病原微生物采集運輸要求講義

病原微生物采集運輸要求講義第1頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一主要內容1、病原微生物的分類2、病原微生物的采集3、病原微生物的運送4、高致病性病原微生物的運輸要求第2頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一1、病原微生物的分類病原微生物：是指能夠使人或者動物致病的微生物。第3頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一1.1、病原微生物的分類我國在《病原微生物實驗室生物安全管理條例》中按危害程度，將病原微生物分為四類：第一類病原微生物，是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現或者已經宣布消滅的微生物。第二類病原微生物，是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。第三類病原微生物，是指能夠引起人類或者動物疾病，但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不夠成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物。第四類病原微生物，是指在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物。第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病病原微生物。第4頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一《人間傳染的病原微生物名錄》

介紹

為了規(guī)范人間傳染的病原微生物的實驗室操作，確保實驗室安全衛(wèi)生部制訂了《人間傳染的病原微生物名錄》（以下簡稱《名錄》），《名錄》已于2006年1月11日下發(fā)。編寫依據：中華人民共和國傳染病防治法

《病原微生物實驗室生物安全管理條例（2004.11.12)

中華人民共和國國家標準（GB19489-2004）

《實驗室生物安全通用要求》《危險品航空安全運輸技術細則》VS聯合國編號

(UN2814和UN3373)第5頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一1.2、應城市疾控中心病原微生物檢驗項目類別三類病原微生物：致瀉性大腸埃希氏菌、沙門氏菌、志賀氏菌、副溶血弧菌、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽胞桿菌等6種（實驗活動：食品、環(huán)境、可疑樣品病原菌檢測）。甲肝病毒、乙肝病毒、麻疹病毒、風疹病毒（實驗活動：免疫人群抗體水平檢測）流行性感冒病毒（非H2N2亞型）（實驗活動：樣本采集與送檢）第6頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一二類病原微生物結核桿菌（實驗活動：可疑人群痰檢及結核菌培養(yǎng)）霍亂弧毒（實驗活動：疫源地、外環(huán)境及可疑人群病原檢測）

HIV病毒（實驗活動：可疑人群血清HIV抗體初篩）乙腦病毒、脊灰病毒、狂犬病毒（實驗活動：免疫人群抗體水平檢測及相關流行病學調查）口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒、SARS冠狀病毒（實驗活動：樣本采集與送檢及相關流行病學調查）第7頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一2、病原微生物采集標本采集的部位、時間、質量是決定檢測結果第一條件采集標本時：早、快、近（病變部位）、多、凈第8頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一樣本采集注意事項1.生物安全防護水平設備（個人防護用品、防護材料、器材和防護設施）2．人員:掌握專業(yè)知識和操作技能3.措施:有效防止病原微生物擴散和感染4.保證樣本質量:技術方法、手段5.詳細記錄：來源、采集過程和方法等第9頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一采樣的規(guī)范性

-獲得可靠實驗室檢測結果方法：正確時間：合理數量：足夠品種：多個（同一病人、環(huán)境）保存：妥善（不同樣品、不同條件）運輸：安全第10頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一采集的復雜性同一個病人采集多種標本血液/血清鼻咽拭子糞便/肛拭子腦脊液組織一起疫情多次采樣(回顧性的、新發(fā)病人、恢復期病人)環(huán)境標本水體、食物、動物、媒介第11頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一樣本采集注意點生物安全：個人防護

容器可靠:無菌、耐壓、防滲漏防止交叉污染：采樣中、物品使用記錄與編號：及時、準確第12頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一溫度對病毒的影響病毒對熱不穩(wěn)定

55～60℃數分鐘，病毒的衣殼蛋白質就發(fā)生變性，使病毒失去感染力。離體以后，甚至體溫也會使一些病毒喪失活性。4℃幾天(凍干，長期）-70℃幾個月～幾年-196℃長期病毒必須低溫儲藏。第13頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一短期保存運輸保持低溫避免反復凍融到實驗室前

4℃24hr-70℃days第14頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一離子環(huán)境和PH所有的病毒都應放在等滲和生理PH環(huán)境中，對離子環(huán)境和PH的允許界限相當寬，但不同的病毒有差異。第15頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一輻射用電離輻射(X線、丙種射線、非電離輻射如紫外線)能對病毒滅活。幾乎所有的電離輻射都引起多核苷酸鏈致命的毀壞，雙股核苷酸鏈的某一個部分斷列都能使病毒致死。

紫外線:DNA的損害是使核苷酸相鄰的嘧啶鹼基二聚物

RNA病毒形成尿嘧啶二聚物所致死。第16頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一禽流感標本采集下呼吸道標本－灌洗液、痰上呼吸道標本－鼻咽拭子、抽取液血清－雙份(溶血）其他－消化道/尸檢標本第17頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一SARS標本采集呼吸道標本－鼻咽拭子

血標本－全血，血清（雙份)消化道標本－糞便其他－尿液/尸檢標本第18頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一手足口病皰疹液腦脊液血清咽拭子糞便第19頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一AFP(急性遲緩性麻痹）雙份糞便（48hr內采集）質量：≧5g病人年齡≦15歲帶冰運輸資料：送檢單，個案表，第20頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一3、病原微生物運輸的要求第21頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一運輸實施陸路運輸水路運輸民用航空運輸：申請單位應當憑省級以上衛(wèi)生行政部門或中國疾病預防控制中心核發(fā)的《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本準運證書》到民航等相關部門辦理手續(xù)。第22頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一分類《名錄》中第三類病原微生物運輸包裝分類為Ｂ類的病原微生物菌（毒）種或樣本?！睹洝分械谒念惒≡⑸铩５?3頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一包裝的要求基本要求要有三層包裝：

1、主容器：采樣管內裝標本，材質為無菌塑料管、螺口、密封性能完好。其外包裹有的吸收材料。

2、輔助容器：要求要防水、防泄漏。（專用塑料袋）

3、外包裝：樣本運送箱第24頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一其他送檢單要隨身攜帶，不要跟樣品放在一起。樣本保存溫度的要求。（常溫、低溫）。第25頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一運送要求

按國家運輸規(guī)定中應由兩名專業(yè)的技術人員運送。第26頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一4、高致病性病原微生物的運輸要求第27頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一

衛(wèi)生部第45號令

《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》

2006年2月1日起施行第28頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一高致病性病原微生物樣本分類國際民航組織《危險物品航空安全運輸技術細則》分類包裝要求，將相關病原和樣本分為A、B兩類。聯合國編號分別為UN2814（UN2900動物）和UN3373。第29頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一A類感染性物質

一類在運輸中，一旦有暴露發(fā)生，即能夠在所有人類和動物中引起永久性殘疾、導致威脅生命或致命疾病的傳染性物質。達到該標準的能引起人體疾病或引起人與動物疾病的感染性物質的聯合國編號為UN2814，而只能引起動物疾病的該類感染性物質則為UN2900

。第30頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一B類感染性物質沒有達到歸屬為A類標準的感染性物質。B類感染性物質的編號為UN3373。生物制品，B類”（Biologicalsubstance,CategoryB）第31頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一包裝要求運輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的容器或包裝材料應當達到國際民航組織《危險物品航空安全運輸技術細則》（Doc9284包裝說明PI602）規(guī)定的A類包裝標準，符合防水、防破損、防外泄、耐高溫、耐高壓的要求，并應當印有衛(wèi)生部規(guī)定的生物危險標簽、標識、運輸登記表、警告用語和提示用語。第32頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一基本三層包裝系統(tǒng)可以應用于所有的感染性物質:主容器。初級容器防水、防滲漏，內裝標本。其外包裹有的吸收材料。次級包裝。次級包裝為第二層持久的、防水、防滲漏的包裝，它封閉和保護初級容器。多個包有緩沖材料的初級容器可放于同一個次級包裝中，但是，這要求同時也放入足夠的吸收材料以確保一旦發(fā)生泄漏后所有液體都可被吸收。外層包裝。次級包裝包裹有合適的緩沖材料后，即可被裝入外層運輸包裝。外層運輸包裝保護其內容物免受外界影響，如運輸過程中的物理損壞。最小的外部總尺寸應為10x10cm。第33頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一主容器包裝要求病原微生物菌（毒）種或者樣本應正確盛放在主容器內，主容器要求無菌、不透水、防泄漏。主容器可以采用金屬或塑料等材料，必須采用可靠的防漏封口。主容器外面要包裹有足夠的樣本吸收材料，一旦有泄漏可以將所有樣本完全吸收。主容器的表面貼上標簽，標明標本類別、編號、名稱、樣本量等信息。第34頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一輔助容器輔助容器是在主容器之外的結實、防水和防泄漏的第二層容器，它的作用是包裝及保護主容器。多個主容器裝入一個輔助容器時，必須將它們分別包裹，防止彼此接觸，并在多個主容器外面襯以足夠的吸收材料。相關文件（例如樣品數量表格、危險性申明、信件、樣品鑒定資料、發(fā)送者和接收者信息）應該放入一個防水的袋中，并貼在輔助容器的外面。輔助容器必須用適當的襯墊材料固定在外包裝內，在運輸過程中使其免受外界影響，如破損、浸水等。第35頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一冷凍劑的使用在使用冰、干冰或其他冷凍劑進行冷藏運輸時，冷凍劑必須放在輔助容器和外包裝之間，內部要有支撐物固定，當冰或干冰消耗以后，仍可以把輔助容器固定在原位置上。如使用冰，外包裝必須不透水。如果使用干冰，外包裝必須能夠排放二氧化碳氣體，防止壓力增加造成容器破裂。在使用冷凍劑的溫度下，主容器和輔助容器必須能保持良好性能，在冷凍劑消耗完以后，仍能承受運輸中的溫度和壓力。當使用液氮對樣品進行冷藏時，必須保證主容器和輔助容器能適應極低的溫度。此外，還必須符合其他有關液氮的運輸要求。主容器和輔助容器須在使用制冷劑的溫度下，以及在失去制冷后可能出現的溫度和壓力下保持完好無損。主容器和輔助容器必須在無泄漏的情況下能夠承受95kPa的內壓，并能保證在－40℃到＋55℃的溫度范圍內不被損壞。第36頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一A類感染性物質的包裝與標簽第37頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一B類感染性物質的包裝與標簽第38頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一

外包裝標示提供了所包裝內容物的信息，危險的性質和應用的包裝標準。包裝或第二層包裝的所有標示都應清楚可見并且沒有被其他標簽或標示所覆蓋。每一個包裹都應在其外包裝或第二層包裝上顯示如下信息：－寄件人的姓名和地址－責任人的電話號碼和出貨信息－收貨人的姓名和地址－聯合國編號緊跟恰當的貨物名稱（UN2814“感染人類的傳染性物質”或者UN2900“影響動物的傳染性物質”）。專業(yè)名稱不允許出現在外包裝上。－儲藏溫度（選擇）－當使用干冰或液氮時：制冷劑的專業(yè)名稱，正確的聯聯合國編號和凈重標示第39頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一標簽名稱：感染性物質最小尺寸：100×100mm（最小包裝50×50mm）每一包裝的標簽數：1顏色：黑色和白色“感染性物質”字樣應該標明。在一些國家還要求印有“一旦循壞和泄露，立即通知公共衛(wèi)生機構”的語句

有兩種類型的標簽：45°角放置的方形（菱形）危險性標簽，絕大多數的各類危險性貨物都要求有此標簽；具有多種形狀的管理標簽，一些危險性貨物要求有單獨或附加于危險性標簽的該類標簽。專門的危險性標簽應貼于每一運輸的危險性貨物的外表面（除特殊的例外）。

標簽第40頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一第41頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一收樣單位：

詳細地址：

郵政編碼：

聯系人：

聯系電話：

送樣單位：

詳細地址：

郵政編碼：

聯系人：

聯系電話：

高致病性病原微生物運輸登記表

第42頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一標記·

航空：發(fā)貨人姓名，地址和電話號碼·

收件人姓名，地址和電話號碼·

航空：正確的運送名稱（生物制品，B類”）

最小尺寸：方框邊線的寬度至少應為2mm，字母和數字至少為6mm高。航空運輸時方框每邊至少長為50mm。顏色：未特別指定，標記于外包裝上最外層，并與底色明顯不同，清晰可讀即可。水陸運輸（公路、鐵路和海路）：無需其他標記航空運輸：帖明標記，生物制品，B類”

第43頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一第44頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一申請單位從事疾病預防控制、醫(yī)療、教學、科研、菌（毒）種保藏以及生物制品生產的單位，因工作需要，可以申請運輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本。第45頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一申請在省、自治區(qū)、直轄市

行政區(qū)域內運輸申請在省、自治區(qū)、直轄市行政區(qū)域內運輸的，由省、自治區(qū)、直轄市衛(wèi)生行政部門審批。省級衛(wèi)生行政部門應當在5個工作日內做出是否批準的決定；符合法定條件的，頒發(fā)《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本準運證書》;不符合法定條件的，應當出具不予批準的決定并說明理由。第46頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一申請跨省、自治區(qū)、直轄市

運輸

申請跨省、自治區(qū)、直轄市運輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的，應當將申請材料提交運輸出發(fā)地省級衛(wèi)生行政部門進行初審；對符合要求的，省級衛(wèi)生行政部門應當在3個工作日內出具初審意見，并將初審意見和申報材料上報衛(wèi)生部審批。

第47頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一衛(wèi)生部應當自收到申報材料后3個工作日內做出是否批準的決定。符合法定條件的，頒發(fā)《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本準運證書》；不符合法定條件的，應當出具不予批準的決定并說明理由。對于為控制傳染病暴發(fā)、流行或者突發(fā)公共衛(wèi)生事件應急處理的運輸申請，省級衛(wèi)生行政部門與衛(wèi)生部之間可以通過傳真的方式進行上報和審批；需要提交有關材料原件的，應當于事后盡快補齊。

第48頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一運輸申請申請單位在運輸前應當向省級衛(wèi)生行政部門提出申請，并提交以下申請材料（原件一份，復印件三份）第49頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一申請材料可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸申請表；法人資格證明材料（復印件）；接收高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的單位(以下簡稱接收單位)同意接收的證明文件；

<規(guī)定>第七條第（二）、（三）項所要求的證明文件（復印件）；容器或包裝材料的批準文號、合格證書（復印件）或者高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸容器或包裝材料承諾書；其它有關資料。第50頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一接收單位應具備的條件具有法人資格；具備從事高致病性病原微生物實驗活動資格的實驗室；取得有關政府主管部門核發(fā)的從事高致病性病原微生物實驗活動、菌（毒）種或樣本保藏、生物制品生產等的批準文件。

第51頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一專人護送運輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本，應當有專人護送，護送人員不得少于兩人。申請單位應當對護送人員進行相關的生物安全知識培訓。在護送過程中采取相應的防護措施。第52頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一運輸后續(xù)工作《規(guī)定》第十六條在運輸結束后，申請單位應當將運輸情況向原批準部門書面報告。第53頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一運輸審批流程運輸申請單位衛(wèi)生部科教司中國CDC(實驗室管理處)3日內報衛(wèi)生部提出申請備案運輸單位省級衛(wèi)生行政部門頒發(fā)核發(fā)《準運證》或出具不予批準的決定及理由核準申請的單位，在運輸任務結束后，書面報告運輸情況初審（3個工作日）審批第54頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一附:應城市疾病預防控制中心

手足口病樣本采集運送要求

第55頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一一、手足口病相關資料手足口病(Handfootmouthdisease,HFMD)是由腸道病毒引起的傳染病，多發(fā)生于5歲以下的嬰幼兒，可引起發(fā)熱和手、足、口腔等部位的皮疹、潰瘍，個別患者可引起心肌炎、肺水腫、無菌性腦膜腦炎等并發(fā)癥。引發(fā)手足口病的腸道病毒有20多種，其中柯薩奇病毒(CoxAsckievirus)A16型(CoxA16)和腸道病毒71型（Enterovirus71.EV71）最常見。從有關資料表明，HFMD的病原體經歷了較大的變遷。對藥物具有抗性，75％酒精，5％來蘇對腸道病毒沒有作用，對乙醚，去氯膽酸鹽等不敏感。但對紫外線及干燥敏感，各種氧化劑(高錳酸鉀、漂白粉等)、甲醛、碘酒都能滅活。病毒在50℃可被迅速滅活，但1mol濃度二價陽離子環(huán)境可提高病毒對熱滅活的抵抗力，病毒在4℃可存活1年，在-20℃可長期保存，在外環(huán)境中病毒可長期存活。第56頁，共59頁，2023年，2月20日，星期一二、標本采集對象

標本采集對象是暴發(fā)疫情出現時手足口病的臨床診斷病例和病例發(fā)病所在