臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢專家講座

臨床微生物標(biāo)本采集與送檢臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第1頁主

要內(nèi)容標(biāo)本采集意義和標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)本運輸與拒收標(biāo)準(zhǔn)血液標(biāo)本采集尿標(biāo)本采集糞便標(biāo)本采集痰標(biāo)本采集咽拭子標(biāo)本采集臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第2頁臨床感染性疾病診療和治療應(yīng)用良好檢測技術(shù)和方法，提供準(zhǔn)確結(jié)果或匯報正確規(guī)范采集和運輸標(biāo)本正確地選擇檢驗?zāi)繕?biāo)和方法臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第3頁

標(biāo)本采集是指采集患者體內(nèi)一小部分血液、體液、排泄物、分泌物以及組織細(xì)胞等標(biāo)本進(jìn)行檢驗，以反應(yīng)機(jī)體正常生理現(xiàn)象和病理改變。

標(biāo)本采集臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第4頁

標(biāo)本采集標(biāo)本采集正確是否與檢驗結(jié)果準(zhǔn)確性有親密關(guān)系所以，我們應(yīng)掌握正確標(biāo)本采集方法。臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第5頁幫助明確疾病診療推測病程進(jìn)展

制訂治療辦法觀察病情標(biāo)本采集的意義臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第6頁

遵照醫(yī)囑充分準(zhǔn)備

嚴(yán)格查對

正確采集

及時送檢標(biāo)本采集的原則臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第7頁一、按醫(yī)囑采集標(biāo)本醫(yī)生填寫檢驗申請單檢驗單應(yīng)標(biāo)明姓名、性別、住院號、床號、標(biāo)本種類、檢驗?zāi)繕?biāo)和送檢日期等。臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第8頁二、評定(充分準(zhǔn)備、嚴(yán)格查對)Ⅰ采集標(biāo)本前應(yīng)先評定患者病情、心理反應(yīng)與合作程度。Ⅱ依據(jù)檢驗?zāi)繕?biāo)選擇對應(yīng)標(biāo)本容器Ⅲ在容器外貼上檢驗單副聯(lián)臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第9頁二、評定(充分準(zhǔn)備、嚴(yán)格查對)Ⅳ向患者解釋采集標(biāo)本目標(biāo)方法、以消除顧慮，取得合作。Ⅴ采集時認(rèn)真查對床號、姓名、檢驗項目等臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第10頁三、掌握正確標(biāo)本采集方法

為確保標(biāo)本質(zhì)量，取得陽性結(jié)果，應(yīng)掌握正確標(biāo)本采集方法、采集量和采集時間并應(yīng)及時送檢，特殊標(biāo)本還需注明采集時間。臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第11頁四、及時送檢采集標(biāo)本后應(yīng)及時送檢，普通情況下，用于細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本保留時間不應(yīng)超出24h，最好2h內(nèi)能送檢，越快越好，以確保結(jié)果準(zhǔn)確性。臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第12頁標(biāo)本運輸標(biāo)準(zhǔn)①全部標(biāo)本都必須馬上送往試驗室，最好在2h內(nèi),保留時間不應(yīng)超出24h.②最正確臨床標(biāo)本送檢首先取決于所獲取標(biāo)本量.量少標(biāo)本應(yīng)在采集后15-30min內(nèi)送檢.③對環(huán)境敏感微生物如志賀菌、奈瑟氏菌和流感嗜血桿菌（對低溫敏感）應(yīng)馬上處理，禁止冷藏脊髓液和生殖道、眼部、內(nèi)耳道標(biāo)本。臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第13頁標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)無標(biāo)簽不檢測，并與送檢醫(yī)生和護(hù)士聯(lián)絡(luò)。送檢延誤

不接收，提醒送檢者，要求重新采集。送檢容器不妥或滲漏不接收，通知送檢者，要求重新采集。臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第14頁標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)本不符合要求

不接收，聯(lián)絡(luò)送檢者，指出不符合要求之處，要求重新采集符合試驗要求標(biāo)本.同一天內(nèi)收到同一檢測目標(biāo)相同標(biāo)本（血液標(biāo)本除外）不檢測，與送檢者聯(lián)絡(luò)并說明標(biāo)本重復(fù)不予處理，并在匯報單上注明臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第15頁標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)制訂目標(biāo)我們必須重視標(biāo)本質(zhì)量，對不規(guī)范采集、保留和運輸標(biāo)本要采取糾正辦法。假如檢測不合格標(biāo)本，那么得出結(jié)果會給醫(yī)生提供錯誤信息，造成誤診和治療不妥。所以，試驗室必須制訂并嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)本接收和拒收準(zhǔn)則

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第16頁臨床常見標(biāo)本血液（生化、免疫及微生物檢驗）尿液糞便痰及上呼吸道標(biāo)本穿刺液標(biāo)本（腦脊液、膽汁、胸腹水等）膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本生殖道標(biāo)本組織標(biāo)本臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第17頁血標(biāo)本檢驗意義血液是臨床最常見檢驗項目它能夠反應(yīng)血液系統(tǒng)本身病變還可判斷病人病情進(jìn)展程度為治療疾病提供參考。臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第18頁血標(biāo)本采集方法（一）靜脈血標(biāo)本（最慣用）（二）動脈血標(biāo)本(血氣分析)（三）毛細(xì)血管標(biāo)本（血常規(guī)）臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第19頁靜脈血標(biāo)本分類及目標(biāo)全血標(biāo)本血清標(biāo)本血培養(yǎng)標(biāo)本血沉、血常規(guī)、凝血機(jī)制檢測等血清酶、脂類、電解質(zhì)、肝功效血中致病菌臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第20頁靜脈血采集操作步驟及關(guān)鍵點

攜用物至床邊，查對床號、姓名、解釋戴手套，選擇靜脈，常規(guī)系止血帶、消毒皮膚，囑患者握拳行靜脈穿刺、取血、松止血帶、囑患者松拳、按壓針眼、快速拔針穿刺點按壓2～3min臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第21頁血液注入標(biāo)本瓶內(nèi)方法血清標(biāo)本：

取下針頭，將血液順試管壁遲緩注入干燥試管（最慣用）內(nèi)。

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第22頁

注入血標(biāo)本方法臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第23頁注意事項（1）禁止在輸液、輸血針頭處抽取標(biāo)本，以免影響檢驗結(jié)果。（最好在對側(cè)采集）臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第24頁注意事項（2）若同時抽取幾個項目標(biāo)血標(biāo)本，普通注入容器次序為：血培養(yǎng)瓶→抗凝瓶→干燥試管.動作要快速準(zhǔn)確，防止溶血。臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第25頁血標(biāo)本微生物學(xué)檢驗1.采血時間及次數(shù)：普通應(yīng)在抗生素治療前，發(fā)燒早期或高峰時抽血。傷寒患者應(yīng)在發(fā)燒1-2周內(nèi)抽血化膿性腦膜炎、鼠疫或野兔熱患者應(yīng)在發(fā)燒1-2d內(nèi)抽血急性敗血癥應(yīng)在24小時內(nèi)抽血3次或更屢次，并可在不一樣部位，如左、右手臂或頸部

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第26頁采血時間及次數(shù)不明原因發(fā)燒應(yīng)不定時屢次、多部位采樣送檢。24小時內(nèi)不超出3次，如培養(yǎng)陰性應(yīng)繼續(xù)采樣送檢

急性心內(nèi)膜炎應(yīng)在治療前1-2小時內(nèi)分別在3個不一樣部位抽血，分別進(jìn)行培養(yǎng)。亞急性心內(nèi)膜炎及布魯菌感染患者，除在發(fā)燒采血外，并要屢次抽血（24h內(nèi)3-4次）和增加抽血量（可增至10ml）。

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第27頁血標(biāo)本2.抽血部位及抽血量

以無菌方法從患者肘靜脈采血。采血量以培養(yǎng)基1/5~1/10為宜，成人一次采血5-10ml，兒童3-5ml，嬰兒為1-2ml。血液抽出后，馬上以無菌手續(xù)注入血培養(yǎng)瓶，充分混合后送檢。臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第28頁骨髓標(biāo)本微生物學(xué)檢驗

采集部位：骨髓穿刺法從髂骨采集標(biāo)本。

采集時間：在用藥前、發(fā)燒早期或高熱期

當(dāng)骨髓炎時或長久使用抗菌藥品患者，抽取骨髓培養(yǎng)陽性率遠(yuǎn)高于血液培養(yǎng)

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第29頁全自動血培養(yǎng)儀BacT/Alert120臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第30頁培養(yǎng)基選擇：

普通需氧培養(yǎng)瓶：采血量4ml,用于未使用抗菌素患者需氧培養(yǎng)。主要用于小兒。

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第31頁建議不論患者是否使用過抗生素，是做細(xì)菌培養(yǎng)還是真菌培養(yǎng)成人采血量5ml小兒

采血量4ml臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第32頁注意事項

①嚴(yán)格做好患者抽血部位無菌操作。禁止在輸液、輸血針頭處抽取標(biāo)本，以免影響檢驗結(jié)果（要在對側(cè)采集）。②注入標(biāo)本后血培養(yǎng)瓶務(wù)必馬上送至臨床細(xì)菌室，如因某種原因不能馬上送檢時，應(yīng)將已接種樣本培養(yǎng)瓶放在室溫，切勿放冰箱存放。

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第33頁注意事項③每次領(lǐng)培養(yǎng)瓶不宜過多，以防過期，未使用培養(yǎng)瓶亦應(yīng)室溫保留（15-30℃），切勿放冰箱保留。臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第34頁

二、尿液標(biāo)本采集

留取尿液標(biāo)本作物理、化學(xué)、細(xì)菌和顯微鏡等檢驗以助診療和觀察療效。臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第35頁尿液標(biāo)本采集時間：

普通標(biāo)準(zhǔn)

通常應(yīng)采集晨起第一次尿液送檢。標(biāo)準(zhǔn)上應(yīng)選擇在抗菌藥品應(yīng)用之前采集尿液。臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第36頁尿液標(biāo)本采集時間結(jié)核分枝桿菌感染

留取晨尿或24小時尿沉渣部分10-15ml作涂片檢驗，若為培養(yǎng)，患者應(yīng)停藥1-2天后再采樣，以提升陽性率

沙門菌、鉤端螺旋體感染

感染后2周左右采集

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第37頁采集方法

中段尿采集方法（最慣用）集尿法結(jié)核分枝桿菌檢驗時，可用一清潔容器，留24小時尿取其沉渣10-15ml送檢導(dǎo)尿法、腎盂尿采集法、膀胱穿刺采集法臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第38頁中段尿采集方法

女性：成年女性外陰部先以肥皂水清洗，再以無菌水沖洗，然后排尿棄去前段尿，留取中段尿10ml左右于無菌試管內(nèi)送檢

男性：先用肥皂水清洗尿道口，后用清水沖洗，留取中段尿

兒童、嬰兒：先以無菌生理鹽水清洗外陰部或外生殖器，將無菌試管對準(zhǔn)尿道口，待尿排出后送檢

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第39頁注意事項

嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，因為尿液標(biāo)本采集和培養(yǎng)中最大問題是污染雜菌

通常應(yīng)取晨起第一次尿液送檢

多數(shù)藥品均經(jīng)過尿液排泄，所以采集尿液應(yīng)在用藥前進(jìn)行

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第40頁三、糞便標(biāo)本采集搜集糞便標(biāo)本，做試驗室檢驗，有利于評定病人排泄功效及準(zhǔn)確評定疾病。臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第41頁糞便標(biāo)本采集時間：

1．采樣標(biāo)準(zhǔn)

腹瀉病人應(yīng)在急性期采集（3天以內(nèi)），以提升檢出率，亦最好在用藥之前。2．沙門菌感染

腸熱癥在2周以后；胃腸炎病人在急性期，早期采集新鮮糞便

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第42頁采集方法

自然排便采集法

自然排便后，挑取其膿血、粘液部分2-3g，液狀糞便取絮狀物2-3ml，盛于滅菌容器內(nèi)或保留液中送檢

直腸拭子方法

如不易取得糞便時，或排泄困難患者及嬰兒，可用直腸拭子采取，即以無菌棉拭子用生理鹽水濕潤后，插入肛門內(nèi)4-5cm（幼兒2-3cm）輕輕轉(zhuǎn)動取出，插入無菌試管內(nèi)送檢。臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第43頁注意事項

雖糞便含有各種雜菌，但應(yīng)盡可能采取無菌容器（一次性無菌平皿）。

為提升檢出率，要采集新鮮糞便作培養(yǎng)，且應(yīng)挑取其膿血、粘液部分。

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第44頁四、痰及上呼吸道標(biāo)本采集采集痰標(biāo)本作細(xì)菌培養(yǎng)，或涂片后經(jīng)特殊染色以檢驗細(xì)菌、真菌或抗酸桿菌等，以助診療；從咽部及扁桃體采取分泌物作細(xì)菌培養(yǎng)或病毒分離臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第45頁痰及上呼吸道標(biāo)本

采集時間:痰：普通以晨痰為好；支氣管擴(kuò)張癥患者，清晨起床后進(jìn)行體位引流，可采集大量痰標(biāo)本。咽拭標(biāo)本：時間上雖無嚴(yán)格限制，但應(yīng)于抗菌藥品治療前為好。咽部又是呼吸和食物通路，所以亦以晨起后采集為宜

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第46頁采集方法：

痰液標(biāo)本：

自然咳痰法：患者清晨起床后，先用朵貝爾氏液（復(fù)方硼砂溶液）漱口，再以開水或生理鹽水漱口，以降低口腔常居菌群污染，然后用力自氣管深部咳出第一口痰于無菌痰懷內(nèi)送檢

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第47頁采集方法：小兒取痰法：用壓舌板向后壓舌，用棉拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上，送檢

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第48頁采集方法：

上呼吸道標(biāo)本（咽拭子）

采集上呼吸道標(biāo)本通常采取無菌棉拭子。采集前患者應(yīng)用開水或生理鹽水重復(fù)漱口，由檢驗者將舌向外拉，使腭垂盡可能向外牽引，將棉拭子經(jīng)過舌根到咽后壁或腭垂后側(cè)，涂抹數(shù)次，但拭子要防止接觸口腔和舌粘膜

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第49頁注意事項：

1．

采集標(biāo)本以清晨為佳，以降低口腔正常菌群污染，采集前先用漱口液充分漱口。2．

做結(jié)核分枝桿菌和真菌培養(yǎng)標(biāo)本若不能及時送檢，應(yīng)放4℃冰箱保留，以免雜菌生長。（血培養(yǎng)瓶室溫）3．

作結(jié)核分枝桿菌檢驗，痰量要多或留取24小時痰液，以提升陽性檢出率。臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第50頁穿刺液標(biāo)本

腦脊液

采集時間：

懷疑為腦膜炎病人，應(yīng)馬上采集腦脊液，最好在用藥前采集

采集方法：用腰穿方法采集腦脊液3-5ml，普通放入3個無菌試管，每個試管1-2ml.假如用于檢測細(xì)菌或病毒，應(yīng)≥1ml，假如用于檢測真菌或抗酸桿菌，應(yīng)≥2ml臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第51頁注意事項：

①假如用于檢測細(xì)菌，搜集腦脊液后，最好能在常溫下15-30分鐘內(nèi)接種培養(yǎng)皿。腦脊液標(biāo)本不可置冰箱保留，不然會使病原菌死亡，尤其是腦膜炎奈瑟菌（能產(chǎn)生自溶素快速自溶）、肺炎鏈球菌和嗜血桿菌。臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第52頁注意事項：②假如只采集了一管腦脊液，應(yīng)先送細(xì)菌室做細(xì)菌培養(yǎng)，再做腦脊液生化、常規(guī)等檢驗③腰穿時應(yīng)嚴(yán)格無菌操作

④不需要加入防腐劑

⑤作腦脊液培養(yǎng)時，提議同時作血培養(yǎng)

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第53頁穿刺液標(biāo)本其它穿刺液（胸腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜液等）

采集時間：當(dāng)懷疑感染存在，應(yīng)盡早采集標(biāo)本，普通在患者使用抗菌藥品之前或停頓用藥后1-2日采集

采集方法：采取無菌方法用注射器抽取體內(nèi)可疑感染部位液體，注入無菌試管馬上送檢

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第54頁注意事項：

①普通要求常溫下15-30分鐘內(nèi)接種培養(yǎng)皿，尤其是腦脊液和心包液；除了做結(jié)核桿菌、真菌培養(yǎng)標(biāo)本應(yīng)在4℃下保留外，做其它項目標(biāo)應(yīng)常溫保留。

②嚴(yán)格無菌穿刺。臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第55頁注意事項：③為了預(yù)防穿刺液凝固，最好在無菌試管中預(yù)先加入滅菌肝素，再注入穿刺液④盡可能采集更多液體，最少1ml臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第56頁膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本

采集方法：

①開放性膿腫和膿性分泌物

先以無菌鹽水沖洗潰瘍表面，用2支無菌棉拭子拭取潰瘍深處分泌物后插入無菌試管送檢。一支為涂片檢驗用，另一支作培養(yǎng)用

臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢第57頁采集方法：

大面積燒傷創(chuàng)面分泌物

用無菌棉拭子取多部位創(chuàng)面膿