列動(dòng)力觀察：壓滴法或暗視野鏡檢，注意運(yùn)動(dòng)方式制動(dòng)試驗(yàn)：O1診斷血清與菌體結(jié)合，動(dòng)力消失第21頁(yè)/共37頁(yè)分離培養(yǎng)標(biāo)本接種堿性蛋白胨水增菌6～8小時(shí)，轉(zhuǎn)種TCBS或慶大霉素瓊脂，TCBS：出現(xiàn)黃色菌落慶大霉素瓊脂：出現(xiàn)中心灰褐色的菌落第22頁(yè)/共37頁(yè)鑒定生化反應(yīng)：粘絲試驗(yàn)、霍亂紅反應(yīng)確定血清群：O1群診斷血清與可疑菌落作玻片凝集，以確定是否為O1群確定血清型：與分型診斷血清作玻片凝集，以確定血清型別確定生物型：第Ⅳ組噬菌體裂解試驗(yàn)多粘菌素B敏感試驗(yàn)雞紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)溶血試驗(yàn)第23頁(yè)/共37頁(yè)副溶血性弧菌－－生物學(xué)性狀革蘭陰性桿菌，或微彎，單端鞭毛，無(wú)芽孢，無(wú)莢膜營(yíng)養(yǎng)要求不高，嗜鹽性，最適鹽濃度3.5％NaCl，無(wú)鹽培養(yǎng)基不生長(zhǎng)TCBS：形成不發(fā)酵蔗糖的綠色菌落神奈川現(xiàn)象＋：致病性副溶血性弧菌能溶解人或兔紅細(xì)胞，不溶解馬紅細(xì)胞第24頁(yè)/共37頁(yè)副溶血性弧菌－－臨床意義致病物質(zhì)：溶血素（耐熱直接溶血素和耐熱相關(guān)溶血素）所致疾?。菏橙敫比苎曰【廴镜柠}腌食品，引起食物中毒第25頁(yè)/共37頁(yè)氣單胞菌屬形態(tài)染色：革蘭陰性桿菌，或球桿狀、絲狀，極端鞭毛，無(wú)芽孢生長(zhǎng)條件：兼性厭氧；營(yíng)養(yǎng)要求不高生長(zhǎng)溫度較寬，0℃～45℃嗜冷菌37℃以下生長(zhǎng)嗜溫菌10～42℃生長(zhǎng)第26頁(yè)/共37頁(yè)氣單胞菌屬生長(zhǎng)現(xiàn)象TCBS上不生長(zhǎng)血平板：灰白、光滑、凸起菌落腸道選擇平板：形成不發(fā)酵乳糖菌落生化反應(yīng)氧化酶＋、觸酶＋發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣6.5％NaCl不生長(zhǎng)O129不敏感多數(shù)菌株產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶，對(duì)青霉素耐藥第27頁(yè)/共37頁(yè)氣單胞菌屬－－臨床意義致病物質(zhì)：溶血毒素、細(xì)胞毒素所致疾?。耗c道感染：是夏季腹瀉常見(jiàn)病原菌腸外感染：敗血癥、傷口感染等多數(shù)菌株產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶，對(duì)青霉素耐藥第28頁(yè)/共37頁(yè)檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌分離培養(yǎng)（血平板、Mac）全面生化反應(yīng)可疑菌落腸毒素測(cè)定初步生化反應(yīng)涂片染色鏡檢血標(biāo)本氧化酶TCBS生長(zhǎng)O/129耐鹽試驗(yàn)第29頁(yè)/共37頁(yè)鑒定試驗(yàn)與腸道桿菌、非發(fā)酵菌鑒別與鄰單胞菌屬和弧菌屬鑒別氣單胞菌屬種間鑒別第30頁(yè)/共37頁(yè)腸道桿菌、非發(fā)酵菌、弧菌科鑒別鑒定試驗(yàn)?zāi)c桿菌科非發(fā)酵菌弧菌科氧化酶－＋＋葡萄糖氧化/發(fā)酵（O/F）FO／－F鞭毛周鞭毛單、叢、周單、叢第31頁(yè)/共37頁(yè)鑒定依據(jù)革蘭陰性桿菌，叢鞭毛腸道選擇平板上無(wú)色透明菌落氧化酶＋、葡萄糖發(fā)酵＋O/129：RTCBS：－6.5％NaCl：－第32頁(yè)/共37頁(yè)鄰單胞菌屬－－主要性狀只有一個(gè)菌種：類(lèi)志賀鄰單胞菌革蘭陰性桿菌，單鞭毛或叢鞭毛，無(wú)芽孢，無(wú)莢膜兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高在SS平板形成不發(fā)酵乳糖菌落氧化酶＋，葡萄糖發(fā)酵＋O/129：STCBS：不生長(zhǎng)6.5％NaCl：不生長(zhǎng)賴(lài)氨酸、鳥(niǎo)氨酸、精氨酸雙水解均＋多數(shù)菌株產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶，對(duì)青霉素耐藥第33頁(yè)/共37頁(yè)鄰單胞菌屬－－臨床意義腹瀉、食物中毒，多見(jiàn)于夏季敗血癥、腦膜炎等，多見(jiàn)于免疫力低下者，感染率低，但死亡率高。第34頁(yè)/共37頁(yè)鄰單胞菌屬－－檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌分離培養(yǎng)（血平板、Mac）全面生化反應(yīng)可疑菌落初步生化反應(yīng)