高三生物x克隆技術(shù)

高三生物x克隆技術(shù)第1頁(yè)/共62頁(yè)最新考綱1．植物組織培養(yǎng)Ⅱ2．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和體細(xì)胞克?、?．動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體Ⅱ考綱解讀1．植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程及應(yīng)用2．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體的制備及應(yīng)用3．動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)與有毒物質(zhì)的檢測(cè)第2頁(yè)/共62頁(yè)知識(shí)點(diǎn)一植物組織培養(yǎng)技術(shù)答案：①無(wú)菌和人工控制②離體③愈傷組織④植物細(xì)胞的全能性⑤離體⑥愈傷組織⑦再分化

第3頁(yè)/共62頁(yè)看一看：在誘導(dǎo)愈傷組織分化時(shí)哪些物質(zhì)起作用？答案：植物激素在愈傷組織的分化中起重要作用，生長(zhǎng)素用于誘導(dǎo)細(xì)胞的分裂和根的分化。細(xì)胞分裂素是促進(jìn)細(xì)胞的分裂和不定芽的分化。第4頁(yè)/共62頁(yè)第5頁(yè)/共62頁(yè)第6頁(yè)/共62頁(yè)想一想：什么是人工種子？它有什么優(yōu)點(diǎn)？答案：①人工種子是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，包裝上人工薄膜制成。②它的優(yōu)點(diǎn)是可以保持優(yōu)良品種的遺傳特性，生產(chǎn)上也不受季節(jié)的限制。第7頁(yè)/共62頁(yè)議一議：如何通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)有毒物質(zhì)毒性的大??？答案：用含有一定濃度有毒物質(zhì)的細(xì)胞培養(yǎng)液和正常細(xì)胞培養(yǎng)液同時(shí)培養(yǎng)正常細(xì)胞，通過(guò)對(duì)照觀察變異細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)來(lái)確定其毒性強(qiáng)弱。第8頁(yè)/共62頁(yè)知識(shí)點(diǎn)二動(dòng)物克隆技術(shù)第9頁(yè)/共62頁(yè)第10頁(yè)/共62頁(yè)議一議：鼠的單克隆抗體能否用于人體疾病的治療？,答案：不能。因?yàn)樾∈蟮腂淋巴細(xì)胞所產(chǎn)生的抗體與人體B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的抗體是不同的。第11頁(yè)/共62頁(yè)1．如何區(qū)分植物的組織培養(yǎng)與動(dòng)物培養(yǎng)項(xiàng)目原理培養(yǎng)基結(jié)果培養(yǎng)目的過(guò)程植物組織培養(yǎng)細(xì)胞的全能性固體；營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素培養(yǎng)成植株快速繁殖無(wú)病毒植株等脫分化再分化動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖液體；營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、動(dòng)物血清等培養(yǎng)成細(xì)胞株或細(xì)胞系獲得細(xì)胞產(chǎn)物或細(xì)胞系原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)第12頁(yè)/共62頁(yè)2.克隆與組織培養(yǎng)、試管嬰兒克隆組織培養(yǎng)試管嬰兒生殖方式無(wú)性無(wú)性有性遺傳物質(zhì)來(lái)源2個(gè)親本1個(gè)親本2個(gè)親本性別決定提供核親本一般沒(méi)有精子類(lèi)型用途優(yōu)良種畜快速繁育，可選擇性別快速繁殖無(wú)病毒植株解決不孕不育第13頁(yè)/共62頁(yè)第14頁(yè)/共62頁(yè)在單克隆抗體的制備過(guò)程中，兩次篩選的目的不同(1)由于B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合方式有多種，因此第一次篩選的目的是選出雜交瘤細(xì)胞，淘汰掉未融合的或同種細(xì)胞融合的細(xì)胞。(2)由于從小鼠體內(nèi)提取的B淋巴細(xì)胞可能有多種，因此第一次篩選到的雜交瘤細(xì)胞可能有多種，通過(guò)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)進(jìn)行第二次篩選，以選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。第15頁(yè)/共62頁(yè)植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較

技術(shù)內(nèi)容項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞的增殖培養(yǎng)基成分礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物激素和有機(jī)添加劑(如甘氨酸、瓊脂等)，屬于固體培養(yǎng)基葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清等，屬于液體培養(yǎng)基第16頁(yè)/共62頁(yè)取材較幼嫩的細(xì)胞、組織、器官動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織培養(yǎng)過(guò)程第17頁(yè)/共62頁(yè)培養(yǎng)結(jié)果可以獲得植株，也可以獲得大量細(xì)胞只能獲得大量細(xì)胞，不能得到生物個(gè)體應(yīng)用①植物快速繁殖與脫毒植物培養(yǎng)②生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品③制造人工種子④用于轉(zhuǎn)基因植物的培育①生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品②培養(yǎng)皮膚移植的材料③檢測(cè)有毒物質(zhì)④用于生理、病理、藥理學(xué)的研究第18頁(yè)/共62頁(yè)相同點(diǎn)①都需人工條件下的無(wú)菌操作②都是合成培養(yǎng)基③都需適宜的溫度、pH等條件第19頁(yè)/共62頁(yè)提醒①植物組織培養(yǎng)需要生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，其中生長(zhǎng)素可誘導(dǎo)愈傷組織生根，細(xì)胞分裂素可促進(jìn)愈傷組織生芽。②在動(dòng)物細(xì)胞的傳代培養(yǎng)中，細(xì)胞可能癌變。③兩種技術(shù)手段培養(yǎng)過(guò)程中都進(jìn)行了有絲分裂，都是無(wú)性繁殖，都可稱(chēng)克隆，都不涉及減數(shù)分裂。④植物組織培養(yǎng)最終產(chǎn)生新個(gè)體，體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生大量細(xì)胞，不形成新個(gè)體，故不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性。第20頁(yè)/共62頁(yè)本考點(diǎn)多與基因工程綜合在一起考查，以非選擇題的形式進(jìn)行命題，近年高考單科試卷也多有涉及，也多與必修內(nèi)容綜合在一起考查。第21頁(yè)/共62頁(yè)【典例1】?(2011·江蘇)下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是(

)。A．愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞B．二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株C．用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子D．植物耐鹽突變體可通過(guò)添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得第22頁(yè)/共62頁(yè)解析本題考查植物細(xì)胞工程，同時(shí)考查綜合分析與遷移能力。愈傷組織細(xì)胞是一團(tuán)排列疏松而無(wú)規(guī)則，高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)的、具分生能力的薄壁細(xì)胞，不具有特定的結(jié)構(gòu)和功能。二倍體植株的花粉中只含一個(gè)染色體組，培養(yǎng)得到的個(gè)體為單倍體，高度不育，幼苗用秋水仙素處理后得到的植株才能穩(wěn)定遺傳。人工種子中包裹的不能是愈傷組織。用特定的選擇培養(yǎng)基可篩選出所需要的突變體類(lèi)型。答案D第23頁(yè)/共62頁(yè)【訓(xùn)練1】?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的重要區(qū)別在于(

)。A．培養(yǎng)基不同B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行C．動(dòng)物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能D．動(dòng)物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能解析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，其中通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。而植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，通常含有水、礦質(zhì)元素、激素、蔗糖、氨基酸、瓊脂等?？梢?jiàn)，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基是不相同的。答案A第24頁(yè)/共62頁(yè)植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合(單克隆抗體制備)理論基礎(chǔ)(原理)細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖融合前處理酶解法(纖維素酶、果膠酶)去除細(xì)胞壁注射特定抗原使正常小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)促融方法①物理法：離心、振動(dòng)、電刺激等；②生物法：滅活的病毒①物化法：與植物細(xì)胞融合相同；②化學(xué)法：聚乙二醇(PEG)第25頁(yè)/共62頁(yè)過(guò)程第一步原生質(zhì)體的制備(酶正常小鼠免疫處理解法)第二步原生質(zhì)體融合(物化法)動(dòng)物細(xì)胞融合第三步雜種細(xì)胞的篩選與培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的篩選與培養(yǎng)第四步雜種植株誘導(dǎo)與鑒定單克隆抗體的提純第26頁(yè)/共62頁(yè)意義和用途①克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，大大擴(kuò)展了可用于雜交的親本組合范圍；②突破有性雜交的母系遺傳，獲得細(xì)胞質(zhì)基因的雜合子，研究細(xì)胞質(zhì)遺傳①制備單克隆抗體；②診斷、治療和預(yù)防疾病，例如：a.腫瘤定位診斷，放射性抗體→腫瘤；b.生物導(dǎo)彈治療，抗體→抗癌藥物→腫瘤第27頁(yè)/共62頁(yè)提醒(1)在細(xì)胞融合時(shí)，可出現(xiàn)多種雜種細(xì)胞，如B細(xì)胞—B細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞—骨髓瘤細(xì)胞，B細(xì)胞—骨髓瘤細(xì)胞。(2)動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交，均需對(duì)雜種細(xì)胞進(jìn)行篩選，但篩選的方法不同，前者可用免疫法，后者可用機(jī)械方法、生理學(xué)或遺傳學(xué)方法。(3)各項(xiàng)技術(shù)在使用中一般要借助于其他某種技術(shù)的協(xié)助，如動(dòng)物細(xì)胞融合、單克隆抗體的制備、胚胎移植、核移植等，其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。第28頁(yè)/共62頁(yè)本考點(diǎn)內(nèi)容是高考命題的熱點(diǎn)內(nèi)容，特別是單克隆抗體的制備是高考命題的熱點(diǎn)，復(fù)習(xí)中應(yīng)引起重視。第29頁(yè)/共62頁(yè)【典例2】?(2010·福建卷)[生物—現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題]紅細(xì)胞生成素(EPO)是體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然EPO來(lái)源極為有限，目前臨床上使用的紅細(xì)胞生成素主要來(lái)自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO)，其簡(jiǎn)要生產(chǎn)流程如右圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。第30頁(yè)/共62頁(yè)(1)圖中①所指的是________技術(shù)。(2)圖中②所指的物質(zhì)是________，③所指的物質(zhì)是________。(3)培養(yǎng)重組CHO細(xì)胞時(shí)，為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，應(yīng)定期更換________。(4)檢測(cè)rhEPO的體外活性需用抗rhEPO的單克隆抗體。分泌該單克隆抗體的________細(xì)胞，可由rhEPO免疫過(guò)的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合而成。第31頁(yè)/共62頁(yè)解析(1)核DNA的體外擴(kuò)增是利用PCR技術(shù)。(2)由圖示分析：從人胚胎干細(xì)胞提取出②，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄可形成cDNA，可知②為翻譯EPO的模板mRNA，③為rhEPO。(3)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，清除代謝廢物。(4)由rhEPO免疫過(guò)的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，可以篩選出能夠分泌抗rhEPO的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。答案(1)PCR

(2)mRNA

rhEPO

(3)培養(yǎng)液(4)雜交瘤第32頁(yè)/共62頁(yè)【訓(xùn)練2】?(2011·金華模擬)下列有關(guān)植物體細(xì)胞雜交的敘述，不正確的是(

)。A．用酶解法去掉細(xì)胞壁，分離出有活力的原生質(zhì)體B．誘導(dǎo)兩種植物的原生質(zhì)體融合，進(jìn)而形成雜種細(xì)胞C．植物體細(xì)胞雜交的最終目的是獲得細(xì)胞代謝產(chǎn)物D．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以克服不同種間遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙解析去除植物細(xì)胞壁可以用纖維素酶和果膠酶；原生質(zhì)體融合后再產(chǎn)生出細(xì)胞壁標(biāo)志著雜種細(xì)胞的形成；植物體細(xì)胞雜交的目的是為了獲得雜種植株；植物體細(xì)胞雜交不經(jīng)過(guò)有性生殖過(guò)程，所以可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。答案C第33頁(yè)/共62頁(yè)【訓(xùn)練3】?(2011·濰坊模擬)下列關(guān)于單克隆抗體制備過(guò)程的敘述，正確的是(

)。A．制備過(guò)程中不需要?jiǎng)游锛?xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B．雜交瘤細(xì)胞具有漿細(xì)胞與癌細(xì)胞的所有特點(diǎn)C．經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來(lái)的雜交瘤細(xì)胞即可用于單克隆抗體的生產(chǎn)D．單克隆抗體最廣泛的用途是用作體外診斷試劑第34頁(yè)/共62頁(yè)解析單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細(xì)胞與漿細(xì)胞結(jié)合，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)基的篩選得到雜交瘤細(xì)胞并經(jīng)專(zhuān)一抗體檢測(cè)后，培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞即可得單克隆抗體，雜交瘤細(xì)胞能無(wú)限繁殖但不具有癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。答案D第35頁(yè)/共62頁(yè)1．原理動(dòng)物細(xì)胞核的全能性。動(dòng)物細(xì)胞核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱(chēng)為克隆動(dòng)物。2．供核細(xì)胞一般選優(yōu)良動(dòng)物的傳代培養(yǎng)10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞。動(dòng)物體細(xì)胞核移植與克隆動(dòng)物

第36頁(yè)/共62頁(yè)第37頁(yè)/共62頁(yè)本考點(diǎn)內(nèi)容在高考中單獨(dú)考查較少，但在高考命題中多以此內(nèi)容為背景進(jìn)行命題考查其它方面知識(shí)。第38頁(yè)/共62頁(yè)【典例3】?日本研究人員依靠體細(xì)胞克隆技術(shù)進(jìn)行反復(fù)“拷貝”，成功培育出第四代克隆豬。這個(gè)研究小組培育的第一代克隆豬于2004年4月誕生，此后，他們又從長(zhǎng)大的克隆豬唾液腺中提取細(xì)胞，將細(xì)胞核植入未受精的卵子中，依次培育出第二代和第三代克隆豬。研究人員發(fā)現(xiàn)，豬與人類(lèi)身體構(gòu)造相似，克隆豬可作為研究人類(lèi)疾病的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。根據(jù)材料回答下列問(wèn)題。(1)第四代克隆豬利用了動(dòng)物細(xì)胞核的________性。第39頁(yè)/共62頁(yè)(2)在細(xì)胞核植入受體卵母細(xì)胞之前，要用顯微針去除卵母細(xì)胞的________，再將唾液腺細(xì)胞核注入。獲得的重組胚胎需要體外培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)不僅要有無(wú)機(jī)鹽類(lèi)和有機(jī)鹽類(lèi)，而且還要有________________等營(yíng)養(yǎng)成分及________等物質(zhì)。當(dāng)發(fā)育到囊胚期時(shí)，將其移植到受體雌性動(dòng)物體內(nèi)。(3)研究顯示，利用克隆技術(shù)根本無(wú)法培育出完全相同的個(gè)體，究其原因，除了發(fā)育過(guò)程中的環(huán)境因素的影響外，還可能有________________等原因。(4)如果希望克隆豬都能生產(chǎn)人體胰島素，那么需要利用________技術(shù)，把________________拼接到豬的核基因中。轉(zhuǎn)基因是否成功都可以用________檢測(cè)。第40頁(yè)/共62頁(yè)解析體細(xì)胞核移植技術(shù)利用了動(dòng)物細(xì)胞核的全能箼；在供體細(xì)胞的細(xì)胞核移入受體細(xì)胞之前，必須將受體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)去掉或?qū)⑵淦茐摹２溉閯?dòng)物胚胎的培養(yǎng)液成分一般都比較復(fù)雜，除一些無(wú)機(jī)鹽類(lèi)外，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分以及血清等物質(zhì)?？寺〖夹g(shù)根本無(wú)法培育出完全相同的個(gè)體，原因可能是在細(xì)胞分裂過(guò)程中發(fā)生基因突變或個(gè)體發(fā)育中受細(xì)胞質(zhì)基因及環(huán)境的影響?；蛱结樇夹g(shù)的原理是DNA分子雜交，可用于疾病診斷、生物檢測(cè)等。第41頁(yè)/共62頁(yè)答案(1)全能(2)細(xì)胞核維生素、激素、氨基酸、核苷酸動(dòng)物血清(3)細(xì)胞分裂過(guò)程中可能發(fā)生基因突變或卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)也有遺傳物質(zhì)DNA，也控制后代的性狀表達(dá)(4)基因工程人的胰島素基因基因探針第42頁(yè)/共62頁(yè)【訓(xùn)練4】?在克隆羊多利的過(guò)程中，下列哪項(xiàng)技術(shù)沒(méi)有運(yùn)用到(

)。A．細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) B．細(xì)胞核移植技術(shù)C．胚胎移植技術(shù) D．基因工程技術(shù)解析克隆技術(shù)需利用核移植以產(chǎn)生重組細(xì)胞，重組細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成早期胚胎后，需移植到母體子宮內(nèi)發(fā)育成個(gè)體。答案D第43頁(yè)/共62頁(yè)1．(2011·江蘇卷)關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是(

)。A．蛋白質(zhì)工程可以合成自然界不存在的蛋白質(zhì)B．體細(xì)胞雜交技術(shù)可以用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體C．植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于植物莖尖脫毒D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培養(yǎng)解析克隆動(dòng)物應(yīng)用的是細(xì)胞核移植技術(shù)，所以B選項(xiàng)敘述錯(cuò)誤。答案B第44頁(yè)/共62頁(yè)2．(2010·廣東卷)新技術(shù)的建立和應(yīng)用對(duì)生物學(xué)發(fā)展至關(guān)重要。下列技術(shù)(或儀器)與應(yīng)用匹配正確的是(雙選)(

)。A．PCR技術(shù)——擴(kuò)增蛋白質(zhì)B．雜交瘤技術(shù)——制備單克隆抗體C．光學(xué)顯微鏡——觀察葉綠體的基粒D．花粉離體培養(yǎng)——培育單倍體植物解析本題主要考查學(xué)生的理解能力。PCR技術(shù)只能用來(lái)擴(kuò)增核酸，不能用來(lái)擴(kuò)增蛋白質(zhì)；利用光學(xué)顯微鏡無(wú)法觀察到葉綠體中的基粒。答案BD第45頁(yè)/共62頁(yè)3．(2010·浙江卷)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是(

)。A．培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞B．克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過(guò)程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變C．二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無(wú)限的D．惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)第46頁(yè)/共62頁(yè)解析本題主要考查細(xì)胞工程的有關(guān)知識(shí)，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可以分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)，原代培養(yǎng)到一定程度后要進(jìn)行傳代，因?yàn)榧?xì)胞有接觸抑制現(xiàn)象，當(dāng)細(xì)胞接觸時(shí)就會(huì)停止分裂(在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中進(jìn)行的為有絲分裂，所以培養(yǎng)出來(lái)的多數(shù)細(xì)胞基因型相同)，但是細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中，傳代次數(shù)也是有限的，一般為50次就會(huì)死亡，留下來(lái)的細(xì)胞就是發(fā)生了癌變的細(xì)胞，遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，具有不死性，不再保留接觸抑制現(xiàn)象，仍能進(jìn)行傳代培養(yǎng)，所以答案為D。答案D第47頁(yè)/共62頁(yè)4．(2009·全國(guó)卷Ⅰ)下列關(guān)于植物體細(xì)胞雜交或植物細(xì)胞質(zhì)遺傳的敘述，錯(cuò)誤的是(

)。A．利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可克服生殖隔離的限制，培育遠(yuǎn)緣雜種B．不同種植物原生質(zhì)體融合的過(guò)程屬于植物體細(xì)胞雜交過(guò)程C．兩個(gè)不同品種的紫茉莉雜交，正交、反交所得F1的表現(xiàn)型一致D．兩個(gè)不同品種的紫茉莉雜交，F(xiàn)1的遺傳物質(zhì)來(lái)自母本的多于來(lái)自父本的第48頁(yè)/共62頁(yè)解析植物體細(xì)胞雜交可以用兩種不同的植物細(xì)胞，從而可克服生殖隔離的限制，植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程，實(shí)際上是不同植物體細(xì)胞的原生質(zhì)體融合的過(guò)程。紫茉莉枝葉的性狀的遺傳是細(xì)胞質(zhì)遺傳，兩個(gè)不同品種的紫茉莉雜交，正交、反交所得F1枝葉的表現(xiàn)型應(yīng)與母本一致，F(xiàn)1的遺傳物質(zhì)來(lái)自母本的多于來(lái)自父本的，因?yàn)槭芫阎械募?xì)胞質(zhì)幾乎全部來(lái)自母本。故C錯(cuò)誤。答案C第49頁(yè)/共62頁(yè)5．(2009·浙江卷)用動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是(

)。A．都需用CO2培養(yǎng)箱 B．都須用液體培養(yǎng)基C．都要在無(wú)菌條件下進(jìn)行 D．都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性解析動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)都要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，動(dòng)物成體的體細(xì)胞離體培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基，不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，植物成體的體細(xì)胞離體培養(yǎng)不一定用液體培養(yǎng)基，能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性。故C正確。答案C第50頁(yè)/共62頁(yè)6．(2009·山東卷)人類(lèi)在預(yù)防與診療傳染性疾病過(guò)程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒。該病毒表面的A蛋白為主要抗原，且疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖：第51頁(yè)/共62頁(yè)請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(1)過(guò)程①代表的是________。(2)過(guò)程②構(gòu)建A基因表達(dá)載體時(shí)，必須使用________和________兩種工具酶。(3)過(guò)程③采用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)是________，獲得的X是________。(4)對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的________所制備的疫苗。對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可從疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進(jìn)行________比較；或用圖中的________進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)。第52頁(yè)/共62頁(yè)解析本題以圖展示了疫苗的生產(chǎn)和單克隆抗體的制備的過(guò)程，考查了中心法則、基因工程、動(dòng)物細(xì)胞工程等現(xiàn)代生物科技。(1)中心法則中，對(duì)于少數(shù)的以RNA為遺傳物質(zhì)的病毒，其遺傳信息的傳遞過(guò)程需要補(bǔ)充的過(guò)程有RNA的逆轉(zhuǎn)錄和RNA的復(fù)制的過(guò)程，圖中過(guò)程①正代表的是逆轉(zhuǎn)錄的過(guò)程。(2)基因工程的步驟是：目的基因的提取——構(gòu)建基因表達(dá)載體——導(dǎo)入受體細(xì)胞——目的基因的檢測(cè)和表達(dá)，其中構(gòu)建基因表達(dá)載體中需要限制酶來(lái)切割以獲取目的基因，同時(shí)需要相同的限制酶切割載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過(guò)DNA連接酶連接目的基因和載體。第53頁(yè)/共62頁(yè)(3)過(guò)程③是將瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的過(guò)程，獲得的叫雜交瘤細(xì)胞，其具備了瘤細(xì)胞的無(wú)限增殖的特性和B淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生抗體的特性，從而制備單克隆抗體。(4)本題考查了免疫預(yù)防的操作過(guò)程，以及欲確診疑似患者而采取的方法。本題中提示該RNA病毒表面的A蛋白為主要的抗原，故而可選用通過(guò)基因工程生產(chǎn)的A蛋白制備疫苗；確診時(shí)為判斷該病毒是否為題目中的RNA病毒，可以進(jìn)行核酸序列的比對(duì)，也可以利用單克隆抗體具備特異性，利用抗A蛋白的特異性單克隆抗體通過(guò)能否特異性結(jié)合判斷病毒表面是否有A蛋白的存在，進(jìn)一步進(jìn)行檢測(cè)是否為目的RNA病毒。第54頁(yè)/共62頁(yè)答案(1)逆轉(zhuǎn)錄(2)限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶、限制性?xún)?nèi)切酶)

DNA連接酶(兩空可以互換)

(3)細(xì)胞融合雜交瘤細(xì)胞(4)A蛋白核酸(基因)序列抗A蛋白的單克隆抗體第55頁(yè)/共62頁(yè)7．(2009·江蘇卷)動(dòng)物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對(duì)于研究器官的生理、病理過(guò)程及其機(jī)制意義重大。下圖是一個(gè)新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。第56頁(yè)/共62頁(yè)(1)肝臟切成小薄片，這有利于肝臟細(xì)胞__________________。(2)氣室中充入5%CO2氣體的主要作用是_______________。(3)培養(yǎng)液中添加抗生素是為了抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，但要注意選擇抗生素的________，以保證抗生素對(duì)肝臟無(wú)害