艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范HIV抗體檢測章節(jié)月

（優(yōu)選）艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范年版HIV抗體檢測章節(jié)年月目前一頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點HIV抗體檢測HIV抗體檢測的目的HIV抗體檢測可用于監(jiān)測、診斷、血液篩查：目前二頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點以監(jiān)測為目的的檢測是為了解不同人群HIV感染率及其變化趨勢，包括各類高危人群、重點人群和一般人群。以診斷為目的的檢測是為了確定個體HIV感染狀況，包括臨床檢測、自愿咨詢檢測、術(shù)前檢測、根據(jù)特殊需要進行的體檢等。以血液篩查為目的的檢測是為了防止輸血傳播HIV，包括獻血員篩查和原料血漿篩查。HIV抗體檢測的目的目前三頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點1、根據(jù)目的選擇檢測方法及檢測策略。2、嚴格遵守實驗室SOP。3、篩查試驗陽性，須作確證實驗。4、篩查試驗陰性，不應(yīng)做確證實驗。5、篩查及確證試驗陽性均應(yīng)做好咨詢工作。HIV抗體檢測的要點目前四頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點以診斷為目的的檢測策略常規(guī)HIV抗體檢測分為篩查試驗（包括初篩和復(fù)檢）和確證試驗?zāi)壳拔屙揬總數(shù)三十四頁\編于十八點篩查試劑必須是經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準、在有效期內(nèi)的試劑，其中酶聯(lián)免疫試劑應(yīng)批批檢合格。推薦使用臨床質(zhì)量評估敏感性和特異性高的試劑。目前六頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點篩查樣品HIV抗體篩查可采用血清、血漿、濾紙干血斑、唾液和尿液樣品。目前七頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點篩查方法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗快速檢測（RT）及其它檢測試驗明膠顆粒凝集試驗(PA)免疫滲濾試驗免疫層析試驗?zāi)壳鞍隧揬總數(shù)三十四頁\編于十八點(1)酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）可使用血液、唾液、尿液樣品，ELISA多為單純HIV抗體檢測試劑。HIV抗原抗體聯(lián)合檢測試劑可同時檢測血液中HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗體。HIV抗原或抗體包被于固相載體，加入待檢樣品和酶標記的HIV抗原或抗體，加底物顯色，用酶標儀測定結(jié)果。有效試驗的陰性和陽性對照必須符合試劑盒規(guī)定。目前九頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）優(yōu)點：準確性高、價格低廉、判斷結(jié)果標準客觀、結(jié)果便于記錄和保存用途：流行病學(xué)監(jiān)測及臨床大量標本的檢測目前十頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點(2)化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗采用發(fā)光或熒光底物，既可檢測抗體，也可聯(lián)合檢測抗原抗體。HIV抗原或抗體包被于固相載體，加入待檢樣品和酶或熒光標記的HIV抗原或抗體，加發(fā)光或熒光底物，用發(fā)光或熒光儀測定結(jié)果。有效試驗的陰性和陽性對照必須符合試劑盒規(guī)定。

目前十一頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點(3)快速檢測（RT）及其它檢測試驗明膠顆粒凝集試驗（PA）：是HIV血清抗體檢測的一種簡便方法。將HIV抗原致敏明膠顆粒作為載體，與待檢樣品作用。當待檢樣品含有HIV抗體時，明膠顆粒與抗體發(fā)生凝集反應(yīng)，根據(jù)凝集情況判讀結(jié)果。PA試劑有兩種：同時檢測HIV-1和HIV-2抗體以及分別檢測HIV-1和HIV-2抗體。有效試驗必須有陰性和陽性質(zhì)控。免疫滲濾試驗：斑點ELISA和斑點免疫膠體金（或膠體硒）快速試驗：均以硝酸纖維膜為載體，HIV抗原點狀固定在膜上，加待檢樣品。陽性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色斑點。反應(yīng)時間在10分鐘以內(nèi)。有效試驗的質(zhì)控點必須顯色。免疫層析試驗：以硝酸纖維膜為載體，HIV抗原線狀固定在膜上，待檢樣品（血液或唾液）沿著固相載體遷移，陽性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色條帶。有效試驗的質(zhì)控帶必須顯色。目前十二頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點優(yōu)點:試驗簡便快速，不需專門設(shè)備和人員培訓(xùn),適用于應(yīng)急檢測、門診急診檢測。一般可在10～30分鐘內(nèi)得出結(jié)果。缺點:肉眼判斷較主觀、價格較貴、結(jié)果不易保存。目前十三頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點全血樣品加50ul樣品于樣品墊中手指血方法靜脈血方法加一滴緩沖液15分鐘內(nèi)讀取結(jié)果硒標法圖示目前十四頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點篩查程序初篩試驗根據(jù)檢測目的選用符合要求的篩查試劑對樣品進行初篩檢測，對呈陰性反應(yīng)的樣品，可出具HIV抗體陰性（-）報告；對呈陽性反應(yīng)的樣品，需要進一步做復(fù)檢試驗和確證試驗。目前十五頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點篩查程序復(fù)檢試驗對初篩呈陽性反應(yīng)的樣品，應(yīng)使用原有試劑和另外一種不同原理（或廠家）的試劑，或另外兩種不同原理或不同廠家的試劑進行復(fù)檢試驗。如果初篩檢測使用抗原抗體聯(lián)合試劑，則復(fù)檢必須包括一種抗原抗體聯(lián)合試劑。如果抗原抗體聯(lián)合試劑檢測呈陽性反應(yīng)，而抗體試劑檢測為陰性反應(yīng)，則應(yīng)考慮進行HIV-1p24抗原或核酸檢測，必要時進行隨訪。

艾滋病檢測篩查實驗室復(fù)檢判定為陽性反應(yīng)的樣品，確證實驗室可以直接進行確證試驗。目前十六頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點樣品初篩試驗一陰一陽均陽性反應(yīng)報告陰性確證試驗復(fù)檢試驗報告陰性均陰性反應(yīng)陽性反應(yīng)原有試劑＋另一不同原理（或廠家）試劑或另外兩種不同原理（或廠家）試劑選用篩查試劑陰性反應(yīng)HIV抗體篩查檢測流程圖目前十七頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點篩查程序篩查試驗結(jié)果的報告HIV抗體初篩試驗用附表1進行報告，陰性反應(yīng)報告為“HIV抗體陰性（-）”；陽性反應(yīng)報告為“HIV抗體待復(fù)檢”。HIV抗體復(fù)檢試驗用附表2進行報告，兩次檢測均陽性或一陰一陽報告為“HIV抗體待確證”；兩次檢測均陰性報告為“HIV抗體陰性（-）”。目前十八頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點篩查程序篩查試驗呈陽性反應(yīng)樣品的轉(zhuǎn)送如需送上級實驗室進行復(fù)檢，需要核對身份，補充個人信息（如姓名和身份證號碼），必要時采集第二份血樣，持HIV抗體篩查報告，送當?shù)匕滩『Y查中心實驗室，或直接送確證實驗室復(fù)檢。HIV抗體復(fù)檢試驗用附表2進行報告，兩次檢測均陽性或一陰一陽報告為“HIV抗體待確證”；兩次檢測均陰性報告為“HIV抗體陰性（-）”。HIV抗體復(fù)檢報告需由1名檢驗人員和1名審核人員簽字。目前十九頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點目前二十頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點目前二十一頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點HIV抗體確證試驗確證試劑：必須是經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準、在有效期內(nèi)的試劑。確證樣品：可采用血清、血漿、濾紙干血斑確證方法：包括免疫印跡試驗(WB)、條帶免疫試驗(LIATEKHIVⅢ)、放射免疫沉淀試驗(RIPA)及免疫熒光試驗(IFA)。

國內(nèi)常用的確證試驗方法是WB。目前二十二頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點確證流程

使用HIV-1/2混合型試劑進行檢測，如果呈陰性反應(yīng)，則報告HIV抗體陰性（－）；如果呈陽性反應(yīng)，則報告HIV-1抗體陽性（＋）；如果不是陰性反應(yīng)，但又不滿足陽性判斷標準，則報告HIV抗體不確定（±）。結(jié)合流行病學(xué)資料，可以在4周后隨訪檢測，如帶型沒有進展或呈陰性反應(yīng)，則報告陰性；如隨訪期間出現(xiàn)陽性反應(yīng)，則報告陽性；如隨訪期間帶型有進展，但不滿足陽性標準，應(yīng)繼續(xù)隨訪到8周。8周后如帶型沒有進展或呈陰性反應(yīng)則報告陰性；滿足HIV抗體陽性診斷標準則報告陽性，不滿足陽性判斷標準可視情況決定是否繼續(xù)隨訪。隨訪期間可根據(jù)需要，檢測病毒核酸或P24抗原作為輔助診斷。如果出現(xiàn)HIV-2型的特異性指示條帶，根據(jù)實際情況需用HIV-2型免疫印跡試劑再做HIV-2的抗體確證試驗或HIV-2核酸檢測，以進一步明確HIV-2感染狀態(tài)，疑難樣品送國家艾滋病參比實驗室進一步分析。目前二十三頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點HIV抗體確證檢測流程圖確證試劑篩查試驗陽性反應(yīng)樣品根據(jù)具體情況進一步檢測HIV-2報告陰性出現(xiàn)HIV-2指示條帶陰性反應(yīng)不確定反應(yīng)報告HIV-1陽性HIV-1陽性反應(yīng)結(jié)合流行病學(xué)資料，可以在4周后隨訪檢測，如帶型沒有進展或呈陰性反應(yīng)，則報告陰性；如隨訪期間出現(xiàn)陽性反應(yīng)，則報告陽性；如隨訪期間帶型有進展，但不滿足陽性標準，應(yīng)繼續(xù)隨訪到8周。如帶型沒有進展或呈陰性反應(yīng)則報告陰性；滿足HIV抗體陽性診斷標準則報告陽性，不滿足陽性判斷標準可視情況決定是否繼續(xù)隨訪。目前二十四頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點HIV抗體確證試驗結(jié)果的判定注：①HIV-1抗體特異帶包括：env帶：gp160/gp120、gp41；gag帶：p55、p24、p17（或p18）；pol帶：p66（或p65）、p51、p31。②HIV-2抗體特異條帶包括：env帶：gp140/gp105、gp36；gag帶：p56、p26、p16；pol帶：p68、p53、p34。（由于使用的毒株不同，HIV-2env帶也可為gp125/gp80、gp36）。目前二十五頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點HIV抗體確證實驗結(jié)果a強陽性對照（HIV-1和HIV-2）b弱陽性對照（HIV-1）c陰性對照d典型的HIV-2血清陽性反應(yīng)abcdgp160gp120p66p55p51gp41p39p31P24p17血清對照HIV-2特異帶目前二十六頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點HIV抗體確證試驗結(jié)果的判定

（1）HIV-1抗體陽性同時符合以下2條標準可判為HIV-1抗體陽性：①至少有2條env帶（gp41和gp160/gp120）出現(xiàn)，或至少1條env帶和p24帶同時出現(xiàn)；②符合試劑盒提供的陽性判定標準。目前二十七頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點試劑盒提供的陽性判定標準是

2條env（

Gp160/gp41＋gp120）andpol（p66、p51、p31）

orgag（p55、p24、p17）

Gp160

＋

gp120

＋

p66/p51/p31/p55/p24/p17或

Gp41

＋

gp120

＋

p66/p51/p31/p55/p24/p17

Gp160

＋

gp120

＋

p24目前二十八頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點HIV抗體確證試驗結(jié)果的判定（2）HIV-2抗體陽性出現(xiàn)HIV-2型特異性指示帶的樣品：如果同時呈HIV-1抗體陽性反應(yīng)，報告HIV-1抗體陽性，不推薦進一步做HIV-2抗體確證試驗；如果同時呈HIV-1抗體不確定或陰性反應(yīng)，需用HIV-2型確證試劑再做HIV-2的抗體確證試驗。同時符合以下二條標準，即出現(xiàn)至少2條env帶（gp36和gp140/gp105），和試劑盒提供的陽性判定標準，可判為HIV-2抗體陽性。目前二十九頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點HIV抗體確證試驗結(jié)果的判定3）HIV抗體不確定出現(xiàn)HIV抗體特異帶，但不足以判定陽性。目前三十頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點（4）HIV抗體陰性無HIV抗體特異帶出現(xiàn)。HIV抗體確證試驗結(jié)果的判定目前三十一頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點HIV抗體確證試驗結(jié)果報告HIV抗體確證試驗結(jié)果用附表3報告。（1）符合HIV-1/HIV-2抗體陽性判斷標準，報告“HIV-1/HIV-2抗體陽性（＋）”，并按規(guī)定做好檢測后咨詢、保密和疫情報告工作。（2）符合HIV抗體陰性判斷標準，報告“HIV抗體陰性（－）”。如疑似“窗口期”感染，建議進一步做HIV核酸檢測，盡早明確診斷。（3）符合HIV抗體不確定判斷標準，報告“HIV抗體不確定（±）”，在備注中應(yīng)注明“4周后復(fù)檢”。目前三十二頁\總數(shù)三十四頁\編于十八點發(fā)出確證報告的同時要做好檢測后咨詢。HIV抗