動(dòng)物基因工程

動(dòng)物基因工程第1頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

動(dòng)物基因工程是利用DNA重組技術(shù)對(duì)動(dòng)物所進(jìn)行的工程操作。從遺傳學(xué)角度分為：遺傳性動(dòng)物基因工程：外源基因能夠通過(guò)配子進(jìn)行垂直傳遞并穩(wěn)定的遺傳。非遺傳性動(dòng)物基因工程：轉(zhuǎn)基因僅在當(dāng)代表現(xiàn)，不能夠遺傳給子代。第2頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一第一節(jié)動(dòng)物基因工程的發(fā)展?fàn)顩r與趨勢(shì)動(dòng)物基因工程的實(shí)質(zhì)是改變動(dòng)物的遺傳組成，增加動(dòng)物的遺傳多樣性，賦予轉(zhuǎn)基因動(dòng)物新的表型特征，使能夠更好地服務(wù)與人類社會(huì)。第3頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一第4頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一世界首只轉(zhuǎn)基因靈長(zhǎng)類動(dòng)物

——-安迪世界第一只轉(zhuǎn)基因動(dòng)物第5頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一第6頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一HBV轉(zhuǎn)基因動(dòng)物樹(shù)鼩第7頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

從轉(zhuǎn)基因的技術(shù)手段來(lái)看，除DNA顯微注射法外，人們先后試過(guò)反轉(zhuǎn)錄病毒載體介導(dǎo)法、精子介導(dǎo)法、胚胎干細(xì)胞介導(dǎo)法和核移植法等多種轉(zhuǎn)基因方法。

轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的核移植技術(shù)已經(jīng)成為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)的主流方法。1、從簡(jiǎn)單的顯微注射法向高效率的轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞核移植方向發(fā)展

第8頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

轉(zhuǎn)基因在基因組中的存在方式有兩種，即隨機(jī)整合和定點(diǎn)整合。為了達(dá)到外源基因的高效表達(dá)，在轉(zhuǎn)基因結(jié)構(gòu)上增加了含有位點(diǎn)控制區(qū)（LCR）、核基質(zhì)附著區(qū)(MAR)等調(diào)控元件，可以實(shí)現(xiàn)插入位點(diǎn)非依賴性、拷貝數(shù)相關(guān)的表達(dá)模式。LCR和MAR的功能不受種屬差異的限制，無(wú)論外源基因插入什么位點(diǎn)，都能夠維持一個(gè)開(kāi)放的染色體結(jié)構(gòu)，有利于基因的表達(dá)?；虼虬屑夹g(shù)的出現(xiàn)與發(fā)展，實(shí)現(xiàn)了對(duì)目的基因的定位操作。2、從外源基因隨機(jī)插入（或整合）到定點(diǎn)整合的轉(zhuǎn)變

第9頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

從轉(zhuǎn)基因的策略來(lái)看，動(dòng)物轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展經(jīng)歷了兩個(gè)階段：第一階段為傳統(tǒng)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物階段，第二階段為條件性轉(zhuǎn)基因動(dòng)物階段。借助轉(zhuǎn)基因技術(shù)可將單一的功能基因和基因簇引入高等動(dòng)物的基因組，或?qū)⒛康幕驈膭?dòng)物基因組中敲除，實(shí)現(xiàn)了種系內(nèi)和種系間基因轉(zhuǎn)移或修飾，產(chǎn)生新的基因型和表型。目前轉(zhuǎn)基因動(dòng)物主要應(yīng)用在生物學(xué)基礎(chǔ)研究、醫(yī)學(xué)疾病模型、動(dòng)物生物反應(yīng)器、異種器官移植、動(dòng)物遺傳改良等５個(gè)方面。３、從傳統(tǒng)轉(zhuǎn)基因到條件控制的轉(zhuǎn)變第10頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

第二節(jié)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物技術(shù)一、動(dòng)物基因工程載體二、基因轉(zhuǎn)移技術(shù)第11頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一一、動(dòng)物基因工程載體作為動(dòng)物基因工程載體必須具備以下幾個(gè)功能：

為外源基因提供進(jìn)入受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力為外源基因提供在受體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制或整合的能力為外源基因提供在受體細(xì)胞內(nèi)的擴(kuò)增和表達(dá)能力第12頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一動(dòng)物基因工程載體質(zhì)粒型表達(dá)載體病毒載體定向打靶載體第13頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一1.質(zhì)粒型表達(dá)載體表達(dá)載體的共同特點(diǎn)是都帶有原核復(fù)制區(qū)和選擇性標(biāo)記基因，保證重組DNA分子能夠在大腸桿菌中擴(kuò)增，同時(shí)也必須包括能在真核細(xì)胞表達(dá)的相關(guān)組件。一般包括轉(zhuǎn)錄外源DNA序列的啟動(dòng)元件、轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物有效地加上poly（A）尾巴所必需的信號(hào)序列、真核細(xì)胞中的選擇性標(biāo)記，另外還增加了一些附加元件，如增強(qiáng)子、內(nèi)含子、剪接供體與受點(diǎn)，以保證外源基因的高效表達(dá)。第14頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一以山羊乳腺特性表達(dá)載體pBC1為例第15頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一2.病毒載體作為基因轉(zhuǎn)移的病毒載體須具備以下基本條件：攜帶外源基因并能夠包裝成病毒顆粒介導(dǎo)外源基因的轉(zhuǎn)移與表達(dá)對(duì)機(jī)體不致病第16頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一（1）腺病毒（adenovirus）

腺病毒作為轉(zhuǎn)染載體有許多特點(diǎn)：基因組的重排率低外源基因與病毒DNA重組后能遺傳幾個(gè)周期安全性好，不會(huì)整合到人的染色體上，不導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生宿主范圍廣，對(duì)受體細(xì)胞是否處于分裂期要求不高外源基因在載體上容易高效表達(dá)第17頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一（2）腺相關(guān)病毒（adeno-associatedvirus,AAV）腺相關(guān)病毒是一種天然復(fù)制缺陷型非致病性單鏈DNA病毒，其復(fù)制需要有輔助病毒的共轉(zhuǎn)染。無(wú)共轉(zhuǎn)染時(shí)，野生型AAV優(yōu)先（70%）整合在人染色體的19q13.3位點(diǎn)處，潛伏存在直至被輔助病毒拯救出來(lái)。其整合需要基因組兩端的ITR，以及非結(jié)構(gòu)基因編碼的蛋白R(shí)ep78和Rep68的存在。

第18頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一AAV具有以下幾個(gè)方面特點(diǎn)：非致病性、無(wú)免疫原性和無(wú)炎癥反應(yīng)能感染靜止期的細(xì)胞，如神經(jīng)元細(xì)胞插入的外源基因表達(dá)時(shí)間長(zhǎng)，一般能夠達(dá)到1年之多宿主范圍廣熱穩(wěn)定性強(qiáng)，容易通過(guò)滅活輔助腺病毒純化第19頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一（3）反轉(zhuǎn)錄病毒反轉(zhuǎn)錄病毒是一種整合型單鏈RNA病毒，感染宿主細(xì)胞后，病毒顆粒中的pol基因表達(dá)出反轉(zhuǎn)錄酶，以單鏈的RNA基因組為模板，立即轉(zhuǎn)錄出一份線形雙鏈DNA復(fù)本，然后在整合酶（Int）介導(dǎo)下，整合到宿主的基因組內(nèi)，此時(shí)整和的病毒序列被稱為前病毒。反轉(zhuǎn)錄病毒基因組整合到宿主細(xì)胞基因組后，其DNA隨宿主DNA的復(fù)制而復(fù)制，并由5`-LTR中的一個(gè)強(qiáng)啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄出病毒RNA鏈，它既是病毒基因組，同時(shí)又具有mRNA模板活性，翻譯出結(jié)構(gòu)蛋白和反轉(zhuǎn)錄酶。在宿主細(xì)胞質(zhì)中，兩條相同的RNA鏈和反轉(zhuǎn)錄酶被包裝與內(nèi)殼中，形成的成熟病毒顆粒以芽植方式分泌至細(xì)胞外，但通常不致死宿主細(xì)胞。第20頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一3.定向打靶載體基因打靶是通過(guò)外源基因與靶細(xì)胞染色體上的同源序列間的同源重組，將外源基因定點(diǎn)整合到靶細(xì)胞特定位置上，而使某一個(gè)特定位點(diǎn)上的基因發(fā)生定點(diǎn)突變的技術(shù)。在細(xì)胞內(nèi)存在兩條相同的DNA鏈（同源染色體），在細(xì)胞內(nèi)酶的作用下，可以將其切開(kāi)，發(fā)生交叉，然后重新連接，從而發(fā)生DNA鏈的交換并引發(fā)重組。第21頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一（1）基因敲除敲除型載體由兩段與基因組內(nèi)靶基因座序列同源的DNA片段（又稱同源臂）組成，中間為正向選擇標(biāo)記，同緣臂外側(cè)為真核細(xì)胞中的負(fù)選擇標(biāo)記及在原核細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制與篩選的載體DNA序列。第22頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一（2）基因敲入基因敲入是利用同源重組原理將外源基因插入到染色體的特定位點(diǎn)上?；蚯萌氲霓D(zhuǎn)基因結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)上相似于基因敲除結(jié)構(gòu)，但區(qū)別在于：

或用外源基因替換并失活靶基因或在不影響拔基因功能的前提下插入新的基因或在染色體上特定位點(diǎn)插入新的外源基因，從而實(shí)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)移，并使得外源基因高效表達(dá)第23頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一（3）基因下調(diào)（knock-down）

RNA干擾（RNAinterference，RNAi）又被稱為基因下調(diào)，通過(guò)干擾RNA（smallinterferencesiRNA）分子的作用達(dá)到轉(zhuǎn)錄后基因沉默的效應(yīng)。

siRNA的制備方法主要包括體外合成siRNA和siRNA表達(dá)載體兩種。體外合成的siRNA易轉(zhuǎn)染細(xì)胞，進(jìn)入細(xì)胞后，可直接發(fā)揮作用，一般不存在siRNA表達(dá)載體的轉(zhuǎn)錄效率低及細(xì)胞毒性等問(wèn)題。但是體外合成的siRNA只能瞬間干擾，不能達(dá)到長(zhǎng)久抑制病毒的效果。

第24頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一二、基因轉(zhuǎn)移技術(shù)

物理轉(zhuǎn)染法

化學(xué)轉(zhuǎn)染法

生物法第25頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一1.物理轉(zhuǎn)染法（1）電擊法（electroporation）其基本原理是在外加電場(chǎng)的作用下，細(xì)胞膜電位發(fā)生改變，細(xì)胞質(zhì)膜瞬間出現(xiàn)可逆性的電穿孔，從而使一定數(shù)量的外源DNA從細(xì)胞外擴(kuò)散到細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核內(nèi)，并進(jìn)一步整合到宿主DNA上，達(dá)到轉(zhuǎn)基因目的。第26頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一圖1.利用點(diǎn)穿孔法進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移第27頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一（2）顯微注射法

是將外源DNA在顯微鏡操作系統(tǒng)的輔助下，通過(guò)玻璃微管直接將外源DNA注入哺乳動(dòng)物受精卵的原核內(nèi)，使外源基因整合到基因組上，制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。第28頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一（3）基因槍法

基本原理是將要轉(zhuǎn)染的DNA吸附到高黏度的金屬（鈣或金等）顆粒上，在一種加速裝置的作用下，將這些粒子高速打入細(xì)胞或組織內(nèi)，達(dá)到轉(zhuǎn)基因目的第29頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一（4）超聲波法（sonoporation）

超聲波增強(qiáng)基因轉(zhuǎn)染法的主要機(jī)制是聲波的空化效應(yīng)導(dǎo)致細(xì)胞的通透性增高，而通過(guò)添加超生造影劑能降低空化域值，增強(qiáng)空化效應(yīng)，促進(jìn)外源基因進(jìn)入細(xì)胞，提高基因的轉(zhuǎn)染效果第30頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一2.化學(xué)轉(zhuǎn)染法（1）磷酸鈣法

將待轉(zhuǎn)染的DNA溶解在磷酸緩沖液中，加入CaCl2后，DNA片段與磷酸鈣共沉淀并形成大的顆粒；將此顆粒懸浮液加入貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞中，外源DNA就被靶細(xì)胞所吸收，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因。 第31頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一圖2.利用磷酸鈣共沉淀法進(jìn)行DNA轉(zhuǎn)染第32頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一圖3.質(zhì)脂體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移（2）脂質(zhì)體法（lipofection）將待轉(zhuǎn)染的DNA溶液與磷脂混合，后者在表面活性劑存在下形成包埋水相DNA的脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)。當(dāng)這種脂質(zhì)體懸液加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，便會(huì)與受體細(xì)胞膜發(fā)生融合，DNA片段隨即進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核內(nèi)。第33頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一（3）原生質(zhì)體融合法

含有目的基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化細(xì)菌或酵母細(xì)胞。大量擴(kuò)增，利用溶菌酶或蝸牛酶去除胞壁部分，在高鹽條件下制成原生質(zhì)體，然后散鋪在單層培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞上，在融和劑（如聚乙二醇）作用下，使染色體或質(zhì)粒轉(zhuǎn)如細(xì)胞內(nèi)，實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因第34頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

構(gòu)建含有選擇性標(biāo)記的反轉(zhuǎn)錄病毒基因組部分DNA與質(zhì)粒的雜合型載體分子，在多克隆位點(diǎn)插入外源基因形成重組DNA分子，克隆到大腸桿菌中擴(kuò)增鑒定；重組DBA分子通過(guò)物理或化學(xué)方法轉(zhuǎn)入一個(gè)特制的病毒包裝細(xì)胞系。轉(zhuǎn)染入包裝細(xì)胞系的重組DNA轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的重組RNA分子，包裝細(xì)胞系分泌出來(lái)的重組反轉(zhuǎn)錄病毒，便可感染其他類型動(dòng)物受體細(xì)胞，重組RNA分子以DNA形式整合到染色體上，并表達(dá)外源基因。3.病毒感染法

第35頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

圖4逆轉(zhuǎn)錄病毒載體穩(wěn)定、長(zhǎng)期表達(dá)外源基因

原病毒DNA轉(zhuǎn)染進(jìn)包裝細(xì)胞中，包裝原病毒產(chǎn)生將病毒RNA包裝成感染性病毒粒子的所有蛋白質(zhì)，但卻不能包裝自身的RNA第36頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一第三節(jié)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的制備程序轉(zhuǎn)基因鑒定表達(dá)水平的檢測(cè)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物傳代與檢測(cè)第37頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一一轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的制備程序DNA顯微注射法制備轉(zhuǎn)基因小鼠胚胎干細(xì)胞法制備轉(zhuǎn)基因小鼠轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞核移植法生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因牛第38頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一1、DNA顯微注射法制備轉(zhuǎn)基因小鼠超數(shù)排卵

基因制備

胚胎移植顯微注射

轉(zhuǎn)基因個(gè)體的鑒定

第39頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一第40頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一顯微注射技術(shù)第41頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一2、胚胎干細(xì)胞法制備轉(zhuǎn)基因小鼠

胚胎干細(xì)胞是從早期胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中分離出的未分化、具有正常二倍體染色體和發(fā)育全能性的細(xì)胞。優(yōu)點(diǎn)：

可以在體外進(jìn)行人工培養(yǎng)、長(zhǎng)期擴(kuò)增、冷凍保存第42頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一胚胎干細(xì)胞制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物過(guò)程（1）轉(zhuǎn)基因胚胎干細(xì)胞的獲得（2）囊胚注射（3）嵌合體的檢測(cè)和育種

轉(zhuǎn)基因嵌合個(gè)體的制備目的是為了獲得轉(zhuǎn)基因后代第43頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一胚胎干細(xì)胞基因轉(zhuǎn)化法(引自G1ick&Pasternak，1998)第44頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一判斷是否是種系嵌合

首先用轉(zhuǎn)基因嵌合體的小鼠與正常的小鼠交配，對(duì)其后代進(jìn)行檢測(cè)，如果后代中有轉(zhuǎn)基因個(gè)體出現(xiàn)，證明為種系嵌合，然后將轉(zhuǎn)基因雜合子個(gè)體進(jìn)行橫交就會(huì)獲得轉(zhuǎn)基因純合子和雜合子個(gè)體。如果在后代中沒(méi)能發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因純合子，應(yīng)注意是否因?yàn)檗D(zhuǎn)基因的純合造成了胚胎的早期死亡，無(wú)法得到成活個(gè)體所致。第45頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一基因的準(zhǔn)備供體細(xì)胞獲取傳代培養(yǎng)、擴(kuò)增供體細(xì)胞的轉(zhuǎn)基因

轉(zhuǎn)基因供體細(xì)胞的篩選與擴(kuò)增卵母細(xì)胞的獲得體外成熟培養(yǎng)卵母細(xì)胞的去核核移植重構(gòu)胚體外培養(yǎng)胚胎移植獲得轉(zhuǎn)基因個(gè)體3、轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞核移植法生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因牛第46頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一二轉(zhuǎn)基因鑒定標(biāo)記篩選法（1）正負(fù)選擇標(biāo)記篩選法（2）無(wú)啟動(dòng)子篩選法利用靶基因上的啟動(dòng)子來(lái)轉(zhuǎn)錄標(biāo)記基因的mRNA并翻譯出特定的蛋白質(zhì)，而達(dá)到篩選的目的。分子鑒定法（1）PCR擴(kuò)增（2）斑點(diǎn)雜交（3）Southern雜交（4）熒光原位雜交第47頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一三表達(dá)水平的檢測(cè)獲得高效表達(dá)、具有較強(qiáng)生物學(xué)活性的目的是蛋白是轉(zhuǎn)基因的主要目的之一。得到的目的蛋白的的形式：

表達(dá)于細(xì)胞內(nèi)，可通過(guò)對(duì)組織或細(xì)胞裂解獲??；分泌到細(xì)胞外，可通過(guò)酶學(xué)或免疫學(xué)方法進(jìn)行測(cè)定。第48頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一1、報(bào)告基因

報(bào)告基因是編碼容易檢測(cè)的蛋白質(zhì)的核苷酸序列，一般用以替換難于測(cè)定的蛋白質(zhì)基因，或制備融合蛋白，或利用IRES與目的蛋白形成一條mRNA序列，分別翻譯出兩種蛋白，來(lái)研究目的蛋白的功能及其表達(dá)特性。第49頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一2、Northern雜交可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物或轉(zhuǎn)染細(xì)胞是否轉(zhuǎn)錄出目的基因所對(duì)應(yīng)的mRNA3、反轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）是將由mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的cDNA第一鏈為模板進(jìn)行目的基因或片斷擴(kuò)增的PCR反應(yīng)。利用RT-PCR方法擴(kuò)增出目的基因的電泳條帶，以檢測(cè)目的基因是否表達(dá)。第50頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一4、聚丙烯酰胺凝膠電泳分析靶組織或轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的總蛋白，依據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)判定是否有目的蛋白條帶出現(xiàn)，進(jìn)而判定外源基因的表達(dá)情況，同時(shí)可以初步判定目的蛋白的表達(dá)水平。5、Western雜交

可用來(lái)檢測(cè)混合蛋白質(zhì)樣品中是否存在目的蛋白，最小檢出量為1ng。6、目的蛋白的生物活性

應(yīng)選擇相應(yīng)的生物學(xué)測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定。當(dāng)產(chǎn)品生物學(xué)活性較天然蛋白活性低時(shí)，應(yīng)當(dāng)對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)合的功能分子集團(tuán)進(jìn)行研究。第51頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一四轉(zhuǎn)基因動(dòng)物傳代與檢測(cè)判斷是否生產(chǎn)出轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的重要標(biāo)準(zhǔn)是檢查外源基因是否整合到動(dòng)物的生殖系統(tǒng)中，即是否能夠穩(wěn)定遺傳。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物傳代常用常規(guī)繁殖方法進(jìn)行，如有必要，也可采用特殊的方法。一般用轉(zhuǎn)基因檢測(cè)陽(yáng)性動(dòng)物與已知的非轉(zhuǎn)基因動(dòng)物交配，這樣做可以較好的度量被整合的外源基因的傳遞規(guī)律。

第52頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一第四節(jié)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的應(yīng)用與未來(lái)一、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的應(yīng)用二、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的生物安全性三.動(dòng)物轉(zhuǎn)基因的未來(lái)第53頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一一、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的應(yīng)用

提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能（1）改良畜禽生產(chǎn)性狀

在轉(zhuǎn)基因“碩鼠”的啟發(fā)下，人們?cè)噲D通過(guò)外源基因的導(dǎo)入提高畜禽產(chǎn)品產(chǎn)量，加快生長(zhǎng)速度，減少飼料消耗和改良產(chǎn)品品質(zhì)。（2）提高畜禽抗病力

傳染病的流行以及動(dòng)物源性人畜共患病的爆發(fā)，已對(duì)畜牧生產(chǎn)和人類生活產(chǎn)生了巨大的影響。第54頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一轉(zhuǎn)基因“碩鼠”（右）第55頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一轉(zhuǎn)基因魚(yú)轉(zhuǎn)基因牛轉(zhuǎn)基因豬第56頁(yè)，共63頁(yè)，2023年，2月20日，星期一2.動(dòng)物生物反應(yīng)器

轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的出現(xiàn)引導(dǎo)人們?cè)噲D把轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作為一種生物反映器，生產(chǎn)