(31)-第3.3章基因工程抗體的制備一

基因工程抗體的制備一Question

為什么要制備基因工程抗體？3又稱重組抗體，是指利用重組DNA及蛋白質(zhì)工程技術(shù)對(duì)編碼抗體的基因按不同需要進(jìn)行加工改造和重新裝配，經(jīng)轉(zhuǎn)染適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞所表達(dá)的抗體分子?；蚬こ炭贵w定義4改造重組抗體：人源化抗體小分子抗體抗體融合蛋白雙特異性抗體篩選到的抗體：噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)基因工程抗體分類降低甚至消除人體對(duì)鼠單抗的排斥反應(yīng)分子量較小，易進(jìn)入病灶的核心部位可根據(jù)治療需要制備新型抗體可采用多種表達(dá)形式，大大降低生產(chǎn)成本基因工程抗體的優(yōu)點(diǎn)定義：是指利用DNA重組技術(shù)對(duì)鼠源的McAb進(jìn)行改造，使其大部分氨基酸序列為人源序列所取代而獲得的抗體。一、人源化抗體特點(diǎn)：

降低對(duì)人體的免疫原性保留單抗的特異性和親和力一、人源化抗體分類：人-鼠嵌合抗體改形抗體一、人源化抗體利用DNA重組技術(shù)，從雜交瘤細(xì)胞分離出鼠源McAbIgG可變區(qū)基因，與人IgG恒定區(qū)基因連接，插入適當(dāng)表達(dá)載體，轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞，即可表達(dá)人-鼠嵌合抗體。（1）人-鼠嵌合抗體(chimericantibody)（2）改形抗體(reshapedantibody,RAb)定義：為進(jìn)一步降低抗體的免疫原性，應(yīng)用基因工程技術(shù)將鼠源McA

b中CDR移植至人源抗體可變區(qū)，替代人源抗體CDR，即為“CDR植入抗體(CDRgraftingantibody)”。（2）改形抗體(reshapedantibody,RAb)特點(diǎn)：保持鼠源單抗的特異性和親和力幾乎對(duì)人體無(wú)免疫原性定義：是指分子量較小但具有抗原結(jié)合功能的分子片段。優(yōu)點(diǎn)：分子量小，易到達(dá)靶部位，可用于免疫治療可在大腸桿菌等原核細(xì)胞中表達(dá)，降低生產(chǎn)成本免疫原性比原來(lái)的單抗弱不含F(xiàn)c段，更能集中到達(dá)靶細(xì)胞部位，有利于作為靶向藥物的載體半衰期短，代謝快，有利于放射免疫成像檢查腫瘤二、小分子抗體分類：抗原結(jié)合片段（Fab）可變區(qū)片段（Fv）單鏈抗體（ScFv）重鏈抗體（HcAb）二、小分子抗體定義：

一般由一條完整的輕鏈及重鏈的可變區(qū)和CH1區(qū)組成，具有與完整抗體相同的抗原結(jié)合特性，但只有一個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)。（1）抗原結(jié)合片段(antigenbindingfragment,Fab)定義：

是抗體分子中保留抗原結(jié)合部位的最小功能性片段，是由輕鏈和重鏈可變區(qū)以非共價(jià)鍵結(jié)合而成的單價(jià)小分子，其大小為完整抗體的1/6。（2）可變區(qū)片段(variablefragment,Fv)定義：將抗體重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)通過(guò)連接肽連接而成的一條完整肽鏈。（3）單鏈抗體(singlechainvariablefragment,ScFv)定義：是指缺失輕鏈的重鏈同型二聚體。（4）重鏈抗體(heavychainantibody,HcAb)單域重鏈抗體：通過(guò)基因工程方法可以獲得保留抗原結(jié)合活性的重鏈抗體可變區(qū)。特點(diǎn)：分子量小穩(wěn)定性高免疫原性弱組織穿透力強(qiáng)（4）重鏈抗體(heavy