無(wú)菌檢查用培養(yǎng)基滅菌后的保存有效期的驗(yàn)證方法

第第3頁(yè)共24頁(yè)無(wú)菌檢查用培養(yǎng)基滅菌后的保存時(shí)限驗(yàn)證方法項(xiàng)目描述20202～25℃、存（2～10℃pH01天、2345pH目的對(duì)無(wú)菌檢查用培養(yǎng)基滅菌后的保存時(shí)限進(jìn)行驗(yàn)證，確認(rèn)無(wú)菌檢查用培養(yǎng)基滅菌后在保存有效期內(nèi)的pH值、無(wú)菌性檢查及靈敏度檢查是否符合要求。范圍本驗(yàn)證文件的范圍僅適用于質(zhì)量控制部無(wú)菌檢查用培養(yǎng)基制備好后的保存時(shí)限的pH職責(zé)質(zhì)量控制部職責(zé)：負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案、報(bào)告的起草；負(fù)責(zé)按照批準(zhǔn)的方案進(jìn)行驗(yàn)證操作；負(fù)責(zé)對(duì)驗(yàn)證數(shù)據(jù)進(jìn)行收集、整理、分析；負(fù)責(zé)記錄在確認(rèn)過(guò)程中所有發(fā)生的偏差及變更；負(fù)責(zé)針對(duì)偏差及變更，并提出解決方案，以采取糾正行動(dòng)；負(fù)責(zé)驗(yàn)證過(guò)程中的相關(guān)檢驗(yàn)工作；負(fù)責(zé)驗(yàn)證結(jié)果的總結(jié)、分析評(píng)價(jià)工作；負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)審核文件。質(zhì)量保證部職責(zé)：負(fù)責(zé)監(jiān)督整個(gè)驗(yàn)證活動(dòng)，確保驗(yàn)證按計(jì)劃進(jìn)度進(jìn)行；負(fù)責(zé)過(guò)驗(yàn)證項(xiàng)目的驗(yàn)證；負(fù)責(zé)對(duì)驗(yàn)證數(shù)據(jù)進(jìn)行收集、整理、分析；負(fù)責(zé)變差、變更的調(diào)查和處理，偏差調(diào)查報(bào)告及變更情況上報(bào)審批；負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)審核文件。質(zhì)量管理負(fù)責(zé)人職責(zé)：負(fù)責(zé)最終批準(zhǔn)文件。質(zhì)量管理負(fù)責(zé)人職責(zé)：參考標(biāo)準(zhǔn)《中國(guó)藥典》2020驗(yàn)證實(shí)施先決條件確認(rèn)目的：確認(rèn)所有進(jìn)行驗(yàn)證的先決條件已經(jīng)得到滿足。程序：確認(rèn)本驗(yàn)證方案是否已得到批準(zhǔn)；執(zhí)行本方案的人員是否經(jīng)過(guò)培訓(xùn)；1可接受標(biāo)準(zhǔn)：本驗(yàn)證方案得到批準(zhǔn)，執(zhí)行本方案的人員已得到培訓(xùn)。1；如發(fā)現(xiàn)偏差應(yīng)記錄在偏差報(bào)告中。實(shí)驗(yàn)設(shè)備及器材確認(rèn)目的:確認(rèn)實(shí)施過(guò)程中所需的所有設(shè)備、器材是否正常、完整。程序:查閱實(shí)施過(guò)程中所用設(shè)備、器材是否正常、完整。2可接受標(biāo)準(zhǔn)：所有實(shí)施過(guò)程中所用設(shè)備、器材正常、完整。2。培養(yǎng)基確認(rèn)目的：確認(rèn)培養(yǎng)基質(zhì)量及配制是否符合要要求。程序：培養(yǎng)基質(zhì)量確認(rèn)檢查確認(rèn)驗(yàn)證用培養(yǎng)基的品名、批號(hào)、數(shù)量、生產(chǎn)單位、外觀形狀（內(nèi)容物有無(wú)結(jié)塊霉變等，處方和使用說(shuō)明、有效期、儲(chǔ)存條件，及生產(chǎn)商提供的質(zhì)控3培養(yǎng)基配制確認(rèn)硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基的配制：按照硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基-水（29.25g:1L）比例稱取硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基，加熱煮沸使完全溶解，搖勻分裝于無(wú)菌檢驗(yàn)用專用瓶?jī)?nèi)（500ml瓶，121℃15min，即可。胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基的配制：按照胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基-水（29.8g:1L）比例稱取胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基，微溫溶解，分裝于無(wú)菌檢驗(yàn)用專用瓶?jī)?nèi)（500ml/瓶12115min，滅菌后，即可。配制結(jié)束后將配制日期、配制編號(hào)、配制量及分裝數(shù)量記錄在附件表3中?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：培養(yǎng)基質(zhì)量應(yīng)符合要求，培養(yǎng)基的配制應(yīng)按說(shuō)明上的要求操作。3；如發(fā)現(xiàn)偏差應(yīng)記錄在偏差報(bào)告中。滅菌效果確認(rèn)目的：確認(rèn)培養(yǎng)基滅菌效果是否符合要要求；程序：將壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡放入滅菌鍋?zhàn)罾潼c(diǎn)處，與培養(yǎng)基同時(shí)滅菌。滅菌完畢后將指示卡抽出，觀察顏色變化?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：指示卡達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)黑色以上，表示符合滅菌條件。4；如發(fā)現(xiàn)偏差應(yīng)記錄在偏差報(bào)告中。包裝、儲(chǔ)存條件確認(rèn)目的：確認(rèn)滅菌后培養(yǎng)及的包裝及儲(chǔ)存條件是否符合要要求。程序：包裝確認(rèn)滅菌后查看無(wú)菌檢驗(yàn)專用瓶是否完好，膠塞及螺紋蓋是否完好正常，確保其密閉性符合要求。儲(chǔ)存條件確認(rèn)檢查確認(rèn)儲(chǔ)藏培養(yǎng)基的冰柜是否正常，溫度是否可以控制在2～10℃。2～10℃。5；如發(fā)現(xiàn)偏差應(yīng)記錄在偏差報(bào)告中。pHpH程序：0123425pH6可接受標(biāo)準(zhǔn)：硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基滅菌后在25℃pH7.1±0.2；25℃pH7.3±0.2。pH6；如發(fā)現(xiàn)偏差應(yīng)記錄在偏差報(bào)告中。無(wú)菌性檢查確認(rèn)目的：確認(rèn)培養(yǎng)基滅菌后在不同保存期的無(wú)菌性檢查是否符合要求。程序：對(duì)0天、第1天、第2天、第3天、第4天、第5天各取裝量為500ml/瓶的1100ml130～35℃1420～25℃14天，逐日觀察。將實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入附件表7中，并簽字確認(rèn)。147；如發(fā)現(xiàn)偏差應(yīng)記錄在偏差報(bào)告中。靈敏度檢查確認(rèn)目的：確認(rèn)培養(yǎng)基滅菌后在不同保存期的靈敏度檢查是否符合要求。程序：菌種確認(rèn)培養(yǎng)基靈敏度檢查所用的菌株傳代次數(shù)不得超過(guò)5代(從菌種保存中心獲得的冷凍08金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）[CMCC（B）26003]銅綠假單胞菌（Pseudomonasaeruginosa）[CMCC（B）10104]枯草芽孢桿菌（Bacillussubtilis）[CMCC（B）63501]生孢梭菌（Clostridiumsporogenes）[CMCC（B）64941]白色念珠菌（Candidaalbicans）[CMCC（F）98001]黑曲霉（Aspergillusniger）[CMCC（F）98003]菌液制備18～2424～480.9%lmlOOcfu(菌落形成單位）0.9%無(wú)菌lmllOOcfu菌懸液若在室溫下放置，應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)使用；若保存在2～8℃可在24小時(shí)內(nèi)使用。將活菌計(jì)數(shù)結(jié)果填入附件表9中。培養(yǎng)基接種0123452100ml，7100cfu2132100ml，7100cfu213白色念珠菌及黑曲霉的培養(yǎng)基培養(yǎng)不超過(guò)5天。逐日觀察結(jié)果。將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)填入附件表9中，并簽字確認(rèn)?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：空白對(duì)照管應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)，所有加菌的培養(yǎng)基管應(yīng)生長(zhǎng)良好。9；如發(fā)現(xiàn)偏差應(yīng)記錄在偏差報(bào)告中。偏差清單中。變更控制如果驗(yàn)證過(guò)程中發(fā)生變更，應(yīng)對(duì)變更部分的內(nèi)容進(jìn)行確認(rèn)，并經(jīng)過(guò)質(zhì)量管理負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)，并將變更清單列在附件表11中?？偨Y(jié)及評(píng)價(jià)由質(zhì)量控制部硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基及胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基滅菌后的保存時(shí)限驗(yàn)證方案執(zhí)行人員負(fù)責(zé)收集執(zhí)行過(guò)程中的相關(guān)資料和數(shù)據(jù)，并做最終的總結(jié)及評(píng)價(jià)，并填寫最終結(jié)論。由質(zhì)量控制部及QA部門對(duì)驗(yàn)證和最終結(jié)論進(jìn)行審核，審核應(yīng)包括：執(zhí)行過(guò)程中是否有遺漏?實(shí)施過(guò)程中對(duì)驗(yàn)證方案有無(wú)修改?修改原因、依據(jù)以及是否經(jīng)過(guò)批準(zhǔn)?過(guò)程中的記錄是否完整?充確認(rèn)?9.6由質(zhì)量管理負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)對(duì)和最終結(jié)論進(jìn)行批準(zhǔn)。附件清單表1：先決條件確認(rèn)表相關(guān)人員培訓(xùn)記錄培訓(xùn)內(nèi)容：培訓(xùn)教師： 培訓(xùn)日期：被培訓(xùn)人：培訓(xùn)情況確認(rèn)序號(hào)12

項(xiàng)目人員培訓(xùn)驗(yàn)證方案

接受標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行本方案的人員已得到培訓(xùn)驗(yàn)證方案已得到批準(zhǔn)

檢查結(jié)是 否確認(rèn)人 日期復(fù)核人 日期2：驗(yàn)證設(shè)備及器材確認(rèn)表第第8頁(yè)共24頁(yè)是否正常、完整是否正常、完整序號(hào)設(shè)備、器材名稱型號(hào)生產(chǎn)廠家是否結(jié)論：確認(rèn)人日期復(fù)核人日期3：培養(yǎng)基確認(rèn)表第第9頁(yè)共24頁(yè)硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基生產(chǎn)單位： 批號(hào)：是否在有

外觀形狀

處方和說(shuō)明書(shū)

生產(chǎn)商提供的質(zhì)控質(zhì)量確認(rèn)

效期內(nèi)是

貯藏條件

是否正常 報(bào)告是 否 有 無(wú) 有 無(wú)配制日期

配制編號(hào)

配制量

分裝數(shù)量配制確認(rèn)胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基生產(chǎn)單位： 批號(hào)：是否在有

外觀形狀

處方和說(shuō)明書(shū)

生產(chǎn)商提供的質(zhì)控質(zhì)量確認(rèn)

效期內(nèi)是

貯藏條件

是否正常 報(bào)告是 否 有 無(wú) 有 無(wú)配制日期

配制編號(hào)

配制量

分裝數(shù)量配制確認(rèn)結(jié)論：確認(rèn)人 日期復(fù)核人 日期4：滅菌效果確認(rèn)表PAGE1024頁(yè)滅菌時(shí)間 培養(yǎng)基名稱體培養(yǎng)基體培養(yǎng)基體培養(yǎng)基體培養(yǎng)基體培養(yǎng)基體培養(yǎng)基

培養(yǎng)基配制編號(hào) 接受標(biāo)準(zhǔn) 指示卡實(shí)驗(yàn)結(jié)指示卡達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)黑色以上

是否符合要是 否指示卡粘貼處指示卡粘貼處指示卡粘貼處結(jié)論：確認(rèn)人 日期復(fù)核人 日期5：包裝、儲(chǔ)藏條件確認(rèn)PAGE1124頁(yè)是否符合要求是否符合要求確認(rèn)項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)確認(rèn)結(jié)果是否滅菌后的無(wú)菌檢查用專用瓶完好無(wú)裂紋，膠塞密包裝閉完好，螺紋蓋完好無(wú)裂紋。儲(chǔ)藏條件2～10℃，避光結(jié)論：確認(rèn)人日期復(fù)核人日期6：pHPAGE1224頁(yè)培養(yǎng)基名稱 配制編

pH值（25℃）0天 1天 2天 3天 4天 5天培養(yǎng)基培養(yǎng)基接受標(biāo)準(zhǔn)：硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基滅菌后在25℃的pH值為7.1±0.2；胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基滅菌后在25℃的pH值為7.3±0.2.結(jié)論：確認(rèn)人 日期復(fù)核人 日期7：菌種確認(rèn)表PAGE1324頁(yè)菌種名稱菌種名稱菌種標(biāo)準(zhǔn)號(hào)工作菌種編號(hào)來(lái)源傳代次數(shù)結(jié)論：確認(rèn)人日期復(fù)核人日期8-PAGE1：培養(yǎng)基無(wú)菌性檢查確認(rèn)表培養(yǎng)基名稱配制編號(hào)結(jié)果保存時(shí)間01020304050607 08 0第0天第1天第2天第3天第4天第5天第0天第1天硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基23第4天第5天第0天第1天第2天第3天第4天第5天確認(rèn)人日期復(fù)核人日期第14頁(yè)共24頁(yè)8-PAGE2：培養(yǎng)基無(wú)菌性檢查確認(rèn)表培養(yǎng)基名稱 配制編胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基

012345012345012345

結(jié)果01 02 03 04 05 06 07 08 0檢查標(biāo)準(zhǔn)接受標(biāo)準(zhǔn)結(jié)論：

硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基在30～35℃培養(yǎng)，胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基在20～25℃培養(yǎng)，培養(yǎng)14菌生長(zhǎng)用“-”表示。在14天內(nèi)應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。確認(rèn)人 日期復(fù)核人 日期第15頁(yè)共24頁(yè)9-PAGE1：培養(yǎng)基靈敏度檢查確認(rèn)表確認(rèn)人復(fù)核人確認(rèn)人復(fù)核人日期日期培養(yǎng)基配制編號(hào)保存時(shí)間菌種計(jì)數(shù)金黃色葡萄球菌靈敏度檢查結(jié)果生孢梭菌0天接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1培養(yǎng) 結(jié)果1天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1培養(yǎng) 結(jié)果2天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng) 結(jié)果培養(yǎng)基3天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1培養(yǎng) 結(jié)果4天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1培養(yǎng) 結(jié)果5天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1培養(yǎng) 結(jié)果第16頁(yè)共24頁(yè)9-PAGE2：培養(yǎng)基靈敏度檢查確認(rèn)表確認(rèn)人復(fù)核人確認(rèn)人復(fù)核人日期日期培養(yǎng)基配制編號(hào)保存時(shí)間菌種計(jì)數(shù)金黃色葡萄球菌靈敏度檢查結(jié)果生孢梭菌0天接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1培養(yǎng) 結(jié)果1天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1培養(yǎng) 結(jié)果2天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng) 結(jié)果培養(yǎng)基3天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1培養(yǎng) 結(jié)果4天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1培養(yǎng) 結(jié)果5天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1培養(yǎng) 結(jié)果第17頁(yè)共24頁(yè)9-PAGE3：培養(yǎng)基靈敏度檢查確認(rèn)表確認(rèn)人復(fù)核人確認(rèn)人復(fù)核人日期日期培養(yǎng)基配制編號(hào)保存時(shí)間菌種計(jì)數(shù)金黃色葡萄球菌靈敏度檢查結(jié)果生孢梭菌0天接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1培養(yǎng) 結(jié)果1天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1培養(yǎng) 結(jié)果2天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng) 結(jié)果培養(yǎng)基3天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1培養(yǎng) 結(jié)果4天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1培養(yǎng) 結(jié)果5天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）1 2 312 3 1培養(yǎng) 結(jié)果第18頁(yè)共24頁(yè)9-PAGE4：培養(yǎng)基靈敏度檢查確認(rèn)表確認(rèn)人確認(rèn)人復(fù)核人日期日期培養(yǎng)基配制編號(hào)保存時(shí)間菌種計(jì)數(shù)枯草芽孢桿菌靈敏度檢查結(jié)果白色念珠菌0天接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51培養(yǎng) 結(jié)果1天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51培養(yǎng) 結(jié)果2天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51胰酪大豆胨液體培養(yǎng) 結(jié)果培養(yǎng)基3天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51培養(yǎng) 結(jié)果4天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51培養(yǎng) 結(jié)果5天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51培養(yǎng) 結(jié)果第19頁(yè)共24頁(yè)9-PAGE5：培養(yǎng)基靈敏度檢查確認(rèn)表確認(rèn)人確認(rèn)人復(fù)核人日期日期培養(yǎng)基配制編號(hào)保存時(shí)間菌種計(jì)數(shù)枯草芽孢桿菌靈敏度檢查結(jié)果白色念珠菌0天接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51培養(yǎng) 結(jié)果1天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51培養(yǎng) 結(jié)果2天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51胰酪大豆胨液體培養(yǎng) 結(jié)果培養(yǎng)基3天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51培養(yǎng) 結(jié)果4天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51培養(yǎng) 結(jié)果5天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51培養(yǎng) 結(jié)果第20頁(yè)共24頁(yè)9-PAGE6：培養(yǎng)基靈敏度檢查確認(rèn)表培養(yǎng)基配制編號(hào)保存時(shí)間菌種計(jì)數(shù)枯草芽孢桿菌靈敏度檢查結(jié)果白色念珠菌0天接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51培養(yǎng) 結(jié)果1天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51培養(yǎng) 結(jié)果2天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51胰酪大豆胨液體培養(yǎng) 結(jié)果培養(yǎng)基3天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51培養(yǎng) 結(jié)果4天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51培養(yǎng) 結(jié)果5天計(jì)數(shù)接種 時(shí)（天）12 31 2 3 4 51培養(yǎng) 結(jié)果檢查標(biāo)準(zhǔn)接受標(biāo)準(zhǔn)結(jié)論

加金黃色葡萄球菌、生孢梭菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)基管30～35℃培養(yǎng)3天，白色念