清華大學(xué)生物醫(yī)學(xué)測試質(zhì)譜中心概況及ETD離子源介紹

清華大學(xué)生物醫(yī)學(xué)測試質(zhì)譜中心概況及ETD離子源介紹第1頁/共17頁主要組成部分一.實(shí)驗動物平臺二.細(xì)胞生物學(xué)平臺三.蛋白質(zhì)化學(xué)平臺四.同位素實(shí)驗室第2頁/共17頁一、實(shí)驗動物平臺超過2000m2的SPF級動物房，配備有病理切片系統(tǒng)和顯微操作系統(tǒng)。第3頁/共17頁二、細(xì)胞生物學(xué)平臺萬級凈化實(shí)驗室布置圖(80m2)第4頁/共17頁三、蛋白質(zhì)平臺

1、MALDI-TOF-TOF串聯(lián)質(zhì)譜儀

MatrixAssistedLaserDesorptionIonization

TimeOfFlightMassSpectrometryABI,4800plus第5頁/共17頁2、2DChipLCIonTrap質(zhì)譜儀

Electro-Spray

Ionization(ESI)ElectronTransferDissociation(ETD)

Agilent6340

第6頁/共17頁3、1200分析兼半制備液相色譜儀

主要用于多肽及蛋白質(zhì)的純度分析，濃縮制備等第7頁/共17頁四、同位素實(shí)驗室液體閃爍計數(shù)儀伽馬射線計數(shù)儀第8頁/共17頁ETDsourceintroduction第9頁/共17頁WhatisETD?

ElectronTransferDissociation–Singly-chargedradicalanionstransferanelectrontomultiply-protonatedpeptidesintheiontrapandinducefragmentationofthepeptidebackbonealongpathwaysthatareanalogoustothoseobservedinelectroncapturedissociation(ECD)第10頁/共17頁ETDReagentETDreagentusedtotransportelectronsintothetrapwheretheyreactwithpeptidecationsFluoranthene202.0202.9204.0205.0012346x10198200202204206208210212214m/z第11頁/共17頁ETDFragmentationProducescandzfragmentions,whileCIDproducesbandyfragmentions第12頁/共17頁NCISourceFluorantheneSolidESIPositivePeptideIonsfromLCChipNegativeIonPacketPositiveIonPacketIonTrapWithIons++InstrumentSchematicforETD第13頁/共17頁ETD的應(yīng)用主要用于蛋白質(zhì)翻譯后修飾的分析，可以提供更多的裂解碎片，提高對蛋白質(zhì)序列分析的覆蓋率，同時保護(hù)不穩(wěn)定的翻譯后修飾基團(tuán)，有助于發(fā)現(xiàn)更多的修飾位點(diǎn)。第14頁/共17頁Angiotensin1Dataan