飼料中總磷量的測(cè)定

飼料中總磷量的測(cè)定

飼料與營(yíng)養(yǎng)系飼料營(yíng)養(yǎng)教研室一、適用范圍：本標(biāo)準(zhǔn)適用于配合飼料、濃縮飼料、預(yù)混合飼料和單一飼料。測(cè)定范圍磷含量0~20μg/ml。二、方法原理：將試樣中的有機(jī)物破壞，使磷游離出來(lái)，在酸性溶液中，用釩鉬酸銨處理，生成黃色的(NH4)3PO4NH4VO3·16MoO3，在波長(zhǎng)420nm下進(jìn)行比色測(cè)定。三、試劑：本標(biāo)準(zhǔn)中所用試劑，除為特殊說(shuō)明外，均為分析純。實(shí)驗(yàn)室用水為蒸餾水或同等純度的水。1.鹽酸：1+1水溶液2.硝酸3.釩鉬酸銨顯色劑：稱取釩鉬酸銨1.25g，加硝酸250ml，另稱取鉬酸銨25g，加水400ml溶解之，在冷卻的條件下，將兩種溶液混合，用水定容1000ml。避光保存，若生成沉淀，則不能繼續(xù)使用。4.磷標(biāo)準(zhǔn)液：將磷酸二氫鉀在105℃干燥1h，在干燥器中冷卻后稱取0.2195g溶解于水，定量轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml，用稀釋至刻度，搖勻，即為50μg/ml的磷標(biāo)準(zhǔn)液。

鹽酸：1+1水溶液硝酸釩鉬酸銨顯色劑磷標(biāo)準(zhǔn)液四、儀器設(shè)備：1．

實(shí)驗(yàn)室用樣品粉碎機(jī)或研缽2．

分樣篩：孔徑0.45mm（40目）3．

分析天平：感量0.0001g4．

分光光度計(jì)：有10mm比色池，可在420nm測(cè)定吸光度5．

高溫爐：可控溫度在550℃±20℃6．

瓷坩堝：50ml7．

容量瓶：50ml、100ml、1000ml8．

刻度移液管：1.0ml、2.0ml、3.0ml、5.0ml、10ml9．可調(diào)溫電爐：1000W分析天平分光光度計(jì)高溫爐可調(diào)溫電爐瓷坩堝容量瓶移液管試樣制備：取有代表性試樣，粉碎至0.44mm（40目），用四分法將試樣縮分至200g裝入密封容器，防止試樣成分變化或變質(zhì)。五、測(cè)定步驟：（一）試樣的分解干法：[不適用含Ca(H2PO4)2的飼料]：

1.坩堝洗滌干凈、烘干備用。2.樣品約重3.稱取試樣2~5g(精確至0.0002g)于坩堝中，1號(hào)

2號(hào)

。4.在電爐上小心炭化，再放入高溫爐，在550℃灼燒3h（或測(cè)定灰分后繼續(xù)進(jìn)行），取出冷卻。5.加酸溶解加入10ml鹽酸溶液和硝酸數(shù)滴，小心煮沸。6.分解液的轉(zhuǎn)移與定溶冷卻后借助漏斗轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，為試樣分解液。測(cè)定步驟1.坩堝烘干２.試樣稱取樣品稱重1號(hào)=35.3520-32.3087=2.9650樣品稱重2號(hào)=33.2702-30.4254=2.8448３.樣品的炭化、灰化４.試樣分解液制備容量瓶和漏斗洗滌干凈、編號(hào)。玻棒洗滌干凈。在盛灰分的坩堝中加入10毫升鹽酸溶液（10毫升刻度吸管移?。?。加數(shù)滴濃硝酸，在電爐上小火煮沸。將此溶液借助漏斗無(wú)損轉(zhuǎn)移到250毫升容量瓶中，用蒸餾水沖洗坩堝幾次，洗液轉(zhuǎn)入容量瓶中，冷卻到室溫，用蒸餾水定容，搖勻即為樣品分解液。

◆試樣分解液制備坩堝中加入10毫升鹽酸溶液溶解灰分滴入3~5滴濃硝酸◆試樣分解液制備在電爐上小火煮沸。（低溫）關(guān)閉電爐，冷卻至室溫?！粼嚇臃纸庖褐苽淙芤旱霓D(zhuǎn)移與洗滌溶液的轉(zhuǎn)移與洗滌◆試樣分解液制備溶液定溶、搖均備用被移灰分液潤(rùn)洗3次（二）準(zhǔn)確移取磷標(biāo)準(zhǔn)液：準(zhǔn)確移取磷酸標(biāo)準(zhǔn)液0ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml、10.0ml、15.0ml于50ml容量瓶中，各加入釩鉬酸銨顯色劑10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，常溫下放置10min以上，以0ml溶液為參比，用10mm比色池，在420nm波長(zhǎng)下，用分光光度計(jì)測(cè)定各溶液的吸光度。以磷含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。P標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制測(cè)定步驟

P標(biāo)準(zhǔn)液比色液P標(biāo)準(zhǔn)曲線（三）試樣的測(cè)定：準(zhǔn)確稱取試樣分解液1~10ml（含磷量50~750μg）于50ml容量瓶中，加入釩鉬酸銨顯色劑10ml，按6.2的方法顯色和比色測(cè)定，測(cè)得試樣分解液的吸光度，用標(biāo)準(zhǔn)曲線查得試樣分解液的含磷量（X值）。測(cè)定步驟

試樣分解液比色液的制備移液管洗滌干凈，用被移灰分液潤(rùn)洗3次。試樣分解液比色液的制備試樣分解液比色液的制備試樣分解液比色液吸光度的測(cè)定1號(hào)樣品測(cè)定值2號(hào)樣品測(cè)定值試樣分解液比色液吸光度值：1號(hào)0.538。2號(hào)0.467。從P標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得X值：1號(hào)450

μg

。2號(hào)395μg

。測(cè)定結(jié)果的計(jì)算：樣品中總磷的含量（P%）按下式計(jì)算：XV1P=——————×——×100％m

×106

V2式中：m——試樣的質(zhì)量（g）X——由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得試樣分解液總磷含量（μg）V1——試樣分解液定容的體積（ml）V2——測(cè)定時(shí)移取的試樣分解液體積（ml）1號(hào)：結(jié)果計(jì)算

XV1P=———————×———×100％m

×106

V2

450250P=———————×———×100％=1.84%3.0433×106

22號(hào)：結(jié)果計(jì)算XV1P=———————×———×100％m

×106

V2

395250P=———————×———×100％=1.74%2.8448×106

2★重復(fù)性：試樣取兩個(gè)平行樣，其算術(shù)平均值為結(jié)果總磷含量低于0.5%，允許相對(duì)偏差不超過(guò)10%總磷含量大于或等于0.5%，允許相對(duì)偏差不超過(guò)3%相對(duì)偏差=│測(cè)定值-平均值│/平均值平均值、相對(duì)偏差計(jì)算平均值=(1.84%+1.74%)/2=1.79%相對(duì)偏差=│1.84%-1.79%│/1.79%×100%=2.79%磷測(cè)定記錄表樣品名稱魚(yú)粉樣品號(hào)12坩堝號(hào)4849坩堝重（克）32.308730.4254坩堝+樣品重（克）