色譜法固定相和流動相的選擇

職業(yè)教育醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫吸附柱色譜法的固定相和流動相選擇宜春職業(yè)技術(shù)學(xué)院王宜萍吸附柱色譜法的固定相和流動相選擇知識回顧色譜分離過程的實(shí)質(zhì)：是溶質(zhì)在不互溶的固定相和流動相之間進(jìn)行的一種連續(xù)多次的交換過程，它借助溶質(zhì)在兩相間分配行為的差別而使不同的溶質(zhì)分離。色譜體系固定相流動相待分離溶質(zhì)性質(zhì)決定分離效果1固定相吸附柱色譜法的固定相和流動相選擇以固體吸附劑作固定相，應(yīng)具備以下特點(diǎn)：粒度均勻，粒度要細(xì)，使用方便0403良好的穩(wěn)定性（化學(xué)惰性），且不溶于洗脫劑01較大的比表面和一定的吸附能力常用：氧化鋁、硅膠、聚酰胺、大孔吸附樹脂等02較好的選擇性吸附柱色譜法的固定相和流動相選擇常以SiO2·XH2O表示，是多孔性的硅氧交鏈結(jié)構(gòu)。其骨架表面的硅醇基，能吸附大量水分，硅膠的活性與含水量有關(guān)。硅氧交鏈硅膠硅醇基①硅膠吸附柱色譜法的固定相和流動相選擇吸附機(jī)制失活活化適用范圍粒度100~200目具微酸性，適于酸性和中性物質(zhì)105-110℃加熱30min水與硅醇基結(jié)合使其失去活性表面的硅醇基，與物質(zhì)形成氫鍵吸附柱色譜法的固定相和流動相選擇氧化鋁的吸附活性來源于鋁原子上未成鍵電子對。氧化鋁的活性也與含水量有關(guān)，含水量越低，活性越大，吸附力越強(qiáng)。無水氧化鋁吸附活性特別強(qiáng)。根據(jù)氧化鋁的含水量可將活性分為五級。②氧化鋁吸附柱色譜法的固定相和流動相選擇硅膠含水量%15525038活性級別ⅢⅡⅣⅠⅤ氧化鋁含水量%6310015吸附劑的活性和含水量有一定的關(guān)系：（1）含水量愈高，其吸附活性愈低，（2）活性級數(shù)愈大，吸附力就愈弱。吸附柱色譜法的固定相和流動相選擇適用于堿性和中性化合物的分離堿性氧化鋁(pH9～10)適用范圍廣，分離生物堿等，及酸堿不穩(wěn)定成分中性氧化(pH7.5)適于分離酸性化合物，及對酸穩(wěn)定的中性物質(zhì)酸性氧化鋁(pH5～4)氧化鋁具有分離能力強(qiáng)、活性可以控制等優(yōu)點(diǎn)。通常分為：吸附柱色譜法的固定相和流動相選擇小結(jié)-----氧化鋁：強(qiáng)極性吸附劑活化溫度：200~400℃分類：堿性、中性和酸性吸附機(jī)制：堿性位置、Al-OH吸附柱色譜法的固定相和流動相選擇③聚酰胺分離機(jī)制：主要是氫鍵吸附適用對象：酚類、酸類、硝基、黃酮類商品名：錦綸、尼龍-6,白色多孔的非晶型粉末不溶于水和有機(jī)溶劑，易溶于甲酸、酚、濃酸吸附柱色譜法的固定相和流動相選擇吸附性：是由于范德華力或產(chǎn)生氫鍵吸附。篩選性：是來源于它的多孔性網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。主要應(yīng)用于：水溶性化合物的分離提純。④大孔吸附樹脂其是一種不含交換基團(tuán)，具有大孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的高分子吸附劑，其工作原理是利用吸附性和篩選性原理相結(jié)合的分離材料。2流動相------液體又稱洗脫劑吸附柱色譜法的固定相和流動相選擇

流動相洗脫的過程實(shí)質(zhì)：就是流動相分子與被分離的組分分子競爭占據(jù)吸附劑表面吸附活性中心的過程。流動相的要求純度高穩(wěn)定

對樣品溶解度大粘度小吸附柱色譜法的固定相和流動相選擇按“相似相溶原則”,當(dāng)分離極性較大的組分時，宜選擇極性較大的溶劑作洗脫劑，而分離極性小的溶劑作洗脫劑,宜選擇極性較大的溶劑作洗脫劑。流動相的洗脫能力主要由流動相的極性決定3選擇原則吸附柱色譜法的固定相和流動相選擇常用溶劑的極性順序?yàn)椋撼Ｓ梦絼┑臉O性順序?yàn)椋涸龃笤龃鬄橐岣叻蛛x效果，必須同時充分考慮試樣、洗脫劑和吸附劑三者關(guān)系。3、選擇原則吸附柱色譜法的固定相和流動相選擇＜二甲胺＜酯類＜酮類＜醛類＜硫醇＜胺類＜醚＜硝基化合物烷烴＜烯烴＜酰胺類＜醇類＜酚類＜羧酸類小極性大多糖、蛋白質(zhì)等大分子、生物堿鹽苷類（皂苷、黃酮苷、蒽醌苷）黃酮、蒽