血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶測定設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)課件_第1頁
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血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶

活性的測定實(shí)驗(yàn)題目實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆展缺D(zhuǎn)氨酶活性測定的原理和方法血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶作用于由丙氨酸及a一酮戊二酸組成的基質(zhì)。產(chǎn)生丙酮酸及谷氨酸血清加基液保溫后產(chǎn)生丙酮酸的多少，即反應(yīng)出谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的大小。丙酮酸與2，4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在酸性溶液中顯黃色，在堿性溶液中成醌型顯棕紅色。實(shí)驗(yàn)原理

一、標(biāo)準(zhǔn)品對照法

取試管4支，標(biāo)號，按下表加試劑：實(shí)驗(yàn)操作56℃放置5分鐘。加0.4NNaOH液5.0ml慢慢加入（約1分鐘），邊加邊混勻。室溫放置30分鐘，測OD值，波長520nm，用蒸餾水調(diào)零點(diǎn)。計(jì)算（ODA-ODB）（ODs-ODs＇）=X（待測樣品丙酮酸含量）50ug/ml×0.1mlX=（ODA-ODB）（ODs-ODs＇）×5SGPT單位=（ODA-ODB）（ODs-ODs＇）×50.12.5×=（ODA-ODB）（ODs-ODs＇）×20二、標(biāo)準(zhǔn)曲線法配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)丙酮酸液，并且各加以適量的基質(zhì)液，作成標(biāo)準(zhǔn)曲線。具體做法如下表。。一標(biāo)準(zhǔn)對照法１.原始數(shù)據(jù)記錄2、公式計(jì)算酶活性單位（要求帶入數(shù)據(jù)，寫出結(jié)果）二、標(biāo)準(zhǔn)曲線法１.原始數(shù)據(jù)記錄2、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，（要求規(guī)范作圖）3、通過方法一的ODA-ODB，在標(biāo)準(zhǔn)曲線中，查得酶活性單位實(shí)驗(yàn)結(jié)果注意事項(xiàng)操作中加0.4NNaOH液時(shí)，需以較慢速度加入，并且邊加邊搖勻加快時(shí)則a一戊酮二酸引起的發(fā)色增強(qiáng)。本實(shí)驗(yàn)中各試劑加量都需要準(zhǔn)確，

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