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化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的類型免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)—*—
化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的類型化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)類型(1)化學(xué)發(fā)光免疫分析(2)化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(3)電化學(xué)發(fā)光免疫分析(4)發(fā)光氧通道免疫分析化學(xué)發(fā)光免疫分析免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)—*—
化學(xué)發(fā)光免疫分析化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA)(以雙抗體夾心法檢測(cè)微量抗原為例)標(biāo)本:血清(待測(cè)微量抗原)試劑:磁珠包被的已知抗體;AE標(biāo)記抗體微課:化學(xué)發(fā)光免疫分析的基本過程—*—
化學(xué)發(fā)光免疫分析化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA)(以雙抗體夾心法檢測(cè)微量抗原為例)過程:1)加血清、磁珠包被的已知抗體和AE標(biāo)記抗體,反應(yīng);2)洗滌;3)加H2O2和NaOH,AE發(fā)光;4)集光器和光電倍增管接收、記錄,光信號(hào)轉(zhuǎn)為電信號(hào),計(jì)算機(jī)處理,對(duì)抗原進(jìn)行定量。自學(xué)視頻:化學(xué)發(fā)光免疫分析儀化學(xué)發(fā)光酶免疫分析免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)—*—
化學(xué)發(fā)光酶免疫分析化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)(以雙抗體夾心法檢測(cè)微量抗原為例)標(biāo)記酶:HRP標(biāo)本:血清(待測(cè)微量抗原)試劑:磁珠包被的已知抗體;HRP標(biāo)記抗體微課:化學(xué)發(fā)光酶免疫分析的基本過程—*—
化學(xué)發(fā)光酶免疫分析化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)(以雙抗體夾心法檢測(cè)微量抗原為例)思路:HRP標(biāo)記抗體在魯米諾、H2O2和NaOH存在的條件下發(fā)光(光的強(qiáng)度與待測(cè)抗原成正比)→集光器和光電倍增管接收、記錄(光信號(hào)轉(zhuǎn)為電信號(hào))→計(jì)算機(jī)處理可定量抗原自學(xué)視頻:化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(半自動(dòng))—*—
化學(xué)發(fā)光酶免疫分析化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)(以雙抗體夾心法檢測(cè)微量抗原為例)標(biāo)記酶:ALP標(biāo)本:血清(待測(cè)微量抗原)試劑:磁珠包被的已知抗體;ALP標(biāo)記抗體微課:化學(xué)發(fā)光酶免疫分析的基本過程—*—
化學(xué)發(fā)光酶免疫分析化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)(以雙抗體夾心法檢測(cè)微量抗原為例)思路:ALP標(biāo)記抗體在AMPPD存在的條件下發(fā)光(光的強(qiáng)度與待測(cè)抗原成正比)→集光器和光電倍增管接收、記錄(光信號(hào)轉(zhuǎn)為電信號(hào))→計(jì)算機(jī)處理可定量抗原電化學(xué)發(fā)光免疫分析免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)—*—
電化學(xué)發(fā)光免疫分析電化學(xué)發(fā)光免疫分析(ECLIA)(以雙抗體夾心法檢測(cè)微量抗原為例)標(biāo)本:血清(待測(cè)微量抗原)試劑:磁珠包被的已知抗體;【Ru(bpy)3】2+標(biāo)記抗體微課:電化學(xué)發(fā)光免疫分析的基本過程—*—
電化學(xué)發(fā)光免疫分析電化學(xué)發(fā)光免疫分析(ECLIA)(以雙抗體夾心法檢測(cè)微量抗原為例)思路:三聯(lián)吡啶釕持續(xù)發(fā)光(光強(qiáng)度與待測(cè)抗原成正比)→集光器和光電倍增管接收、記錄(光信號(hào)轉(zhuǎn)為電信號(hào))→計(jì)算機(jī)處理可對(duì)待測(cè)抗原進(jìn)行定量發(fā)光氧通道免疫分析免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)—*—
發(fā)光氧通道免疫分析發(fā)光氧通道免疫分析(LOCI)1、概念:是以納米微粒為基礎(chǔ)的均相化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)。2、反應(yīng)體系的成分主要包括:1)感光微粒(納米級(jí)):覆蓋有親和素和酞菁染料的乳膠聚苯乙烯顆粒,可吸收680nm的光,生成高能單線態(tài)氧。2)發(fā)光微粒(納米級(jí)):發(fā)光微粒含有烯烴染料和特異性抗體(抗原),可以與單線態(tài)氧反應(yīng),發(fā)出612nm的光信號(hào),LOCI檢測(cè)器讀取。(感光與發(fā)光微粒形成二聚體才生成化學(xué)光信號(hào))—*—
發(fā)光氧通道免疫分析發(fā)光氧通道免疫分析(LOCI)3)生物素化抗體(抗原):生物素化抗體(抗原)可與含有親和素的感光微粒結(jié)合。3、方法類型:夾心法和競(jìng)爭(zhēng)法。4、檢測(cè)過程(以雙抗體夾心法為例):包被有特異性抗體的發(fā)光微粒、生物素(B)標(biāo)記抗體、待測(cè)抗原、鏈霉親和素(SA)包被感光微粒反應(yīng),形成復(fù)合物,即發(fā)光微粒-Ab-Ag-Ab-B-SA-感光微粒,感光微粒與發(fā)光微粒之間的距離小于200nm。用波長(zhǎng)—*—
發(fā)光氧通道免疫分析發(fā)光氧通道免疫分析(LOCI)為680nm的光照射反應(yīng)體系,感光微粒使周圍環(huán)境中的氧轉(zhuǎn)化為高能單線態(tài)氧,后者被發(fā)光微粒捕獲,與化學(xué)微粒發(fā)生反應(yīng),發(fā)出612nm的光信號(hào),被檢測(cè)器讀取,通過計(jì)算機(jī)計(jì)算將光子數(shù)換算成靶抗原濃度?!?—
發(fā)光氧通道免疫分析發(fā)光氧通道免疫分析(LOCI)5、評(píng)價(jià)與應(yīng)用1)LOCI光的產(chǎn)生、傳遞、放大過程十分穩(wěn)定。2)反應(yīng)時(shí)間短。3)反應(yīng)無(wú)需分離標(biāo)本和試劑,降低了系統(tǒng)誤差。4)信號(hào)傳遞過程具有放大效應(yīng),發(fā)光迅速,提高了靈敏度。5)LOCI檢測(cè)范圍廣。6)LOCI解決了檢測(cè)低親和力分子的問題?!?—
化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)臨床應(yīng)用1)甲狀腺激素:T3、T4、TSH等;2)生殖激素:β-HCG等;3)腎上腺/垂體激素:人生長(zhǎng)激素等;4)貧血因子:葉酸等;—*—
化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)臨床應(yīng)用5)腫瘤標(biāo)志物:AFP、CEA
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