第3章-氨基酸和蛋白質(zhì)

第3章氨基酸和蛋白質(zhì)單元自測題名詞解釋或概念比較1．氨基酸，2．肽鍵與肽，3．結(jié)構(gòu)域，4．單體蛋白和寡聚蛋白，5．蛋白質(zhì)的構(gòu)象與構(gòu)型，6．肽鍵，7．蛋白質(zhì)的化學(xué)修飾，8．疏水效應(yīng)，9．分子伴侶，10．Western印跡，11．同促效應(yīng)與異促效應(yīng)，12．Bohr效應(yīng)，13．抗原決定簇，14．半抗原，15．親和層析，16．必須氨基酸與非必須氨基酸，7．透析，18．雙向電泳，19．Edman降解法，20．等電點，21．多克隆抗體與單克隆抗體，22．單純蛋白質(zhì)與綴合蛋白質(zhì)，23．同寡聚蛋白與雜寡聚蛋白，24．等電聚焦。填空題1．氨基酸在晶體狀態(tài)或在水溶液中主要以形式存在。2．天冬氨酸的pK1（－COOH）值是2.09，pK2（β－COOH）值是3.86，pK3（－NH3+）值是9.82，它的等電點是。組氨酸的pK1（－COOH）值是1.82，pK2（咪唑基）值是6.00，pK3（－NH3+）值是9.17，它的等電點是。3．在近紫外區(qū)能吸收紫外光的氨基酸有，和。其中的摩爾吸光系數(shù)最大。4．在氨基酸的含量分析中，可以先用法分離氨基酸，再用顯色法進行定量分析。5．在進行蛋白質(zhì)的N末端氨基酸序列分析中，主要利用反應(yīng)。6．根據(jù)蛋白質(zhì)的形狀和溶解度的差異，可以將它們分為，和。7．球狀蛋白質(zhì)中，大部分的氨基酸殘基在分子的表面，而大部分的氨基酸殘基在分子的內(nèi)核。8．生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)在折疊過程中通常有和參與。9．目前研究蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)的方法主要是。10．血紅蛋白（Hb）與氧結(jié)合時呈現(xiàn)效應(yīng)，是通過血紅蛋白的現(xiàn)象實現(xiàn)的。肌肉組織中CO2和H+促進O2的釋放，這種現(xiàn)象稱為效應(yīng)。11．用溴化氰水解蛋白質(zhì)時，肽鍵在殘基的右端裂解。12．用胰凝乳蛋白酶水解蛋白質(zhì)時，肽鍵在和殘基的右端裂解。13．蛋白質(zhì)分子上的磷酸化修飾位點主要在，和三種氨基酸上。14．在膜蛋白的跨膜區(qū)上，氨基酸朝向分子外側(cè)，氨基酸朝向分子內(nèi)側(cè)。15．鐮刀型紅細胞貧血是由于正常血紅蛋白分子中的一個被置換引起的。16．胰島素是分泌的多肽激素。前胰島素原被蛋白酶水解，失去N端的，生成。再經(jīng)過肽酶激活，失去，生成具有生物活性的胰島素。17．在不同生物體內(nèi)行使相同或相似功能的蛋白質(zhì)稱為，其氨基酸序列中有許多位置的氨基酸殘基對大多數(shù)物種來說都是相同的，稱為；而其它位置的氨基酸殘基對大多數(shù)物種來說都是不同的，稱為。18．常見的絲氨酸蛋白酶有，和。19．影響α螺旋形成的主要因素有R基的和。20．蛋白質(zhì)變性以后，結(jié)構(gòu)遭到破壞，而結(jié)構(gòu)仍然保持完整。21．免疫球蛋白是由條肽鏈組成的血液蛋白，每條肽鏈的N末端為區(qū)，是識別抗原的活性區(qū)域，C末端部分是區(qū)。22．蛋白質(zhì)分子中的α螺旋結(jié)構(gòu)靠鏈內(nèi)氫鍵維持，每轉(zhuǎn)一圈上升個氨基酸殘基。23．細胞色素C中的的脫輔基蛋白與血紅素輔基以鍵結(jié)合。24．在糖蛋白中，糖鏈通常與蛋白質(zhì)的，和殘基共價結(jié)合。25．現(xiàn)要在葡聚糖凝膠G－75柱上分離下列4種蛋白質(zhì)，它們的分子量分別是A.12000，B.62000，C.28000，D.9000。他們從柱中流出的先后次序是，，，和。26．蛋白質(zhì)水溶液在pH6具有緩沖作用，這主要是由于蛋白質(zhì)分子中的基團的解離作用。27．中性鹽對球狀蛋白質(zhì)的溶解度有顯著的影響。在低濃度時，中性鹽可以增加蛋白質(zhì)的溶解度，這種現(xiàn)象稱為。當(dāng)鹽的濃度增加到一定數(shù)值時，蛋白質(zhì)的溶解度開始下降，并有蛋白質(zhì)沉淀出現(xiàn)，這種現(xiàn)象稱為。28．鑒定蛋白質(zhì)純度的電泳方法主要有，和。29．測定蛋白質(zhì)相對分子量的主要方法有，和。30．利用蛋白質(zhì)分子對其配體分子特有的識別能力建立起來的分離純化蛋白質(zhì)的方法是31．要保持蛋白質(zhì)膠體溶液穩(wěn)定，蛋白質(zhì)分子應(yīng)該具備下列三個條件：分子大小在范圍內(nèi)，和等。32．抗原－抗體識別、結(jié)合必要條件是和。33．蛋白質(zhì)中雜環(huán)族氨基酸包括，和。34．蛋白質(zhì)的糖基化過程發(fā)生在細胞的和部位。35．蛋白質(zhì)分子周圍的和是穩(wěn)定蛋白質(zhì)膠體的主要因素。36．肌紅蛋白和血紅蛋白在進化中形成多肽微環(huán)境，其作用是，，和。37．沉淀蛋白質(zhì)的方法主要有，，，和。38．研究溶液中蛋白質(zhì)構(gòu)象的光譜學(xué)方法主要有，，和。選擇題1．蛋白質(zhì)水解過程中，下列哪一種方法對色氨酸的破壞最大。A.酸水解法B.堿水解法C.酶水解法D.高溫水解法2．在蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)測定時要確定二硫鍵的位置，可以用下列哪一種方法測定出含二硫鍵的肽段。A.巰基化合物還原B.過甲酸氧化C.對角線電泳D.雙向電泳3．研究蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)時，用下列哪一種方法最有效。A.熒光光譜B.紫外光譜C.X光衍射D.圓二色性4．蛋白質(zhì)亞基間的空間排布、相互作用及接觸部位的空間結(jié)構(gòu)稱為A.二級結(jié)構(gòu)B.三級結(jié)構(gòu)C.四級結(jié)構(gòu)D.結(jié)構(gòu)域5．遍在蛋白（ubiquitin）具有（）的功能A.促進蛋白質(zhì)的降解B.協(xié)助蛋白質(zhì)折疊C.促進蛋白質(zhì)合成6．在蛋白質(zhì)分子中，下列哪一種氨基酸殘基的側(cè)鏈可以作為糖基化位點。A.脯氨酸B.賴氨酸C.丙氨酸D.絲氨酸7．在SDS聚丙烯酰氨凝膠電泳時，用（）還原二硫鍵。A.尿素B.巰基乙醇C.過甲酸D.SDS8．免疫球蛋白是一種（）蛋白。A.核蛋白B.蛋白鐵C.銅蛋白D.糖蛋白9．胰島素的活化時，胰島素原轉(zhuǎn)變成胰島素的過程是在（）中進行的。A.線粒體B.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)C.溶酶體D.高爾基體10．180個氨基酸殘基形成完整的-螺旋（3.613）時，其螺旋長度是A.27nmB.25nmC.26nmD.12nm11．下列關(guān)于D氨基酸的敘述中，哪一項是不正確的？A.D氨基酸多數(shù)由L－氨基酸經(jīng)消旋作用而形成B.消旋酶的輔因子是磷酸吡哆醛C.D氨基酸往往存在于肽類抗生素中D.肽鏈中的D－氨基酸來源于游離的合成前體D－氨基酸12．在人工合成多肽時，常用的氨基保護劑是A.叔丁氧甲?；鵅.芐酯C.叔丁酯D.芐基13．下列哪種氨基酸是成人的必需氨基酸？A.AlaB.TyrC.LeuD.Ser14．下面關(guān)于鎖鏈素的敘述哪項是正確的？A.它是非蛋白質(zhì)氨基酸B.它是蛋白質(zhì)的基本氨基酸C.它存在于某些蛋白質(zhì)中D.它只存在于彈性蛋白中 15．膠原蛋白中，含量最多的氨基酸殘基是A.組氨酸B.丙氨酸C.甘氨酸D.纈氨酸16．下列哪一種試劑可以用來測定多肽鏈的N末端。A.溴化氰B.胰蛋白酶C.鹽酸胍D.丹磺酰氯17．一個蛋白質(zhì)的pI值是5.0，如果把它放在pH6.0緩沖溶液中電泳，其泳動方向是A.向正極移動B.向負極移動C.在原位不動18．蛋白質(zhì)的等離子點是什么情況下凈電荷為零的pH值A(chǔ).無鹽情況下B.高鹽濃度下C.低鹽濃度下19．下列關(guān)于折疊的敘述哪一點是不正確的？A.折疊的肽鏈處于伸展?fàn)顟B(tài)B.它是借助疏水作用而穩(wěn)定的C.它的氫鍵是肽鏈骨架的與間形成的D.角蛋白通過濕熱處理可轉(zhuǎn)變成折疊結(jié)構(gòu)20．血紅蛋白的氧合曲線向右移動是由于A.O2分壓降低B.CO2分壓降低C.CO2分壓升高D.pH增加21．Edman試劑與多肽鏈游離N末端氨基酸偶聯(lián)的反應(yīng)介質(zhì)應(yīng)該是A.弱酸性的B.弱堿性的C.強酸性的D.中性的22．每分子血紅蛋白含鐵原子數(shù)為A.1個B.2個C.3個D.4個23．雙縮脲反應(yīng)通常用來用來測定（）的含量。A.DNAB.RNAC.胍基D.蛋白質(zhì)24．在酶促合成多肽的過程中，可以用下列哪一種酶作為催化劑A.蛋白激酶B.氨酰tRNA連接酶C.氨基轉(zhuǎn)移酶D.蛋白水解酶25．某一種蛋白質(zhì)在pH5.0時向陰極移動，其等電點應(yīng)該是A.＞5.0B.＝5.0C.＜5.026．在pH7的水溶液中，典型的球狀蛋白質(zhì)分子中，處在分子內(nèi)部的氨基酸殘基是A.AspB.LysC.PheD.Thr27．下列關(guān)于HbA的敘述哪一項是正確的？A.由兩個亞基和兩個亞基組成（22）B.由兩個亞基和兩個亞基組成（22）C.由兩個亞基和兩個亞基組成（22）D.由兩個亞基和兩個亞基組成（22）28．在丁醇－乙酸－水溶劑系統(tǒng)中進行紙層析時，發(fā)現(xiàn)氨基酸的Rf值太小，為了使Rf值增大，應(yīng)在A.層析缸中多加一些展層溶劑 B.溶劑系統(tǒng)中加大丁醇的比例C.溶劑系統(tǒng)中加大乙酸的比例 D.溶劑系統(tǒng)中加大水的比例29．GSH的全稱是A.谷氨酰半胱氨酰甘氨酸B.谷氨酰半胱氨酰甘氨酸C.谷氨酰胱氨酰甘氨酸 D.谷氨酰胱氨酰甘氨酸30．蛋白質(zhì)分子中的天冬酰胺和谷氨酰胺是A.蛋白質(zhì)合成好以后經(jīng)過轉(zhuǎn)酰胺作用生產(chǎn)的B.蛋白質(zhì)合成好以后經(jīng)過轉(zhuǎn)氨基作用生產(chǎn)的C.生物合成時從mRNA模板上譯讀出來的D.生物合成時從rRNA模板上譯讀出來的31．下列關(guān)于纖維狀蛋白質(zhì)的敘述哪一項是正確的？A.纖維狀蛋白質(zhì)包括角蛋白、角蛋白、膠原蛋白、彈性蛋白和肌球蛋白等B.角蛋白主要存在于皮膚中C.膠原蛋白主要在肌肉組織中存在D.絲心蛋白是角蛋白32．世界上第一個人工合成的酶是A.牛胰核糖核酸酶B.胰蛋白酶C.溶菌酶D.羧肽酶A33．下列哪種蛋白質(zhì)分子中含有羧基谷氨酸？A.胰蛋白酶B.凝血酶原C.膠原蛋白D.胰島素 34．下列關(guān)于IgG的敘述中哪一項是不正確的A.每個抗體有兩個抗原結(jié)合部位B.在多發(fā)性骨髓細胞癌患者的尿中有不完整的免疫球蛋白C.輕鏈和重鏈都有恒定的C末端氨基酸序列和可變?yōu)镹末端氨基酸序列D.保持免疫球蛋白鏈間連結(jié)的唯一作用力是非共價鍵35．下列的四種氨基酸中，沒有旋光性的氨基酸是A.GlyB.ArgC.PheD.His36．對丙酮酸激酶缺乏癥患者來說，測定其生理生化指標(biāo)之前，你能預(yù)示會發(fā)生下述哪種現(xiàn)象？A.血紅蛋白對氧親和力升高B.血紅蛋白對氧親和力降低C.2，3二磷酸甘油酸水平下降D.2，3二磷酸甘油酸水平不變是非題1．蛋白質(zhì)在結(jié)構(gòu)和功能上的多樣性，是由20種基本氨基酸R側(cè)鏈的物理和化學(xué)性質(zhì)的差異造成的。2．用堿水解蛋白質(zhì)，得到的游離氨基酸都是L－氨基酸。3．在蛋白質(zhì)分子中，每一種氨基酸至少都有一個對應(yīng)的遺傳密碼。4．蛋白質(zhì)在生物體內(nèi)合成之后的共價修飾都屬于不可逆化學(xué)修飾。5．在用凱氏定氮法測定粗蛋白質(zhì)的含量時，不同種類蛋白質(zhì)的含氮量都是16%。6．多肽鏈中游離α-氨基與游離α-羧基的距離比氨基酸中的大，因此多肽中的末端α-羧基的pKa值比游離氨基酸中的大一些。7．生物體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成方向是從N端到C端，在體外用化學(xué)合成法合成蛋白質(zhì)時，通常是從C端到N端。8．在各種－螺旋結(jié)構(gòu)中，每圈螺旋占3.6個氨基酸殘基。9．蛋白質(zhì)的－螺旋結(jié)構(gòu)中，左手螺旋比右手螺旋更穩(wěn)定。10．糖蛋白中，糖與蛋白質(zhì)以共價鍵連接。11．蛋白質(zhì)變性時，蛋白質(zhì)分子的天然構(gòu)象解體，共價鍵被破壞。12．β桶型膜蛋白分子中，跨膜肽段的二級結(jié)構(gòu)是－螺旋。13．蛋白質(zhì)折疊過程中，折疊結(jié)構(gòu)在生理條件下是自由能最低的構(gòu)象，因此多肽鏈的折疊是自發(fā)過程。14．在蛋白質(zhì)分子中，肽鍵是唯一的一種連接氨基酸殘基的共價鍵。15．甘氨酸和脯氨酸在－螺旋中出現(xiàn)的頻率很高。16．hsp70蛋白是一類熱休克蛋白質(zhì)，它們通過抑制新生肽鏈的不恰當(dāng)聚集，協(xié)助多肽鏈的正確折疊。17．在免疫分析中，單克隆抗體比多克隆抗體具有對抗原更強的專一性。18．具有單個跨膜肽段的膜蛋白分子中，跨膜肽段的二級結(jié)構(gòu)通常是β折疊。19．在生物膜上，膜蛋白可以多次穿過脂雙層。20．蛋白質(zhì)分子中任何一個氨基酸改變，一定會引起該蛋白質(zhì)功能的改變。21．20種基本氨基酸中都有不對稱碳原子，因此它們都具有旋光性。22．具有天然構(gòu)象的蛋白質(zhì)，主鏈上的單鍵可以自由旋轉(zhuǎn)。23．不同種類的蛋白質(zhì)，對280nm紫外光的摩爾吸光系數(shù)是相同的。24．蛋白質(zhì)變性以后，摩爾吸光系數(shù)會增大。26．從DNA的序列可以準(zhǔn)確推斷出蛋白質(zhì)中氨基酸的序列，反之從氨基酸的序列也可以準(zhǔn)確推斷出DNA序列。27．溶液中的球狀蛋白質(zhì)分子，在等電點時溶解度最大。28．凝膠過濾法可以用來測定蛋白質(zhì)的相對分子量，分子量小的蛋白質(zhì)先流出層析柱，分子量大的后流出層析柱。29．蛋白質(zhì)的SDS聚丙烯酰氨凝膠電泳中，分子量大的蛋白質(zhì)在凝膠中的遷移速度較快。30．質(zhì)膜上的糖蛋白的糖基都位于膜的外側(cè)。31．血紅蛋白與肌紅蛋白的結(jié)構(gòu)相似，都具有結(jié)合氧的能力。在生理條件下氧與血紅蛋白的親和力比與肌紅蛋白的親和力強。32．多聚谷氨酸在pH7時，由于γ－羧基解離，不易形成α螺旋結(jié)構(gòu)。33．核糖核酸酶分子的變性－復(fù)性實驗可以證明，蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)決定高級結(jié)構(gòu)。34．茚三酮在弱酸中與－氨基酸共熱，引起氨基酸的氧化脫氨、脫羧反應(yīng)，茚三酮與氨和還原茚三酮反應(yīng)，生成紫色化合物。35．肽鏈中的肽鍵一般是反式構(gòu)型，而脯氨酸的肽鍵可能出現(xiàn)順、反兩種構(gòu)型。36．雙縮脲反應(yīng)是肽和蛋白質(zhì)特有的反應(yīng)，游離氨基酸沒有此反應(yīng)。37．蛋白質(zhì)分子中，一個氨基酸的α－氨基與另一個氨基酸的α－羧基縮合，只有末端基團及側(cè)鏈基團具有化學(xué)活性。38．從能量學(xué)上看，反平的β－折疊比平行的更穩(wěn)定。39．多肽鏈的二級結(jié)構(gòu)主要由R基的長程順序決定，多肽鏈的三級結(jié)構(gòu)主要由氨基酸的短程順序決定。40．二磷酸甘油酸（BPG）能降低氧與血紅蛋白的親和力。（五）簡答與計算1．根據(jù)下列實驗結(jié)果，推斷多肽的序列。A.氨基酸的組成是Gly，Leu，Phe和Tyr，它們的摩爾比是2：1：1：1B.用2，4-二硝基氟苯處理該多肽，然后完全水解。水解產(chǎn)物中有Tyr的2，4-二硝基氟苯衍生物，但是沒有游離的Tyr。C.用胃蛋白酶完全水解該多肽，產(chǎn)物中含有Leu和Phe的二肽，及含有Gly和Tyr（比例為2：1）的三肽。（胃蛋白酶的特異降解位點是Phe和Tyr的N端肽鍵。）2.α螺旋的穩(wěn)定性不僅取決于肽鏈內(nèi)部的氫鍵，而且還與氨基酸側(cè)鏈的性質(zhì)有關(guān)。室溫下，在溶液中下列多聚氨基酸哪些能形成α螺旋?哪些能形成其他有規(guī)則的結(jié)構(gòu)?哪些能形成無規(guī)則的結(jié)構(gòu)?并說明其理由。(1)多聚亮氨酸pH=7，(2)多聚異亮氨酸pH=7.0(3)多聚精氨酸pH=7.0(4)多聚精氨酸pH=13.0(5)多聚谷氨酸pH=1.5(6)多聚蘇氨酸pH=7.0(7)多聚羥脯氨酸pH=7.03．谷氨酸解離基團的pK值分別是pK1(－COOH)=2.19，pK2(－NH3)=9.67，pKR(－COOH)=4.25，谷氨酸的等電點應(yīng)是多少？為什么？4．某一蛋白質(zhì)分子含有100個氨基酸殘基，它是一條充分伸展的多肽鏈，試計算該蛋白質(zhì)肽鏈的長度和分子量。5．舉例說明蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)決定蛋白質(zhì)的高級結(jié)構(gòu)。6．在真核細胞的染色體DNA上有大量的組蛋白（pI約10.8），這些組蛋白能與DNA分子上的磷酸基團緊密結(jié)合。試問組蛋白的等電點為什么會很高，組蛋白依靠什么力與磷酸基團結(jié)合？7．血庫中長時間儲存的血液，如果不采取措施，2，3－BPG的濃度會下降。如果這樣的血用于輸血，可能會產(chǎn)生什么后果？8.在有蛋白質(zhì)抗體存在或不存在情況下，請各寫出一種方法證明某一種較低分子量的蛋白質(zhì)是否為此蛋白質(zhì)的降解產(chǎn)物?9．某種溶液中含有下列三種三肽：Tyr－Arg－Ser，Glu－Met－Phe和Asp－Pro－Lys。并且，－COOH基團的pK=3.8，－NH3pK8.5。問在哪種pH（2.0，6.0，13.0）條件下，用電泳分離這三種三肽效果最好？10．血紅蛋白含鐵量為0.34%，血紅蛋白的最小相對分子質(zhì)量是多少？實驗數(shù)據(jù)表明血紅蛋白的相對分子質(zhì)量是64500，計算血紅蛋白含有幾個鐵原子？11．向1.0L濃度為1.0mol/L的處于等電點的甘氨酸溶液中加入0.3mol的HCL，問所得溶液的pH值是多少？如果加入1.0L濃度為0.3mol的NaOH以替代HCL時，溶液的12．試以IgG為例，簡述免疫球蛋白分子的結(jié)構(gòu)特點。13．氨基酸混合物的分離可用哪些方法？14．從某種植物中分離得到一種脯氨酸羥化酶的抑制劑，將它喂食大鼠，會導(dǎo)致其血管變脆，牙齦出血，為什么？人類患維生素C缺乏癥時也會出現(xiàn)上述癥狀，為什么？15．分別計算谷氨酸的－COOH四分之三被解離時溶液的pH；賴氨酸的－NH3+五分之一被解離時溶液的pH。（－COOHpKa＝4.25，－NH3+pKa＝10.53）16．將含有天冬氨酸（pI＝2.98）、甘氨酸（pI＝5.97）、蘇氨酸（pI＝6.53）、亮氨酸（pI＝5.98）、賴氨酸（pI＝9.84）的pH3.0檸檬酸緩沖液，加到預(yù)先用同樣緩沖液平衡過的Dowex－50的將陽離子交換樹脂中，用緩沖液洗脫，這5種氨基酸將按什么順序洗脫下來？17．有一個A肽，經(jīng)過酸水解后分析氨基酸組成，得知由Lys、His、Asp、Ala、Val、Tyr和兩Glu及兩個NH3分子組成。（1）FDNB與A肽反應(yīng)后，水解得到DNP－Asp。（2）用羧肽酶水解A肽，得到游離Val。（3）用胰蛋白酶水解A肽，得到兩種肽段。一個肽段（Lys、Asp、Glu、Ala、Tyr）在pH6.4時凈電荷為零；另一個肽段（His、Glu、Val）與FDNB反應(yīng)后，水解得到DNP－His，且此肽段在pH6.4時帶正電荷。（4）用糜蛋白酶水解A肽，得到兩種肽段。一個肽段（Asp、Ala、Tyr）在pH6.4時凈電荷為零；另一個肽段（Lys、His、2Glu、Val）在pH6.4時帶正電荷，求A肽的氨基酸序列。18．簡述制備單克隆抗體的基本步驟。19．蛋白質(zhì)A和B各有一個配體X的結(jié)合部位，蛋白質(zhì)A的解離常數(shù)Kd為1.0×10－6mol/L，蛋白質(zhì)B的解離常數(shù)Kd為1.0×10－9mol/L。問（1）哪一個蛋白質(zhì)對配體的親和力高？（2）將這兩個蛋白質(zhì)的解離常數(shù)Kd轉(zhuǎn)換為結(jié)合常數(shù)Ka。20．谷氨酸各個基團的解離常數(shù)及等電點分別是pK1α－COOH為2.19，pK2α－N+H3為9.67，pKRR－COOH為4.25，pI為3.22。（1）Glu-和Glu=各一半時的pH值（2）Glu總是帶正電荷的pH范圍（3）Glu±和Glu-能作為緩沖液使用的pH范圍21．人工合成的多聚L脯氨酸，能夠形成膠原三螺旋結(jié)構(gòu)中的一個單股螺旋的構(gòu)象，試問：(1)多聚L脯氨酸能否形成三螺旋?為什么?(2)你認為多聚(甘—脯—甘—脯)能否組成類似膠原的三螺旋結(jié)構(gòu)?為什么?六、參考答案（一）名詞解釋或概念比較1．氨基酸是含有至少一個堿性氨基和一個酸性羧基的有機化合物，氨基一般連接在－碳原子上。氨基酸是肽和蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子。2．肽鍵是一個氨基酸的－羧基與另一個氨基酸的－氨基縮合形成的酰胺鍵。肽是指兩個或兩個以上氨基酸通過肽鍵形成的聚合物。3．多肽鏈在二級結(jié)構(gòu)或超二級結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上折疊成兩個或多個趨于緊密的近乎球狀的三維實體，這種實體稱為結(jié)構(gòu)域。結(jié)構(gòu)域是大分子球狀蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)的折疊單位，一般由100－200個氨基酸殘基構(gòu)成。4．由一條多肽鏈組成或由有共價鍵連接的多條多肽鏈組成的蛋白質(zhì)稱為單體蛋白，例如溶菌酶和胰凝乳蛋白酶。由兩個或兩個以上亞基組成的蛋白質(zhì)稱為寡聚蛋白，亞基之間是非共價間連接的。例如血紅蛋白是一個由4個亞基組成的寡聚蛋白，寡聚蛋白具有別構(gòu)作用。5．蛋白質(zhì)的構(gòu)象是指蛋白質(zhì)的立體結(jié)構(gòu)或空間結(jié)構(gòu)，表示在蛋白質(zhì)分子中由于單鍵的旋轉(zhuǎn)所產(chǎn)生的所有原子或基團的空間排列。一個蛋白質(zhì)構(gòu)象有無數(shù)種，構(gòu)象的變化不需要共價鍵的斷裂，只需要單鍵的旋轉(zhuǎn)。在生物體內(nèi)，蛋白質(zhì)往往只有一種構(gòu)象，稱為天然構(gòu)象。構(gòu)型表示在立體異構(gòu)體中其取代基團的空間排布。構(gòu)型的改變必須要有共價鍵的斷裂和重新生成。構(gòu)型的改變會引起光學(xué)性質(zhì)的變化，而且D型和L型異構(gòu)體可以區(qū)分和分離。6．一個氨基酸的－氨基與另一個氨基酸的－羧基脫水縮合形成的酰胺鍵稱為肽鍵，肽鍵具有平面性質(zhì)。7．在較溫和條件下，以可控制的方式使蛋白質(zhì)與某種試劑（稱化學(xué)修飾劑）起特異反應(yīng)，以引起蛋白質(zhì)中個別氨基酸殘基的側(cè)鏈基團發(fā)生共價化學(xué)改變?？捎糜谘芯磕硞€氨基酸殘基的功能或改變蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)。8．水介質(zhì)中的球狀蛋白質(zhì)的折疊總是趨向于把疏水殘基埋藏在分子的內(nèi)部，這種現(xiàn)象稱為疏水作用。蛋白質(zhì)溶液系統(tǒng)的熵增加是疏水作用的主要動力。9．是一個協(xié)助新合成的多肽鏈正確折疊和轉(zhuǎn)運的蛋白質(zhì)家族。它們能夠抑制新生肽鏈的不恰當(dāng)?shù)木奂?，排除與其它蛋白質(zhì)的不合理結(jié)合，協(xié)助多肽鏈的正確折疊和跨膜轉(zhuǎn)運，協(xié)助寡聚蛋白的組裝。10．是一種利用抗原－抗體反應(yīng)檢測特異蛋白質(zhì)的方法。首先對蛋白質(zhì)樣品進行凝膠電泳分離，將被分離開的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，然后相繼用第一抗體、酶標(biāo)第二抗體以及底物進行處理，只有含待測蛋白質(zhì)的條帶顯示顏色。11．別構(gòu)效應(yīng)可以分為同促效應(yīng)和異促效應(yīng)。同促效應(yīng)發(fā)生作用的部位是相同的，例如都是催化部位，即一種配體的結(jié)合對其它部位的同種配體的親和力的影響。異促效應(yīng)發(fā)生作用的部位是不相同的，即活性部位的結(jié)合行為受到別構(gòu)部位與效應(yīng)物結(jié)合的影響。12．氧與血紅蛋白的結(jié)合深受pH和CO2濃度的影響。H+和CO2濃度增加，使得血紅蛋白的氧合曲線向右移動，提高了O2從血紅蛋白的釋放量。13．14．分子量小于5000的化合物一般沒有抗原性，不能引起免疫反應(yīng)。如果將這些小分子化合物共價連接到蛋白質(zhì)上，這種形式的小分子可以引起免疫反應(yīng)。這種自身無抗原性，與載體結(jié)合以后有了抗原性的物質(zhì)稱為半抗原。15．親和層析是利用蛋白質(zhì)分子對其配體分子特有的識別、結(jié)合能力建立起來的高效的分離純化方法。把待純化的蛋白質(zhì)的特異配體共價連接到載體表面，將此載體裝入層析柱。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)混合物加到層析柱上時，待純化的蛋白質(zhì)與配體特異結(jié)合，吸附在層析柱上，而其它的蛋白質(zhì)（雜蛋白）不能被吸附，通過洗脫可以除去。最后用含游離配體的溶液可以將與配體結(jié)合的蛋白質(zhì)洗脫下來。16．必須氨基酸是指人（或其它脊椎動物）自己不能合成，需要從食物中直接獲得的氨基酸，例如賴氨酸、蘇氨酸等氨基酸。非必須氨基酸是指人（或其它脊椎動物）自己能從簡單的前體合成的，不需要從食物中直接獲得的氨基酸，例如甘氨酸、丙氨酸等氨基酸。17．小分子化合物能自由穿過半透膜擴散到水或緩沖液中，而生物大分子（例如蛋白質(zhì)）不能透過半透膜，被截留在半透膜內(nèi)。用此技術(shù)可以將小分子化合物與生物大分子分離。18．是將等電點聚焦電泳和SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)合起來的一種電泳方法。首先，先進行等電點聚焦電泳，按照蛋白質(zhì)的等電點差異分離；然后，再進行SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳，按照蛋白質(zhì)的大小差異分離。染色后得到的電泳圖是二維分布的蛋白質(zhì)圖。19．是一種用來測定多肽和蛋白質(zhì)氨基酸序列的方法。用異硫氰酸苯酯與多肽的N末端的氨基酸反應(yīng)，從多肽鏈的N末端切下第一個氨基酸殘基，用層析法可以測定這個被切下的氨基酸殘基?；厥沼嘞碌亩嚯逆湥ㄉ倭艘粋€氨基酸殘基），再進行下一輪Edman降解循環(huán)，切下N末端的第二個氨基酸殘基，并測定。重復(fù)循環(huán)過程，直到測定出整個多肽的氨基酸序列。20．氨基酸、肽和蛋白質(zhì)分子都是兩性分子，使得這些分子帶有的凈電荷為零時，對應(yīng)的溶液的pH值稱為等點電。結(jié)構(gòu)不同的兩性分子，等電點不同。21．多克隆抗體是識別一個蛋白質(zhì)（抗原）的不同抗原決定簇的多種抗體的混合物。單克隆抗體由同一個B細胞克隆合成并分泌，是一種均一的抗體，識別同一個抗原決定簇。22．僅由氨基酸組成的蛋白質(zhì)稱為單純蛋白質(zhì)，例如核糖核酸酶和肌動蛋白。由氨基酸和其它各種化學(xué)成分組成的蛋白質(zhì)稱為綴合蛋白質(zhì)，其中非蛋白質(zhì)部分稱為輔基或配體，例如糖蛋白和脂蛋白。23．由相同亞基組成的寡聚蛋白稱為同寡聚蛋白，例如乳酸脫氫酶LDH1，由4個H亞基組成。由兩種或兩種以上亞基組成的寡聚蛋白稱為雜寡聚蛋白，例如血紅蛋白，由2個α亞基和2個β亞基組成。24．是一種高分辨率的蛋白質(zhì)分離技術(shù)，也可以用于測定蛋白質(zhì)的等電點。將蛋白質(zhì)混合物放在具有pH梯度的電泳介質(zhì)中，在外電場的作用下蛋白質(zhì)移動并聚焦（停留）在等于其等電點的pH梯度處，形成一個很窄的區(qū)帶。(二)填空題1.兩性離子2.2.97，7.593.苯丙氨酸，色氨酸，酪氨酸；色氨酸4.離子交換層析，茚三酮5.苯異硫氰酸酯或Edman6.纖維狀蛋白質(zhì)，球狀蛋白質(zhì)，膜蛋白7.極性，非極性8.異構(gòu)酶，伴侶蛋白9.X射線衍射法/X射線晶體結(jié)構(gòu)分析10.協(xié)同效應(yīng)，變構(gòu)，波爾11.甲硫氨酸12.賴氨酸，精氨酸13.絲氨酸，蘇氨酸，酪氨酸14.非極性或疏水，極性或親水15.谷氨酸，纈氨酸16.胰島β細胞，信號肽，胰島素原，C肽17.同源蛋白質(zhì)，不變殘基，可變殘基18.胰蛋白酶，胰凝乳蛋白酶，彈性蛋白酶19.大小，電荷性質(zhì)20.高級結(jié)構(gòu)/二、三和四級，一級21.4，可變，不變22.323.共價24.天冬酰胺，絲氨酸，蘇氨酸25.B,C,A,D26.組氨酸的咪唑基27.鹽溶，鹽析28.等電點聚焦電泳，毛細管電泳，聚丙烯酰胺凝膠電泳29.沉降速度法/沉降平衡法，凝膠過濾法，SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法30.親和層析法31.1－100nm，帶有同種電荷，能形成水化層32.抗原決定簇與抗體結(jié)合部位構(gòu)象互補，二者各有對應(yīng)的化學(xué)基團通過作用力使二者結(jié)合（離子鍵、氫鍵等）33．色氨酸，組氨酸，脯氨酸34．內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，高爾基體35．雙電層，水化層36．固定血紅素，保護血紅素鐵免遭氧化，為氧分子提供一個合適的結(jié)合部位37．鹽析法，有機溶劑沉淀法，重金屬鹽沉淀法，生物堿試劑沉淀法，加熱變性沉淀法38．紫外差光譜法，熒光和熒光偏振法，圓二色性法，核磁共振法（三）選擇題1．A2．C3．C4．C5．A6．D7．B8．D9．D10．A11．D12．A13．C14．D15．C16．D17．A18．A19．B20．C21．B22．D23．D24．D25．A26．C27．A28．B29．B30．C31．A32．A33．B34．D35．A36．B（四）是非題1．對2．錯3．錯4．錯5．錯6．對7．對8．錯9．錯10．對11．錯12．錯13．對14．錯15．錯16．對17．對18．錯19．對20．錯21．錯22．錯23．錯24．對25．錯26．錯27．錯28．錯29．錯30．錯31．錯32．對33．對34．對35．對36．對37．對38．對39．錯40．對（五）簡答與計算1．Tyr－Gly－Gly－Phe－Leu2．(1)多聚亮氨酸的R基團不帶電荷，適合于形成。螺旋。(2)異亮氨酸的β碳位上有分支，所以形成無規(guī)則結(jié)構(gòu)(3)在pH7.0時，所有精氨酸R的基團都帶正電荷，正電荷彼此相斥，使氫鍵不能形成，所以形成無規(guī)則結(jié)構(gòu)。(4)在pHl3.0時，精氨酸的R基團不帶電荷，并且β碳位上沒有分支，所以形成α螺旋。(5)在pHl.5時，谷氨酸的R基團不帶電荷，并且蘆碳位上沒有分支，所以形成α螺旋。(6)因為蘇氨酸β碳位上有分支，所以不能形成α螺旋。(7)脯氨酸和羥脯氨酸折疊成脯氨酸螺旋，這脯氨酸螺旋是不同于α螺旋的有規(guī)則結(jié)構(gòu)。一個小肽的氨基酸順序的測定用異硫氰酸苯酯；多肽鏈的氨基末端的確定用丹磺酰氯；一個沒有二硫鍵的蛋白質(zhì)的可逆變性用尿素；芳香族氨基酸殘基的羧基一側(cè)肽鍵的水解用胰凝乳蛋白酶；甲硫氨酸的羧基一側(cè)肽鍵的裂解用溴化氰；通過氧化途徑將二硫鍵打開用過甲酸。3．pI=（2.19＋4.25）/2＝3.22谷氨酸的等電點應(yīng)是3.22。 在pH3.22時，－COOH和－COOH共解離1個基團，即Glu分子處于凈電荷為零的兩性離子狀態(tài)。4．在伸展的多肽鏈中，每一個氨基酸殘基長度是0.36nm。該肽鏈的長度是0.3610036nm。氨基酸殘基的平均分子量為120（也可為110），則該蛋白質(zhì)的分子量是100120120005．牛胰核糖核酸酶變性－復(fù)性實驗。天然的牛胰核糖核酸酶在8mol/L的尿素或6mol/L的鹽酸胍存在下，用β硫基乙醇處理后，分子內(nèi)的4個二硫鍵斷裂，緊密的球狀結(jié)構(gòu)伸展成松散的無規(guī)卷曲構(gòu)象，活性喪失。用透析法將變性劑除掉后，牛胰核糖核酸酶能回復(fù)到天然構(gòu)象，活性能達到原來活性的95％以上。而8個半胱氨酸隨機結(jié)合，形成正確構(gòu)象的概率是1/105。這說明牛胰核糖核酸酶肽鏈上的氨基酸序列信息控制肽鏈折疊成正確的天然構(gòu)象。6．Lys，His和Arg的含量較高。靜電相互作用。組蛋白的pI值是10.8，在生理條件下組蛋白帶大量的正電荷，而DNA的磷酸基團帶大量的負電荷。7．