磁共振監(jiān)測的肝癌載藥納米粒研發(fā)和臨床應(yīng)用

磁共振監(jiān)測的肝癌載藥納米粒研發(fā)和臨床應(yīng)用第1頁/共17頁磁共振監(jiān)測的肝癌載藥納米粒研發(fā)和臨床應(yīng)用

第2頁/共17頁肝癌的發(fā)病情況近年來，全球肝癌發(fā)病率明顯升高，每年全世界新增病例超過100萬人。肝癌的死亡率僅次于胃癌、食道癌而居于第三位。由于乙肝病毒感染仍沒有得到有效控制，肝癌發(fā)病率仍呈上升勢頭，我國年發(fā)病率高于10/10萬，每年死于肝癌約11萬人，占全世界肝癌死亡人數(shù)的45％。

第3頁/共17頁肝癌的治療情況肝癌治療首選手術(shù)，但肝癌初診時(shí)約80%失去手術(shù)機(jī)會(huì)，治療理念是綜合治療。肝癌的非手術(shù)治療在延長肝癌患者生命，改善生活質(zhì)量方面起了非常重要的作用。如微波、氬氦刀、射頻消融、無水酒精注射(PEIT)以及經(jīng)導(dǎo)管肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)（TACE）。TACE被國內(nèi)外多數(shù)學(xué)者列為非手術(shù)治療的首選。（5yearOS5-15%）第4頁/共17頁現(xiàn)有TACE存在的不足大多數(shù)腫瘤不能完全壞死,需多次治療。不可避免會(huì)對(duì)正常的肝實(shí)質(zhì)帶來損害,加重肝功能損傷,促進(jìn)肝硬化,影響患者的生活質(zhì)量及生存期。另外，現(xiàn)代腫瘤治療存在的問題還有：化療選擇性小,體內(nèi)代謝快、有效期短、對(duì)增殖快的正常組織也有毒性：心臟毒性、骨髓抑制等。基因及腫瘤疫苗治療缺乏有效導(dǎo)入載體，缺乏監(jiān)測效能的方法。第5頁/共17頁載藥納米粒生物技術(shù)定義：運(yùn)用某種具有特殊親和力的載體（納米粒）將藥物定向輸送到靶器官來發(fā)揮作用。特點(diǎn)：特異靶向性。毒副作用小。療效高：納米粒尺度下降3個(gè)數(shù)量級(jí)，其表面積提高6個(gè)數(shù)量級(jí)(100萬倍)，即療效提高100萬倍。第6頁/共17頁聚乳酸納米粒(polylacticacid,PLA)聚乳酸納米粒：直徑10～500nm的固態(tài)膠體粒子,無毒、可生物降解,并有適當(dāng)?shù)牧Ｐ闻c粒徑,以及有較長的體內(nèi)循環(huán)時(shí)間和具有較高的載藥量及藥物包封率等優(yōu)點(diǎn)。＜150nm的顆?？啥惚芨蝛ufou細(xì)胞的吞噬，通過其靶向性殺傷癌細(xì)胞。而較大顆粒通過肝動(dòng)脈被肝kufou細(xì)胞吞噬，并聚集于腫瘤中持續(xù)釋放藥物。第7頁/共17頁載藥納米粒第8頁/共17頁研究目的及意義1.初步探討阿霉素納米制劑對(duì)肝癌細(xì)胞的殺傷作用，從而尋求提高治療肝癌的新藥。2.為其他抗腫瘤藥物、基因及其他生物治療的活體MRI監(jiān)測奠定基礎(chǔ)。3.為以納米粒為載體的新一代化療藥物及基因治療載體的開發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

第9頁/共17頁研究內(nèi)容和研究試驗(yàn)方法1.納米粒的制備和鑒定。2.制備兔肝癌模型

及MRI成像

。3.介入法注射載藥微粒入腫瘤內(nèi)實(shí)驗(yàn)。4.載藥微粒成像實(shí)驗(yàn)及藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)。5.病理組織學(xué)分析與圖像分析比較。第10頁/共17頁納米粒的制備和鑒定以乳滴聚結(jié)法合成小于500nm的PLA-Gd-ADM-NP，并對(duì)其表面進(jìn)行修飾。體外測定PLA-Gd-ADM-NP的納米顆粒大小、所包裹的Gd-DTPA濃度和阿霉素藥量和包封率及釋放規(guī)律。第11頁/共17頁制備兔肝癌模型及MRI成像制備：CT引導(dǎo)下經(jīng)皮穿刺建立改良兔VX2肝癌模型。成像：動(dòng)物線圈實(shí)驗(yàn)兔肝癌模型MRI成像，記錄腫瘤內(nèi)部信號(hào)、大小情況等。第12頁/共17頁介入法注射載藥微粒入腫瘤內(nèi)實(shí)驗(yàn)采用經(jīng)肝動(dòng)脈插管法將PLA-Gd-ADM-NP混懸液、Gd-DTPA、阿霉素溶液、生理鹽水等四種成分，注射入隨機(jī)分組的兔肝癌內(nèi)。采用同法將PLA-Gd-ADM-NP混懸液注射到正常兔肝動(dòng)脈內(nèi)。每組各15只，途中若有以外死亡，則給以增補(bǔ)。第13頁/共17頁載藥微粒成像實(shí)驗(yàn)及藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)A常組、注射PLA-Gd-ADM-NP混懸液肝癌組、注射阿霉素肝癌組分別在注射術(shù)后外周靜脈采血1ml,通過反相高效液相色譜檢測藥物濃度，監(jiān)測藥代動(dòng)力學(xué)。B常組、注射PLA-Gd-ADM-NP混懸液肝癌組每組選取5～10只以MRI分別在術(shù)后1d、3d、5d、7d、14d、21d觀察記錄溶液在腫瘤內(nèi)分布、信號(hào)變化情況，重點(diǎn)觀察肝癌內(nèi)和正常肝組織的分布。C每組各5～10只分別于術(shù)后1d、3d、5d、7d、14d、21d行MRI檢查觀察腫塊的壞死情況。第14頁/共17頁病理組織學(xué)分析與圖像分析比較在成像之后，將5組各隨機(jī)各分3小組，每小組各5只，分別在治療后的1、2、3周再次行MRI成像后記錄腫瘤內(nèi)信號(hào)、大小變化情況，隨即處死動(dòng)物，取腫瘤標(biāo)本進(jìn)行病理組織學(xué)分析，分析腫塊大小、細(xì)胞壞死情況，對(duì)比分析MRI監(jiān)測納米粒在腫瘤代謝規(guī)律及作用情況，評(píng)價(jià)MR成像的效果和價(jià)值及治療情況。采用免疫組化檢測腫瘤殘存細(xì)胞，檢測VEGF、PCNA等指標(biāo)。第15頁/共17頁項(xiàng)目的特色和創(chuàng)新之處本研究利用聚乳酸接枝聚乳酸共聚物,制備負(fù)載阿霉素和Gd－DTPA的納米微粒。