牙膏中沃氏葡萄球菌的分離與鑒定

PAGEPAGE1牙膏中沃氏葡萄球菌的分離與鑒定牙膏中沃氏葡萄球菌的分離與鑒定沃氏葡萄球菌是一種常見(jiàn)的細(xì)菌，可以在人體的口腔、呼吸道、消化系統(tǒng)中找到。它是引起感染的重要因素，尤其是口腔感染和細(xì)菌性肺炎。為了了解牙膏中是否存在沃氏葡萄球菌，需要進(jìn)行分離與鑒定。一、實(shí)驗(yàn)材料1.牙膏樣品。2.草莓糖瓊脂（trypticsoyagar，TSA）平板。3.空氣消毒器、無(wú)菌勻滑板、鑒定試紙等無(wú)菌器具。4.乙醇燈（或酒精燈）。5.顯微鏡。6.比色計(jì)。二、實(shí)驗(yàn)步驟1.樣品采集用無(wú)菌方法取下大約一克的牙膏，懸于10毫升的滅菌水中，徹底混合。將0.1毫升混合物接種于平板上，用無(wú)菌勻滑板均勻涂抹。盡快將平板倒置，避免在表面的水滴蒸發(fā)。2.革蘭染色在牙膏懸液上涂取一小段，用火烤干，染上革蘭染油，然后用蒸餾水輕輕洗去多余的染料，再在顯微鏡下觀察細(xì)菌的形態(tài)和染色特點(diǎn)。3.生理生化特性測(cè)試?yán)醚栏鄳乙航臃N其他需要的生理生化特性測(cè)試，包括氧氣利用情況、酶的產(chǎn)生和碳源利用情況等，以進(jìn)一步分析分離的沃氏葡萄球菌種類。4.鑒定將提取的菌落接種到乳糖發(fā)酵試驗(yàn)脫氧膽汁瓊脂培養(yǎng)基（LDB）上，并在7.0至7.5的溫度下溫育24小時(shí)，檢查對(duì)瓊脂的顏色反應(yīng)，例如產(chǎn)生黑色素的陽(yáng)性反應(yīng)。5.比色計(jì)檢測(cè)通過(guò)比色計(jì)檢測(cè)牙膏樣品中沃氏葡萄球菌的含量。三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析1.如果革蘭染色顯示大量革蘭氏陽(yáng)性球菌，則進(jìn)一步進(jìn)行各項(xiàng)生理生化測(cè)試后，結(jié)合查閱鑒定手冊(cè)，鑒定結(jié)果可能是沃氏葡萄球菌。2.利用乳糖發(fā)酵試驗(yàn)脫氧膽汁瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行酶切，可以更好地鑒別沃氏葡萄球菌。3.比色計(jì)檢測(cè)需要將細(xì)菌培養(yǎng)基中的沃氏葡萄球菌通過(guò)蛋白水解釋放的氨基酸與磷酸鈷形成深藍(lán)色定量檢測(cè)。四、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)1.所有器材在實(shí)驗(yàn)前需消毒并干燥。2.制備培養(yǎng)基時(shí)要嚴(yán)格按照指示操作，保持無(wú)菌狀態(tài)。3.操作過(guò)程要嚴(yán)格避免外界細(xì)菌污染。4.需要耐心而小心地進(jìn)行細(xì)胞的染色和顯微鏡檢查，以免造成誤判。5.嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)定，避免意外發(fā)生。通過(guò)以上實(shí)驗(yàn)，可以比較準(zhǔn)確地分離和鑒定牙