外界因素對細(xì)菌的影響

這次課要解決幾個問題:1.為什么要消毒滅菌?2.消毒滅菌相關(guān)的醫(yī)學(xué)術(shù)語有哪些?3.要學(xué)好這些相關(guān)的醫(yī)學(xué)術(shù)語關(guān)鍵是什么?目前一頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點1.為什么要消毒滅菌?目前二頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點(1)自然界中廣泛存在:土壤、空氣、水中都有。目前三頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點(2)人體上廣泛分布著各種微生物:目前四頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點目前五頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點微生物主要是由核酸、蛋白質(zhì)、多糖等有機(jī)大分子組成，極易受到各種物理、化學(xué)因素的影響。目前六頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點2.消毒滅菌相關(guān)的醫(yī)學(xué)術(shù)語有哪些?3.要學(xué)好這些相關(guān)的醫(yī)學(xué)術(shù)語關(guān)鍵是什么?目前七頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點第一節(jié)相關(guān)專業(yè)術(shù)語防腐antisepsis

消毒disinfection

滅菌sterilization

無菌asepsis

4123無菌操作aseptictechnique

5目前八頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點目前九頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點殺滅物體上病原微生物的方法。(1)消毒:目前十頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點目前十一頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點消毒劑目前十二頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點

(2)滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法,包括殺滅芽孢在內(nèi)的所有病原微生物和非病原微生物。

目前十三頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點滅菌目前十四頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點目前十五頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點目前十六頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點防腐：?------“防止腐敗/腐爛”腐敗/腐爛：……目前十七頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點目前十八頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點目前十九頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點目前二十頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點腐敗/腐爛的真相：微生物的生長繁殖目前二十一頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點

防腐：防止或抑制微生物生長繁殖的方法。目前二十二頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點無菌：物體或局部環(huán)境中無活的微生物存在的狀態(tài)。目前二十三頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點

無菌操作：是防止活的微生物侵入機(jī)體或污染物品的操作方法。目前二十四頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點目前二十五頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點目前二十六頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點目前二十七頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點目前二十八頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點結(jié)核分枝桿菌感染的病人目前二十九頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點霍亂弧菌感染目前三十頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點麻風(fēng)分桿菌感染患者目前三十一頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點目前三十二頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點物理因素對細(xì)菌的影響目前三十三頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點溫度高溫殺菌機(jī)制：高溫使菌體蛋白凝固變性，酶的活性喪失，細(xì)菌代謝停止，細(xì)菌死亡熱力殺菌：濕熱滅菌法干熱滅菌法目前三十四頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點

在同樣的溫度下，濕熱的殺菌效果比干熱好，其原因有：①蛋白質(zhì)凝固所需的溫度與其含水量有關(guān)，含水量愈大，發(fā)生凝固所需的溫度愈低。濕熱滅菌的菌體蛋白質(zhì)吸收水分，因較大同一溫度的干熱空氣中易于凝固。②溫?zé)釡缇^程中蒸氣放出大量潛熱，加速提高濕度。因而濕熱滅菌比干熱所要溫度低，如在同一溫度下，則濕熱滅菌所需時間比干熱短。③濕熱的穿透力比干熱大，使深部也能達(dá)到滅菌溫度，故濕熱比干熱收效好。目前三十五頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點干熱滅菌燒灼:常用于接種針、試管口等焚燒：適用于廢棄的污染物品和有傳染性的動物尸體。干烤：適用于耐高溫的玻璃器皿、粉劑藥品。(1)燒灼和焚燒：燒灼是直接用火焰殺死微生物，適用于微生物實驗室的接種針等不怕熱的金屬器材的滅菌。焚燒是徹底的消毒方法，但只限于處理廢棄的污染物品，如無用的衣物、紙張、垃圾等。焚燒應(yīng)在專用的焚燒爐內(nèi)進(jìn)行。(2)干烤：利用干烤箱，加熱160～180℃2小時，可殺死一切微生物，包括芽胞菌。主要用于玻璃器皿、瓷器等的滅菌。目前三十六頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點濕熱滅菌(1)煮沸法：煮沸100℃，5～6分鐘，能殺死一般細(xì)菌的繁殖體。許多芽胞需經(jīng)煮潮5～6小時才死亡。水中加入2%碳酸鈉，可提高其沸點達(dá)105℃。既可促進(jìn)芽胞的殺滅，又能防止金屬器皿生銹。煮沸法可用于飲水和一般器械(刀剪、注射器等)的消毒。(2)巴氏消毒法(Pasteurization)：利用熱力殺死液體中的病原菌或一般的雜菌，同時不致嚴(yán)重?fù)p害其質(zhì)量的消耗方法。由巴斯德創(chuàng)用以消毒酒精類，故名。加溫61.1～62.8℃半小時，或71.7℃15～30秒鐘。常用于消毒牛奶和酒類等。(3)流通蒸汽滅菌法：利用100℃左右的水蒸汽進(jìn)行消毒，一般采用流通蒸汽滅菌器(其原理相當(dāng)于我國的蒸籠)，加熱15到39分鐘，可殺死細(xì)菌繁殖體。消毒物品的包裝不宜過大、過緊以利于蒸汽穿透。目前三十七頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點(4)間歇滅菌法：利用反復(fù)多次的流通蒸汽，以達(dá)到滅菌的目的。一般用流通蒸汽滅菌器，100℃加熱15～30分鐘，可殺死其中的繁殖體；但芽胞尚有殘存。取出后放37℃孵箱過夜，使芽胞發(fā)育成繁殖體，次日再蒸一次，如此連續(xù)三次以上。本法適用于不耐高溫的營養(yǎng)物(如血清培養(yǎng)基)的滅菌。(5)高壓蒸汽滅菌法：壓力蒸汽滅菌是在專門的壓力蒸汽滅菌器中進(jìn)行的，是熱力滅菌中使用最普遍、效果最可靠的一種方法。其優(yōu)點是穿透力強(qiáng)，滅菌效果可靠，能殺滅所有微生物。目前使用的壓力滅菌器可分為兩類：下排氣式壓力滅菌器和預(yù)真空壓力滅菌器。適用于耐高溫、耐水物品的滅菌。目前三十八頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點濕熱滅菌高壓蒸汽滅菌法:壓力103.4kPa、溫度121.3℃，持續(xù)15～30分鐘適用于耐高溫、耐高壓、耐潮濕的物品滅菌巴氏消毒法：61.1～62.8℃或71.1℃煮沸法：100℃流通蒸汽法:100℃間歇滅菌法:<100℃連續(xù)3次，適用于不耐高溫的營養(yǎng)物質(zhì)滅菌。目前三十九頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點低溫常用于保存菌種但某些細(xì)菌對低溫敏感，低溫易死亡。目前四十頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點紫外線殺菌紫外線：200～300nm波長的紫外線有殺菌作用，265～266nm殺菌作用最強(qiáng)★殺菌機(jī)制：干擾細(xì)菌DNA的復(fù)制?！飸?yīng)用：空氣消毒、物品表面消毒電離輻射：用于不耐熱的塑料注射器、導(dǎo)管等的消毒滅菌目前四十一頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點日光與紫與外日光是有效的天然殺菌法，對大多數(shù)微生物均有損害作用，直射殺菌效果尤佳，其主要的作用因素為紫外線，此外，熱與氧氣起輔助作用。但光線效應(yīng)受很多因素的影響，如煙塵籠罩的空氣、玻璃及有機(jī)物等都能減弱日光的殺菌力。紫外線是一種低能量的電磁輻射，波長范圍為200～300nm,最適的波長為265～266nm，這與DNA吸收光譜范圍相一致。其殺菌原理是紫外線易被核蛋白吸收，使DNA的同一條螺旋體上相鄰的堿基形成胸腺嘧啶二聚體，從而干攏DNA的復(fù)制，導(dǎo)致細(xì)菌死亡或變異。紫外線的穿透能力弱，不能通過普通玻璃、塵埃，只能用于消毒物體表面及空氣、手術(shù)室、無菌操作實驗室及燒傷病房，亦可用于不耐熱物品表面消毒。殺菌波長的紫外線對人體皮膚、眼睛均有損傷作用，使用時應(yīng)注意防護(hù)。目前四十二頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點濾過除菌應(yīng)用：用于不耐高溫的血清、抗生素、抗毒素、藥液、空氣的除菌目前四十三頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點超聲與超聲波(Ultrasonicandsonicwaves)每秒鐘超過200，000次振動的聲波不被人耳感受，稱為超聲波。微生物對強(qiáng)度高的超聲波很敏感。其中以革蘭氏陰性菌最敏感，而葡萄球抵抗最強(qiáng)。雖然聲波強(qiáng)烈地振動可使菌群死亡，但往往有殘存者。因此，這種方法在消毒滅菌方面無實用價值。主要用以裂解細(xì)胞分離提取細(xì)胞組分或制備抗原。超聲波滅菌的機(jī)理尚不清楚，可能是細(xì)菌外表受細(xì)微氣泡的作用，擾亂細(xì)胞內(nèi)容物及破壞細(xì)胞壁致細(xì)菌崩解而死亡。干燥多數(shù)細(xì)菌的繁殖體在空氣中干燥時很快死亡，例如腦膜炎雙球菌、淋球菌、霍亂弧菌、梅毒螺旋體等。有些細(xì)菌抗干燥力較強(qiáng)，尤其有蛋白質(zhì)等物質(zhì)保護(hù)時。例如溶血性鏈球菌在塵埃中存活25日，結(jié)核桿菌在干痰中數(shù)月不死。芽胞抵抗力更強(qiáng)，例如炭疽桿菌耐干燥20余年。干燥法常用于保存食物。濃鹽或糖漬食品，可使細(xì)菌體內(nèi)水分逸出，造成生理性干燥，使細(xì)菌的生命活動停止。目前四十四頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點三、化學(xué)因素

化學(xué)藥物能影響細(xì)菌的化學(xué)組成、物理結(jié)構(gòu)和生理活動，從而發(fā)揮防腐，消毒，甚至滅菌的作用。防腐劑的濃度高或作用時間長，也可達(dá)到消毒的目的。消毒及防腐藥物對人體組織有害，只能外用或用于環(huán)境消毒。目前四十五頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點1.化學(xué)消毒劑的種類

化學(xué)消毒劑的種類很多，其殺菌作用亦不盡相同。一般可根據(jù)用途與消毒劑的特點選擇使用(見課本P44～45)目前四十六頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點2.化學(xué)消毒劑的作用機(jī)制

不同的化學(xué)消毒劑其作用原理也不完全相同，大致歸納為三個方面。一種化學(xué)消毒劑對細(xì)菌的影響常以其中一方面為主，兼有其他方面的作用。(1)改變細(xì)胞膜通透性表面活性劑(Surface-activeagent)、酚類及醇類可導(dǎo)致胞漿膜結(jié)構(gòu)紊亂并干擾其正常功能。使小分子代謝物質(zhì)溢出胞外，影響細(xì)胞傳遞活性和能量代謝。甚至引起細(xì)胞破裂。(2)蛋白變性或凝固酸、堿和醇類等有機(jī)溶劑可改變蛋白構(gòu)型而攏亂多肽鏈的折疊方式，造成蛋白變性。如乙醇、大多數(shù)重金屬鹽、氧化劑、醛類、染料和酸堿等。(3)改變蛋白與核酸功能基團(tuán)的因子作用于細(xì)菌胞內(nèi)酶的功能基(如SH基)而改變或抑制其活性。如某些氧化劑和重金屬鹽類能與細(xì)菌的-SH基結(jié)合并使之失去活性。目前四十七頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點化學(xué)因素對細(xì)菌的影響常用消毒劑的殺菌機(jī)制常用消毒劑種類影響消毒劑消毒效果的因素

消毒劑的性質(zhì)和濃度溫度和酸堿度細(xì)菌的種類和數(shù)量化學(xué)拮抗作用目前四十八頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點.影響消毒劑作用的因素(1)消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時間各種消毒劑的理化性質(zhì)不同，對微生物的作用大小也差異。例如表面活性劑對革蘭氏陽性菌的滅菌效果比對革蘭氏陰性菌好，龍膽紫對葡萄球菌的效果特別強(qiáng)。同一種消毒劑的濃度不同，其消毒效果也不一樣。大多數(shù)消毒劑在高濃度時起殺菌作用，低濃度時則只有抑菌作用。在一定濃度下，消毒劑對某種細(xì)菌的作用時間越長，其效果也越強(qiáng)。若溫度升高，則化學(xué)物質(zhì)的活化分子增多，分子運動速度增加使化學(xué)反應(yīng)加速，消毒所需要的時間可以縮短。(2)微生物的污染程度微生物污染程度越嚴(yán)重，消毒就越困難，因為微生物彼此重疊，加強(qiáng)了機(jī)械保護(hù)作用。所以在處理污染嚴(yán)重的物品時，必須加大消毒劑濃度，或延長消毒作用的時間。(3)微生物的種類和生活狀態(tài)不同的細(xì)菌對消毒劑的抵抗力不同，細(xì)菌芽胞的抵抗力最強(qiáng)，幼齡菌比老齡菌敏感。(4)環(huán)境因素當(dāng)細(xì)菌和有機(jī)物特別是蛋白質(zhì)混在一起時，某些消毒劑的殺菌效果可受到明顯影響。因此在消毒皮膚及器械前應(yīng)先清潔再消毒。(5)溫度、濕度、酸堿度消毒速度一般隨溫度的升高而加快，所以溫度越高消毒效果越好。濕度對許多氣體消毒劑有影響。酸堿度的變化可影響劑殺滅微生物的作用。例如，季胺鹽類化合物的戊二醛藥物在堿性環(huán)境中殺滅微生物效果較好；酚類和次氯酸鹽藥劑則在酸性條件下殺滅微生物的作用較強(qiáng)。(6)化學(xué)拮抗物陰離子表面活性劑可降低季胺鹽類和洗比泰的消毒作用，因此不能將新潔爾滅等消毒劑與肥皂、陰離子洗滌劑合用。次氯酸鹽和過氧乙酸會被硫代硫酸鈉中和，金屬離子的存在對消毒效果也有一定影響，可降低或增加消毒作用。目前四十九頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點消毒滅菌效果檢測生物指標(biāo)：嗜熱脂肪芽孢桿菌、枯草桿菌芽孢黑色變種化學(xué)指標(biāo)：硫磺目前五十頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點噬菌體（bacteriophage,phage）定義：噬菌體是感染細(xì)菌、真菌等微生物的病毒，具一定的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和嚴(yán)格的寄生性，能使細(xì)菌裂解故稱噬菌體。在葡萄球菌和志賀菌中首先發(fā)現(xiàn)。分布極廣目前五十一頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點噬菌體的生物學(xué)性狀形態(tài)個體小，需用電子顯微鏡觀察蝌蚪形、微球形和絲形，大多數(shù)噬菌體呈蝌蚪形，由頭部和尾部兩部分組成LG1wasisolatedfromchickenfecesonanE.coliO157:H7host,butitplaquesonawiderangeofE.coli,andafewEnterobacteriaceae.Theblackbarsaresizebarsrepresenting100nm.目前五十二頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點噬菌體的生物學(xué)性狀大腸埃希菌T2噬菌體蝌蚪形噬菌體結(jié)構(gòu)模式圖目前五十三頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點噬菌體的生物學(xué)性狀目前五十四頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點噬菌體的生物學(xué)性狀化學(xué)組成蛋白質(zhì)構(gòu)成噬菌體的頭部的衣殼及尾部，包括尾髓、尾鞘、尾板、尾刺和尾絲，起著保護(hù)核酸的作用，并決定噬菌體外形和表面特征。核酸-遺傳物質(zhì)基因組大小2~200Kb核酸為DNA或RNA，大多數(shù)噬菌體的DNA為雙鏈DNA，但一些微小DNA噬菌體的DNA為環(huán)狀單鏈。多數(shù)RNA噬菌體的RNA為線狀單鏈，少數(shù)為線狀雙鏈，且分成幾個節(jié)段。某些噬菌體的基因組含有異常堿基，如大腸埃希菌T2噬菌體無胞嘧啶，而代以5-羥甲基胞嘧啶與糖基化的5-羥甲基胞嘧啶；某些枯草芽胞桿菌噬菌體無胸腺嘧啶，而代以尿嘧啶、5-羥甲基尿嘧啶。因宿主細(xì)胞內(nèi)沒有這些堿基，可成為噬菌體DNA的天然標(biāo)記。目前五十五頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點毒性噬菌體毒性噬菌體(virulentphage)能在宿主菌細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖,產(chǎn)生許多子代噬菌體，并最終裂解細(xì)菌，稱為毒性噬菌體。溫和噬菌體(temperatephage)噬菌體基因與宿主菌染色體整合，不產(chǎn)生子代噬菌體，但噬菌體DNA能隨細(xì)菌DNA復(fù)制，并隨細(xì)菌的分裂而傳代，稱為溫和噬菌體或溶原性噬菌體(lysogenicphage)。目前五十六頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點溫和噬菌體前噬菌體整合在細(xì)菌基因組中的噬菌體基因組稱為前噬菌體（prophage）溶原性細(xì)菌帶有前噬菌體基因組的細(xì)菌稱為溶原性細(xì)菌（lysogenicbacterium）目前五十七頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點溫和噬菌體目前五十八頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點噬菌體形態(tài)模式圖目前五十九頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點毒性噬菌體的溶菌周期目前六十頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點目前六十一頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點目前六十二頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點目前六十三頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點溫和噬菌體溫和噬菌體溶原性細(xì)菌前噬菌體目前六十四頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點二、溫和噬菌體與細(xì)菌間遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移1、與轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移2、與溶原性轉(zhuǎn)換有關(guān)的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移溶原性轉(zhuǎn)換（lysogenicconversion）某些前噬菌體可導(dǎo)致細(xì)菌基因型和性狀發(fā)生改變，這就是所謂的溶原性轉(zhuǎn)換。毒素產(chǎn)生能力的溶原性轉(zhuǎn)換：白喉棒狀桿菌產(chǎn)生白喉毒素，是因其前噬菌體（β-棒狀噬菌體）帶有毒素蛋白結(jié)構(gòu)基因（tox基因）。A群溶血性鏈球菌受有關(guān)溫和噬菌體感染發(fā)生溶原性轉(zhuǎn)換，能產(chǎn)生致熱外毒素。細(xì)胞產(chǎn)物的溶原性轉(zhuǎn)換：金黃色葡萄球菌經(jīng)血清F型噬菌體溶原轉(zhuǎn)換后，可丟失β溶血素目前六十五頁\總數(shù)六十八頁\編于二十一點三、噬菌體的應(yīng)用1、分子生物學(xué)研究的重要工具噬菌