版結(jié)核白喉桿菌優(yōu)秀公開課

第10章分枝桿菌屬（Mycobacterium）p.125概述

為細長的桿菌，繁殖時有分枝生長的趨勢。常規(guī)染色困難，但一經(jīng)著色則有抗酸性。該菌生長慢，營養(yǎng)要求高，不產(chǎn)毒素，其致病性與菌體成分有關(guān)，所致疾病多為慢性且伴有肉芽腫。該屬菌種類多，常分為三組：結(jié)核分枝桿菌（人、牛型），非結(jié)核分枝桿菌(包括4組，鳥-胞內(nèi))，麻風(fēng)分枝桿菌。結(jié)核分枝桿菌生長慢,人型、牛型非結(jié)核分枝桿菌I組生長慢,堪薩斯非結(jié)核分枝桿菌II組生長慢，癗癘非結(jié)核分枝桿菌III組生長慢,鳥胞內(nèi)分枝桿菌非結(jié)核分枝桿菌IV組生長快速，龜分枝麻風(fēng)分枝桿菌不生長結(jié)核桿菌和結(jié)核病病發(fā)展史上的幾個里程碑

1882年，德國Koch發(fā)現(xiàn)結(jié)核桿菌

1890年，德國Koch發(fā)現(xiàn)結(jié)核菌素

1921年，法國Calmettle和Guerin制成BCG1940年，進入結(jié)核病化療時代20世紀(jì)80年代以來結(jié)核病發(fā)病率呈明顯上升趨勢結(jié)核桿菌耐藥菌株的出現(xiàn)

AIDS的流行對結(jié)核病防治的松懈1993年4月23日WHO宣布“全球結(jié)核病緊急狀態(tài)”1995年宣布每年3月24日為“世界防治結(jié)核病日”流行病學(xué)簡況:

世界：

1/3人口感染，70%在亞洲結(jié)核病人2000萬，每年新增結(jié)核病患者900萬，每年死于結(jié)核病的達300萬。

中國：有5.5億人感染，結(jié)核病人約600萬，每年死于結(jié)核病的為25萬。

居法定報告?zhèn)魅静∈孜?結(jié)核分枝桿菌M.tuberculosis

Resultofacid-faststaining:redbacilliinbluebackground結(jié)核桿菌菜花狀菌落

二、致病性（一）致病物質(zhì)：結(jié)核桿菌的致病性與細菌大量繁殖引起的炎癥、菌體成分及代謝產(chǎn)物的毒性和機體對細菌的免疫損傷有關(guān)。

1、脂質(zhì)（lipid）：索狀因子(cordfactor)：

能破壞線粒體膜，影響細胞呼吸，抑制白細胞游走，引起慢性肉芽腫；

Cordformationinliquidmedia(cordfactor)

磷脂(phosphatide)：能促使單核細胞增生，引起結(jié)核結(jié)節(jié)和干酪樣壞死；蠟質(zhì)D(wax-D)：能激發(fā)機體的IV型超敏反應(yīng)；

硫酸腦苷脂(sulfatide)：能抑制吞噬體與溶酶體的結(jié)合。

2、蛋白質(zhì)：其主要成分結(jié)核菌素本身無毒，但與蠟質(zhì)D結(jié)合注入機體能誘發(fā)超敏反應(yīng)，結(jié)核結(jié)節(jié)形成和抗體。3、多糖(polysaccharide)：中粒細胞浸潤4、核酸：

rRNA激活細胞免疫5、莢膜：保護菌體（有助于侵入巨噬細胞、抵抗有害物質(zhì)等）（二）所致疾病：主要介紹肺部感染

1、原發(fā)感染（primaryinfection）：

首次感染結(jié)核桿菌，多見于兒童。常有肺門淋巴結(jié)大、干酪樣壞死和結(jié)核結(jié)節(jié)的形成，也可經(jīng)血到達多個臟器引起相應(yīng)結(jié)核病，90%的原發(fā)感染可纖維化或鈣化，但病灶中潛伏的菌可成為日后的感染源

2、原發(fā)后感染（secondaryinfection）：

多見于成人或較大的兒童原發(fā)綜合征原發(fā)病灶淋巴管炎肺門淋巴結(jié)結(jié)核

三、免疫性1、免疫機理：傳染性免疫，以細胞免疫為主。2、免疫與超敏反應(yīng)：機體對結(jié)核桿菌產(chǎn)生免疫保護時也產(chǎn)生了超敏反應(yīng)，二者均為T細胞介導(dǎo)。試驗依據(jù)：結(jié)核菌素蛋白與蠟質(zhì)D同時注入機體，可活化T細胞引起超敏反應(yīng)；結(jié)核桿菌核蛋白體RNA注入機體，則獲得免疫力。*結(jié)核菌素試驗（OT）：（1）原理：

IV型超敏反應(yīng)（2）方法：是用OT(oldtuerculin)或PPD(purifiedProteinderivative)所做的皮內(nèi)試驗，48-72小時后觀察。（3）結(jié)果：陽性紅腫硬結(jié)直徑>5mm

強陽性紅腫硬結(jié)直徑>15mm

陰性紅腫硬結(jié)直徑<5mm結(jié)核菌素試驗

PPD皮下注射四、微生物學(xué)檢查

1、標(biāo)本：痰液、尿液、糞便、腦脊液等

2、直接涂片鏡檢：

3、濃縮集菌：

4、分離培養(yǎng)：

5、動物試驗：

6、快速診斷：包括核酸和抗體五、防治原則接種BCG：新生兒----7y----12y治療：聯(lián)合用藥，分一線和二線藥物ModelfigureofAlbertstainingResultofAlbertstaining:bodyinblue

metachromaticgranules

inblack

2、培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧，

（1）呂氏血清培養(yǎng)基（Loffler）:

形態(tài)典型，異染顆粒明顯，菌落細小、濕潤、呈灰白色、圓形突起；（2）亞碲酸鉀(potassiumtellurite)培養(yǎng)基：

重型大灰色能分解淀粉不溶血

中間型中心黑邊緣灰不分解淀粉不溶血

輕型小黑色不分解淀粉能溶血我國以輕型多見3、抵抗力：較弱，對濕熱敏感，對干燥、寒冷、日光的抵抗力較強。

二、致病性（一）致病物質(zhì)：

1、白喉毒素(diphtherotoxin,DT)：只有攜帶β-棒狀桿菌噬菌體的菌株才能產(chǎn)生。

毒素的性質(zhì)與作用機理：完整的毒素分子是酶原，須經(jīng)胰酶分解為A、B

兩個片段后才發(fā)揮毒性作用。

A鏈：193aa，具酶活性，穩(wěn)定；

B鏈：342aa，不穩(wěn)定。含穿膜區(qū)（173aa）和受體結(jié)合區(qū)（149aa）。StructureofDiphtheriatoxin

FragmentB:37kD,binding

FragmentA:21kD,toxicity作用機制：白喉毒素經(jīng)受損的粘膜細胞入血或淋巴循環(huán)，吸附于多個臟器的組織細胞表面后裂解，B片段與細胞膜表面的受體結(jié)合，A片段進入細胞內(nèi)，使細胞內(nèi)延伸因子2（elongationfactor2,EF-2）滅活，影響蛋白質(zhì)的合成。白喉毒素有劇毒，但人和鼠的正常細胞對該毒素有一定的耐受性，而腫瘤細胞則高度敏感，據(jù)此有人提出生物導(dǎo)彈法治療腫瘤。2.索狀因子(cordfactor)和K抗原等（二）所致疾病

病人健康帶菌者飛沫侵入易感機體吸附恢復(fù)期帶菌者

鼻咽部粘膜，生長繁殖產(chǎn)生

侵襲物質(zhì)

局部上皮細胞壞死形成灰白色“假膜”毒素全身心肌炎、腎上腺出血、外周神經(jīng)麻痹等三、免疫性病后獲牢固免疫，以體液免疫為主。

錫克實驗（Schichtest）:

原理:毒素抗毒素中和反應(yīng)(invivo)四、微生物學(xué)檢查直接涂片，分離培養(yǎng)，毒力鑒定（Elek平板，豚鼠試驗）

ResultsofSchicktestHappenedtime(day)experimentcontroltypeinterpretation_+Pseudo+