高效液相色譜法測(cè)定水中多環(huán)芳烴

高效液相色譜法測(cè)定水中多環(huán)芳烴摘要：本文擬定了測(cè)定飲用水、地表水和地下水中萘(NpH)、熒蒽(FLU)、苯并(b)熒蒽(BbF)、苯并(k)熒蒽(BkF)、苯并(a)芘(BaP)、苯并(ghi)北(BPer)、和茚并(1，2，3—Cd)芘(IP)七種多環(huán)芳烴(PAH)的高效液相色譜分析法。本方法的最低檢測(cè)量(單位：ng)分別為：NpH0.10，F(xiàn)LU0.03，BbF0.01，BkF0.002，BaPO.01，Bper0.04，IP0.08。若取水樣1000ml，進(jìn)樣量為20μ1，則最低檢測(cè)濃度(單位：μg/L)分別為：NpH0.005，F(xiàn)LU0.0015，BbF0.0005，BkFO.0001，BaPO.0005，Bper0.002，IP0.004。關(guān)鍵字：高效液相色譜法多環(huán)芳烴1

方法原理采用正己烷提取水中多環(huán)芳烴，提取液經(jīng)無(wú)水硫酸鈉脫水，并通過(guò)0.45tan濾膜過(guò)濾去除雜質(zhì)，濃縮至一定體積后，用配備熒光和紫外檢測(cè)器的高效液相色譜儀進(jìn)行定量測(cè)定。2

試劑和材料2.1

高效液相色譜流動(dòng)相：甲醇，HPLC純或優(yōu)級(jí)，使用前經(jīng)0.45μm過(guò)濾和脫氣。2.2

標(biāo)準(zhǔn)溶液

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：各種多環(huán)芳烴(PAH)的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液均購(gòu)自國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心。使用前用甲醇(2.1)將各PAH標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋成濃度(單位：ng/ml)分別為NpH500，F(xiàn)LUl00，BbFSO，BkFl0，BaP50，Bper200，IP300的標(biāo)準(zhǔn)液，保存于4℃冰箱中備用。

混合PAH標(biāo)準(zhǔn)溶液：于l0ml容量瓶中加入稀釋后的FLU、BbF、BkF、BaP、BPer、IP標(biāo)準(zhǔn)液(2.2.1)各1.00±0.01ml，用甲醇(2.1)稀釋至標(biāo)線，配成各組分濃度(單位：ng/ml)分別為FLUl0.0，BbF5.0，BkFl.0，BaP5.0，Bper20.0，IP30.0的混合PAH標(biāo)準(zhǔn)溶液。

萘標(biāo)準(zhǔn)溶液：于10ml容量瓶中加入稀釋后的萘標(biāo)準(zhǔn)液(2.2.1)1.00±0.0lml，用甲醇(2.1)稀釋至標(biāo)線，配成NpH濃度為50.0ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。2.3

水樣預(yù)處理試劑

正己烷：HPLC純，必要時(shí)重蒸餾，濃縮50倍后在待測(cè)組分的檢測(cè)限內(nèi)不出現(xiàn)色譜峰。

無(wú)水硫酸鈉(NaaS04)：分析純無(wú)水硫酸鈉經(jīng)400℃灼燒2小時(shí)，保存于干燥器中備用。

硫代硫酸鈉(Na2S2O3·5H2O)：分析純。2.4

實(shí)驗(yàn)用水：Mill-Q超純水。3.儀器3.1

高效液相色譜系統(tǒng)

515恒流泵：Waters公司，流速精度為：0.001ml/min。

色譜分析柱：Supelcosil

PAH專(zhuān)用柱，15craX4.6mm，5μm。

474熒光檢測(cè)器：Waters公司，具有激發(fā)/發(fā)射光譜掃描及編程功能。斤

48膨6柏紫外檢測(cè)器套：卻Water睜s指公司。戲

71輪7被自動(dòng)進(jìn)樣器篩：歸Water植s海公司。紋垮恒溫柱箱首：叛Water賺s具公司。仙冠色譜工作站叮：屑Millen壽nium3宋2煙色譜管理軟件墓，質(zhì)Water府s擔(dān)公司。松3.2掘蜘振蕩器：可調(diào)驟速、定時(shí)。級(jí)3.3臨矛抽濾裝置：用痰于流動(dòng)相甲醇艷抽濾脫氣的抽嚴(yán)濾裝置應(yīng)與用嶺于樣品預(yù)處理粘的抽濾裝置分綁開(kāi)使用。脫3.4疑弊恒溫水浴。難3.5泡污玻璃器皿垂幸采樣瓶月：庭1000m跨l搞帶磨口玻璃塞健的棕色細(xì)口瓶收。糟勵(lì)分液漏斗捏：例1000m煮l舟，玻璃活塞不凳涂潤(rùn)滑油。關(guān)喇量筒感：賓1000m渠l脾。魄戲比色管話：跪50m靈l價(jià)。倉(cāng)匠濃縮管臨：妻50m河l位。所有玻璃器豐皿均需經(jīng)過(guò)鉻艷酸洗液浸泡，售清洗干凈，最漏后用超純水清旨洗。4

水樣材4.1沈眾水樣的性質(zhì)污水樣中匆的攻PA杠H神易吸附于顆粒親物或容器壁上晴，且對(duì)光敏感雙。水樣中殘余建氯對(duì)其穩(wěn)定性使有影響。秩4.2者巧水樣的采集斷水樣必須采集等在棕色玻璃容耗器中，采樣前熱不能用水樣預(yù)適洗瓶子，以防梳止樣器的沾染職和吸附，在采疫樣點(diǎn)采樣及蓋觸好瓶塞時(shí)，水似樣瓶要完全注記滿，不留空氣驚。若水中有殘喚余氯存在，要志在，每升水中始加朱入考80m規(guī)g柄硫代硫酸糕鈉擁(水)選除氯。漠4.3田醫(yī)水樣的保存畫(huà)水樣應(yīng)放在暗舍處，波4仍℃柿冰箱中保存。階采樣后應(yīng)盡快縮在歸2舟4塌小時(shí)內(nèi)進(jìn)行萃套取。萃取后的遷樣品若不能立團(tuán)即分析，應(yīng)放駁在暗處，蔑4遞℃襲冰箱中保存，保并活在褲4蝴0梯天內(nèi)分析完畢漲。牲4.4瀉救水樣的預(yù)處理可藍(lán)水樣的萃?。弘u搖勻水樣，謀用稅1000m泰l柜量歉筒朋跟)勢(shì)量婚取過(guò)1000m飄l蹦水旺樣胖(明萃取所用水樣鋸體積視具體情剪況而定，可增設(shè)減少)估于予1000m義1束分液漏晌斗暴鍛)仍中，加終入伯50m昌l系正己鐘烷長(zhǎng)敬)穿，手搖分液漏霧斗，放氣幾次賤后，安裝分液泳漏斗于振蕩器疲架匯上測(cè)(3.2版)真振嗚搖要5mi勻n寧進(jìn)行萃取。取萌下分液漏斗靜索置孫約降1宵5壘—滿30min叫(識(shí)靜置時(shí)間視兩堵相分開(kāi)情況而勿定淘)哲，棄去水相。熔節(jié)萃取液的脫水貧凈化劇.1毯僻抽濾裝置的準(zhǔn)閘備：在抽濾裝謊置中放伶置承0.4水5俱μ糟m浸濾膜，濾膜上盈覆漂蓋緊3曲-5g洲無(wú)水硫酸倉(cāng)鈉孟日)狠，用少量正己?jiǎn)就檎彅D)古潤(rùn)濕。將飯50m紡/撈比色己管蓄匆)充放入濾瓶中，兼盛接過(guò)濾的萃丟取液。篇.2課拜萃取液的凈化拔：?jiǎn)?dòng)抽濾裝哨置電源，將蘋(píng)夕取液全部轉(zhuǎn)入軍抽濾裝置進(jìn)行邊抽濾。將過(guò)濾白后的萃取液轉(zhuǎn)糧入濃縮管旬中楚歡)播，待濃縮。崗.3旨納萃取液的濃縮燙：將盛有萃取嚷液的濃縮管放病入恒溫水讓浴跨(3.4綁)忍中，破在腔70蟻-8諷0鞭℃黨的水溫下濃蠢縮眨1.0m還l濟(jì)，留稍待辭HPL偷C層分析。5

操作步驟淚5.1比挑色譜條件的選朱擇籌閣流動(dòng)相：萘：妥甲醇：宜水糕(V/V)=鑒8峰0增：奸10起0姐；其夏它睡PA突H地：平100醋%俗甲述醇瞎(算2.1)燙腦洗脫模式及洗神脫流速：本方翼法使用等度洗妙脫，洗脫速率剝?yōu)樘?.0ml/壇mi臉n故。悼首柱箱溫度控制械：本方法使用海恒溫柱箱，柱閱箱溫度龍為擊30弄%儀。

檢測(cè)器設(shè)置患本方法用紫外跑檢測(cè)器檢測(cè)萘功，其捧它燦PAH掘堪用熒光檢測(cè)器輕檢測(cè)。猶.1陸懸熒光檢測(cè)器宜.1.1恩突波長(zhǎng)設(shè)置：本戚方法首先進(jìn)行模激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)弊射波長(zhǎng)的掃描固，根據(jù)所得光助譜圖，找出各汪待柴測(cè)睬PA棚H澆的特征激發(fā)和擋發(fā)射波長(zhǎng)。再越根據(jù)波長(zhǎng)程序刑設(shè)置的方法，認(rèn)確定各組分的疫激發(fā)和發(fā)射波腰長(zhǎng)。見(jiàn)沃表抓1箱。盟存為獲得方法的嶺較高靈敏度，松根據(jù)最優(yōu)化柱竭系統(tǒng)條件下獲堅(jiān)得的耀各匠PA喜H冶的保留時(shí)間，烤進(jìn)行波長(zhǎng)程序芝設(shè)置，采用程芬序模式進(jìn)行檢盼測(cè)。程序?qū)嵗w見(jiàn)脈表壯2族。賣(mài)表些1按揭各待苗測(cè)糖PA曠H今的特征激發(fā)波送長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)嫩PAH劉激發(fā)波葵長(zhǎng)扒Ex(nm)船發(fā)射波茂長(zhǎng)芹E艇M登(球nm)盆FLU石230染435販BbF悠300妥430村BkF株300抵430健Bap桑300采430揪Bper泥300倆410裕IP忠295焦505叫表混2溉讀熒光檢測(cè)器程瞇序?qū)嵗龎鄄叫蛱?hào)辦時(shí)間

負(fù)(薄min)倒激發(fā)波長(zhǎng)

追(鼓nm)估發(fā)射波長(zhǎng)

岸(烘nm)池檢測(cè)分組生初始步任

融230車(chē)435帖FUL蛇第一步舒5.0槳300揪430栽Bbf,Bk名F,BaP背第二步械13.0市300業(yè)410洗Bper絨第三步詞17.5委300堆500惰IP挖第四既步呼(豐程序結(jié)才束卸)墳21.0互230梁435節(jié)

龜.1.1原袍其它參數(shù)：熒隸光檢測(cè)器的增門(mén)益鍵為密10騙0負(fù)，衰減泥為榆1柴6惑，響應(yīng)啦為爐Digita茫lFilt涌er10嫂s瞧。麥.2甲守紫外檢測(cè)器紫們外檢測(cè)器押在叔275m彩n覺(jué)波長(zhǎng)下檢測(cè)瓶萘堅(jiān)(NpH萍)扁。響鋤數(shù)據(jù)記錄和處渡理系統(tǒng)本方法羊使鮮用貍Water煤s夾公司提供圍的估Millen厲nium3侄2休色譜管理軟件憲進(jìn)行數(shù)據(jù)記錄續(xù)和處理。珠5.2厲手標(biāo)準(zhǔn)溶顆液構(gòu)班本方法采用外已標(biāo)法定量。傾隨標(biāo)準(zhǔn)溶液的制底備：根據(jù)本方認(rèn)法的線性范圍詳，選擇一個(gè)濃名度的標(biāo)準(zhǔn)溶飽液逢券)聞，通過(guò)不同的熔進(jìn)樣體積狡：央5庭μ此l齡，脆1款0雨μ導(dǎo)l頁(yè)，幣2含0密μ謊l林，助4康0稍μ尺l綠，慕6側(cè)0故μ建l偽(嫩至脈少致5驅(qū)個(gè)性點(diǎn)買(mǎi))椅，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲油線，其中最小檢的進(jìn)樣體積所腫含待測(cè)組分的為質(zhì)脫量矛(ng歡)淘應(yīng)稍高于該組飼分的最低檢測(cè)如量。和慎標(biāo)準(zhǔn)溶液的使天用：每個(gè)工作可日必須測(cè)定一錘個(gè)或幾個(gè)標(biāo)準(zhǔn)焰溶液點(diǎn)來(lái)檢驗(yàn)毅標(biāo)準(zhǔn)曲線，并扮確定保留時(shí)間去。如果某待測(cè)粗組分的標(biāo)準(zhǔn)溶軌液測(cè)定值與配翠置值的相對(duì)標(biāo)留準(zhǔn)偏差大售于炭15受%飼，必須重新繪職制標(biāo)準(zhǔn)曲線。膠根據(jù)各組分保沙留時(shí)間的變化軍調(diào)整熒光檢測(cè)倡器的程序。敗少標(biāo)準(zhǔn)曲線的表婚示：以響應(yīng)值界對(duì)進(jìn)樣體積所察含組分的質(zhì)而量計(jì)(ns丈)獎(jiǎng)作標(biāo)準(zhǔn)曲線孟。狠Mille明nnium3票2慕甘色譜工作站將刺根據(jù)設(shè)定的標(biāo)亦準(zhǔn)和樣品組模燙式，自動(dòng)進(jìn)行旱數(shù)據(jù)記錄和處雕理，存儲(chǔ)標(biāo)準(zhǔn)概曲線。乳5.3蹲置樣品測(cè)定精鍋進(jìn)樣：本方法宗采用自動(dòng)進(jìn)樣化器抄屯)昏自動(dòng)進(jìn)樣。進(jìn)純樣量根據(jù)水樣披中吩PA笛H康的含量確定，拉一般色取辱5-4進(jìn)0爭(zhēng)μ耕l窄。較蜜記錄：檢測(cè)數(shù)救據(jù)記錄嘉由找Millen娃nium32責(zé)頌色譜工作站來(lái)格完成。與5.4霧皂譜圖分析

定性分析水.1濁攔各組分的洗脫賣(mài)次序：本方法園采嫂用省Supelc餡osil

P更A痰H譯專(zhuān)用柱，七僵種久PA妻H彈的出峰順序依瀉次為慧：綁Np俱H做，你FL璃U淘，滲Bb繡F役，唯Bk董F比，施Ba垃P禁，行Bpe笑r瓣，鵲I戴P霞。燭.2市都定性依據(jù)：以仆水樣和標(biāo)準(zhǔn)溶按液的保留時(shí)間聽(tīng)來(lái)定性。在本說(shuō)方法中，范由比Millen醉nium3仿2洲色譜工作站來(lái)泛完成，用作定賊性的保留時(shí)間緣窗口寬度一般娃設(shè)定為保留時(shí)性間咱的姻±5跳%鴨。買(mǎi)譜定量分匠析限斜本方法中剪，嫁Millen蒜nium3洪2北色譜工作站將末根據(jù)儲(chǔ)存的標(biāo)褲準(zhǔn)曲線自動(dòng)計(jì)宰算出各組分的愚含量，單位批：居n杯g井。然后根據(jù)下榆式計(jì)算樣品濃雞度改：沃Ci=m0織xVtxl0耕00/(V0纖XVs)圓式中：耳Ci欠-覆水樣屑中瓣P(guān)A股H組的含量寇，局μ跌g/緊L賺；凈葡m0鍵-靜由工作站計(jì)算迅出的一定進(jìn)樣袋體狡積委(Vo燈)啦內(nèi)所剝含伐PA蓋H斷的質(zhì)量媽?zhuān)祅淹g穿；吼劇Vt少-扭萃取濃縮液的近總體積貧，謹(jǐn)m只l牲；姓凱Vo賊-淺萃取濃縮液的不進(jìn)樣體積石，傘μ誰(shuí)l罰；椅扮Vs夠-斤水樣體積觀，享m卻l查。籍6

結(jié)果表示輩6.1姐怖定性結(jié)果蹤根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液古色譜圖中各組全分的保留時(shí)間幣，確定出被測(cè)蝦水樣中存在的伍組分?jǐn)?shù)目和組斬分名稱，標(biāo)識(shí)仇于色譜圖上。絨本方法中，耕由韻Mille召nnium3雖2兩色譜工作站來(lái)少完成。濟(jì)6.2土娘定量結(jié)果癥縣含量的表示方遇法：搏按全5.4.色2什中公式計(jì)算出沉水樣少中險(xiǎn)PA孟H摧的含量，焰以遼μ它g/碼L遼表示。姻萬(wàn)精密度和準(zhǔn)確誤度堆對(duì)純水加標(biāo)和領(lǐng)自來(lái)水樣加標(biāo)稈樣品進(jìn)行多次噸測(cè)定，相對(duì)標(biāo)垃準(zhǔn)偏差均低丑于學(xué)10疤%巡，加標(biāo)回收率兵大羅于點(diǎn)88獅%凍。7

質(zhì)量控制爛7.1棗著用于檢測(cè)載的法HPL蠟C掏系統(tǒng)應(yīng)按照檢央定周期定期進(jìn)遲行