血脂四項(xiàng)測(cè)定

關(guān)于血脂四項(xiàng)測(cè)定第1頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2023/5/212血漿中所含脂類統(tǒng)稱為血脂，血脂含量可以反映體內(nèi)脂類代謝的情況。檢測(cè)血脂時(shí)，常在飯后12-14小時(shí)采血。我國(guó)血脂異常防治建議和美國(guó)國(guó)家膽固醇教育計(jì)劃成人治療計(jì)劃Ⅲ（NCEP-ATPⅢ）都要求臨床常規(guī)血脂測(cè)定中應(yīng)至少測(cè)定TC、TG、HDL-C及LDL-C這四項(xiàng)。有條件的實(shí)驗(yàn)室可測(cè)定apoAI、apoB及Lp(a)。第2頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2023/5/213【目的要求】掌握：TC、HDL-C、LDL-C、TG測(cè)定的基本原理。熟悉：TC、HDL-C、LDL-C、TG測(cè)定的操作過(guò)程。了解：TC、HDL-C、LDL-C、TG測(cè)定對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化、原發(fā)性高脂血癥等疾病診斷的臨床意義。第3頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2023/5/214實(shí)驗(yàn)原理---總膽固醇測(cè)定（膽固醇氧化酶-過(guò)氧化物酶法）膽固醇酯+H2O膽固醇+脂肪酸膽固醇+1/202+H2O△4-膽甾烯-3-酮+H2022H202+4-氨基安替比林+酚醌亞胺+4H2O膽固醇酯酶膽固醇氧化酶過(guò)氧化物酶樣品中游離及脂化的膽固醇，經(jīng)過(guò)上述反應(yīng)產(chǎn)生醌亞胺，在505nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度值，計(jì)算其含量。第4頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2023/5/215實(shí)驗(yàn)原理---HDL-C測(cè)定加入低密度脂蛋白膽固醇的抑制劑，將低密度和極低密度部分隱蔽起來(lái)，直接測(cè)定高密度部分的膽固醇含量，顯色反應(yīng)原理同總膽固醇，在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值，計(jì)算其含量。LDL-C能與磷鎢酸-鎂和聚乙二醇復(fù)合劑作用產(chǎn)生沉淀，用分散劑可使沉淀顆粒細(xì)小均一，在630nm處測(cè)定其吸光度值，計(jì)算其含量。實(shí)驗(yàn)原理---LDL-C測(cè)定第5頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2023/5/216實(shí)驗(yàn)原理---TG測(cè)定（甘油磷酸氧化酶-過(guò)氧化物酶法）2H202+EHSPT+4-AAP脂蛋白脂酶甘油激酶過(guò)氧化物酶甘油三酯+H2O甘油+脂肪酸甘油+ATP3-磷酸甘油+ADP3-磷酸甘油+O23-磷酸甘油氧化酶磷酸二羥丙酮+H202醌亞胺+4H2O第6頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2023/5/217主要試劑總膽固醇測(cè)定試劑試劑1：Na2HPO4﹒12H2O、KH2PO4、苯酚、膽酸鈉，NaN3；試劑2：MOPSO、NaOH、NaN3、

MgCL2﹒6H2O、4-氨基安替比林、EDTA-Na2、BSA、CE、CO、POD、液體活性劑Ⅰ。TG測(cè)定試劑試劑1：

PIPES、CAPOS、BSA、MgCl2、甘油激酶、3-磷酸甘油氧化酶、過(guò)氧化物酶、顯色劑Ⅰ、顯色劑Ⅱ、NaN3；試劑2：

PIPES、CAPOS、BSA、GYK、4-APP、顯色劑Ⅱ、NaN3。第7頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2023/5/218主要試劑、器材HDL-C測(cè)定試劑試劑1：磷酸鹽緩沖劑、LDL-C抑制劑、DHBS；試劑2：膽固醇酯酶、膽固醇氧化酶、過(guò)氧化物酶、4-APP。LDL-C測(cè)定試劑試劑：

磷鎢酸、氫氧化鈉。器材：分光光度計(jì)、半自動(dòng)生化分析儀、恒溫水浴箱、微量進(jìn)樣器、移液管等。待測(cè)標(biāo)本：血清第8頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2023/5/2191、將試劑1與試劑2按1:1比例混勻?yàn)楣ぷ饕骸?、按表格加樣。加入物（ml）空白管(B)標(biāo)準(zhǔn)管(S)測(cè)定管(U)血清--0.02標(biāo)準(zhǔn)液-0.02-蒸餾水0.02--工作液2.02.02.03、比色

：混勻各管，置37℃水浴10min，用分光光度計(jì)比色，波長(zhǎng)505nm，光徑1.0cm，以空白管調(diào)零，記錄各管的吸光度值?？偰懝檀紲y(cè)定步驟第9頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2023/5/21101、將試劑1與試劑2按10:1比例混勻?yàn)楣ぷ饕骸?、按表格加樣。加入物（ml）空白管(B)標(biāo)準(zhǔn)管(S)測(cè)定管(U)血清--0.02標(biāo)準(zhǔn)液-0.02-蒸餾水0.02--工作液2.02.02.03、比色

：混勻各管，置37℃水浴10min，用分光光度計(jì)比色，波長(zhǎng)510nm，光徑1.0cm，以空白管調(diào)零，記錄各管的吸光度值。HDL-C測(cè)定步驟第10頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2023/5/21111、按表格加樣。加入物空白管(B)標(biāo)準(zhǔn)管(S)測(cè)定管(U)血清（ul）--50標(biāo)準(zhǔn)液（ul）-50-蒸餾水（ul）50--工作液（ml）3.03.03.02、比色

：混勻各管，室溫放置3min，用分光光度計(jì)比色，波長(zhǎng)630nm，光徑1.0cm，以空白管調(diào)零，記錄各管的吸光度值。LDL-C測(cè)定步驟第11頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2023/5/2112TG測(cè)定步驟加入物（ml）空白管(B)標(biāo)準(zhǔn)管(S)測(cè)定管(U)試劑R10.80.80.8血清--0.01標(biāo)準(zhǔn)液-0.01-蒸餾水0.01--充分混勻，37℃水浴5min試劑R20.20.20.2充分混勻，37℃水浴5min1、按表格加樣。2、上機(jī)，儀器設(shè)置：37℃，波長(zhǎng)546nm，以空白管調(diào)零，記錄各管的吸光度值。第12頁(yè)，課件共14頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2023/5/2113計(jì)算：按下列公式計(jì)算A測(cè)

A標(biāo)×

C標(biāo)C測(cè)=指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品濃度參考范圍線性范圍TC4.20mmol/L＜5.17mmol/L0-20.69mmol/LHDL-C2.60mmol/L0.7-2.00mmol/L0.65-2.6mmol/LL