制藥溶出方法有效性評價

制藥溶出方法有效性評價第一頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出分析課程導(dǎo)言溶出裝置類型轉(zhuǎn)藍(lán)法與漿葉法的合格評價(裝置-1與裝置-2)溶出方法的建立溶出方法的驗(yàn)證分析自動化常見問題和解決方案第二頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五導(dǎo)言課程目標(biāo)溶出方法背景的理解溶出的目的影響溶出的規(guī)范溶出方法的驗(yàn)證常見問題和解決方案第三頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五內(nèi)容范圍合成的小分子藥物溶出方法的嚴(yán)正因階段不同而不同符合國際藥品協(xié)調(diào)組織(ICH)申報規(guī)定的新藥和簡化藥物第四頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五背景-1五十年代中期—體外實(shí)驗(yàn)方法的建立，目標(biāo)是建立藥物的生物等效性標(biāo)準(zhǔn)1970年P(guān)ERNARWOSKI提出的搖藍(lán)法在美國藥典中采納搖藍(lán)法對某些劑型不適用POOLE提出漿葉法作為一種可供選擇的方法從此溶出方法成為表征藥物性能的一種很有價值的體外方法第五頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五背景-2定義溶出方法的功用檢察藥物物化性質(zhì)的改變檢察藥物在制劑和生產(chǎn)過程中的變化IVIVC可以了解不同劑型的藥物釋放速度

第六頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出方法課程導(dǎo)言溶出裝置類型轉(zhuǎn)藍(lán)法與漿葉法的合格評價(裝置-1與裝置-2)溶出方法的建立溶出方法的驗(yàn)證-分析-自動化常見問題和解決方案第七頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五容溶出裝置-1裝置-1:也稱為藍(lán)子，該裝置包含一個帶蓋的用玻璃或者其它惰性透明的材料制作的容器、一個馬達(dá)、一個金屬驅(qū)動軸和一個筒壯的藍(lán)子第八頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出裝置1(圖示)第九頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出裝置2溶出裝置-2：也稱作漿葉，與轉(zhuǎn)藍(lán)裝置相同，但是包含一個由一個刀片組成的漿葉，軸則用于攪拌單元第十頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出裝置-2(圖示)第十一頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出裝置-3溶出裝置：也稱作往復(fù)式圓缸，包含一套圓筒形狀、扁平底部的玻璃容器，一套玻璃往復(fù)式圓缸、不銹鋼配件（316類型或相當(dāng)型號）、一些用不吸附和反應(yīng)惰性材料制作并適合安裝在往復(fù)式圓缸兩端的視窗、一個使圓缸在玻璃容器內(nèi)做往復(fù)運(yùn)動的馬達(dá)和驅(qū)動裝置、以及水平附加在不同排的容器上的網(wǎng)復(fù)式圓缸。第十二頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出裝置-3(圖示)第十三頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出裝置-4溶出裝置-4：也稱作穿流池，該裝置包含一個容器和一個傳輸溶出介質(zhì)的泵、一個穿流池和一個可以保持溶出介質(zhì)在37±0.5°C.的恒溫水浴。第十四頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出裝置-4(圖示)第十五頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出裝置-5溶出裝置-5：也稱作圓盤上置漿葉，是在溶出裝置-2的基礎(chǔ)上，增加一個裝載容器之下用來支撐透皮吸收系統(tǒng)的一個不銹鋼圓盤。第十六頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出裝置-5(圖示)第十七頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出裝置-6溶出裝置-6：也稱做圓缸，在裝置-1的基礎(chǔ)上，把藍(lán)子和軸用一個不銹鋼圓筒狀攪拌單元來取代，并在測試過程中保持37±0.5°C恒溫。.第十八頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出裝置-6(圖示)第十九頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出裝置-7溶出裝置-7：也稱作往復(fù)式承受裝置，包含一套體積校正過的用玻璃或其它惰性材料制作的溶液容器、一個使圓缸在玻璃容器內(nèi)做垂直往復(fù)運(yùn)動并指示系統(tǒng)相對于不同排的容器的水平位置的馬達(dá)和驅(qū)動裝置、以及一套樣品支撐裝置。第二十頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出裝置-7(圖示)第二十一頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出分析課程導(dǎo)言溶出裝置類型轉(zhuǎn)藍(lán)法與漿葉法的合格評價(裝置-1與裝置-2)溶出方法的建立溶出方法的驗(yàn)證分析自動化常見問題和解決方案第二十二頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五裝置的合格評價1/2合格評價的背景知識安裝的合格性評價操作的合格性評價性能的合格性評價第二十三頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五合格評價的背景確保溶出裝置在使用中保持高度的一致性能和準(zhǔn)確性能美國FDA-cGMP規(guī)定要求按照已經(jīng)建立的書面程序?qū)?shí)驗(yàn)室儀器進(jìn)行定期校正合格性評價系列內(nèi)容安裝的合格性評價操作的合格性評價性能的合格性評價第二十四頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五安裝的合格性評價校正被校正裝置中的特殊部位SOPs支持系統(tǒng)計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)周邊條件設(shè)備資訊第二十五頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五操作的合格性評價系統(tǒng)的適用性被校正裝置中的特殊部件自動-手動程序第二十六頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五性能的合格性評價轉(zhuǎn)速晃動軸中調(diào)節(jié)溫度漿葉高度振動拆解片劑非拆解片劑盡管沒有對“定期”或”合適的區(qū)間”有精確定義，但是在藥廠中普遍每6個月對儀器進(jìn)行一次校正。第二十七頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五轉(zhuǎn)速實(shí)際轉(zhuǎn)速應(yīng)該不超過設(shè)定轉(zhuǎn)速的±4%。這可以用一個機(jī)械或光學(xué)測速表來檢驗(yàn)。第二十八頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五晃動說明書要求每一個軸的中線不能超出溶出燒杯中的圓筒中線1毫米?；蝿赢a(chǎn)生的位移如果不超過2毫米就滿足溶出裝置的說明要求。第二十九頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五軸中軸中-轉(zhuǎn)動的軸中線不應(yīng)該超離溶出裝置軸中線的±2毫米這可以用一般的測中儀檢驗(yàn)。第三十頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溫度每一個容器都需要保持37°C±0.5°C的恒溫。這可以用校正過的NIST溫度計(jì)來檢測。第三十一頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五漿葉/籃體高度漿葉或籃體高度應(yīng)該以可同時容納所有轉(zhuǎn)軸的高度為準(zhǔn)。注意要保持測表在一個垂直位置上。第三十二頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五振動采用穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)臺或桌子來減少振動。減少震動使用風(fēng)扇、泵等振動部件的機(jī)械設(shè)備不應(yīng)該放置在附近。第三十三頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五校正用藥片分解片劑強(qiáng)的松片劑10毫克新版USP批號非分解片劑水楊酸片劑300毫克新版USP批號第三十四頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五校正過程的誤差來源介質(zhì)的不平衡（例如除氣泡問題）使用即時平衡后的介質(zhì)機(jī)械和振動問題搬離振動原如風(fēng)善、泵等軸偏斜自動化經(jīng)常進(jìn)行相應(yīng)的手動對比檢驗(yàn)第三十五頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五校正過程的誤差來源片劑把校正同用藥片儲藏在原裝容器并放置在干燥的環(huán)境參比標(biāo)準(zhǔn)使用最近批號的USP參比標(biāo)準(zhǔn)并適當(dāng)干燥過濾不要使用離心

立即過濾塊狀物漿葉和籃檢查轉(zhuǎn)軸和蒸發(fā)蓋第三十六頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五美國藥典裝置-1第三十七頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五美國藥典裝置-2

第三十八頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出方法的建立涉及一個”2步驟”過程樣品制備樣品分析樣品既或可直接分析,或在分析前進(jìn)行進(jìn)一步的處理新化學(xué)實(shí)體藥物(NCEs)通常制劑成片劑或膠囊線性拓延將用于評價更特殊的藥物傳輸系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)膠囊和片劑使用常見的美國藥典裝置-1(漿葉裝置)或裝置-2(轉(zhuǎn)籃裝置)第三十九頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五樣品制備總論-1

把500-1000毫升的溶出介質(zhì)引入

容器之中保持溫度37±0.5oC檢測整個裝置（轉(zhuǎn)籃或者漿葉）與轉(zhuǎn)軸的協(xié)調(diào)把裝置調(diào)節(jié)到特定轉(zhuǎn)速按照法定程序，檢測整個裝置與轉(zhuǎn)軸的接合覆蓋容器避免溶出介質(zhì)蒸發(fā)第四十頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五樣品制備總論-2使用轉(zhuǎn)籃法時，樣品需置放于干燥的籃中，并使籃與偶合盤協(xié)調(diào)，然后調(diào)低到特定位置并立即開始轉(zhuǎn)動使用漿葉法時，樣品可以浸入容器底部，并按照特定轉(zhuǎn)速立即開動如果需要使用浸泡器，樣品先放入浸泡器中，并使得浸泡器可以浸入容器底部小心收集樣品，過濾然后分析濾出液計(jì)算在特定時間內(nèi)溶解的樣品數(shù)量并按照百分比進(jìn)行標(biāo)定第四十一頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五漿葉法與轉(zhuǎn)籃法的藥典要求-1第四十二頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五漿葉法與轉(zhuǎn)籃法的藥典要求-2第四十三頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五漿葉法與轉(zhuǎn)籃法的藥典要求-3第四十四頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五漿葉法與轉(zhuǎn)籃法的藥典要求-4第四十五頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五漿葉法與轉(zhuǎn)籃法的藥典要求-5第四十六頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五漿葉法與轉(zhuǎn)籃法的藥典要求-6第四十七頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五漿葉法與轉(zhuǎn)籃法的藥典要求-7第四十八頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五漿葉法與轉(zhuǎn)籃法的藥典要求-8

注意事項(xiàng):美國藥典允許1、2、4升的額定容積，歐洲藥典和日本藥典不允許美國藥典要求使用拆解和非拆解藥片來校正裝置，歐洲和日本藥典則不必各藥典允許的添加劑不一樣各藥典要求的浸泡器不一樣按照法定程序測試整個裝置相對于轉(zhuǎn)軸的協(xié)調(diào)數(shù)據(jù)解釋：美國藥典

S1,S2,S3相對于

歐洲/日本藥典第四十九頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五漿葉法與轉(zhuǎn)籃法的藥典要求-9注意事項(xiàng):某些特征用于溶出裝置的普通性能的系統(tǒng)檢查。第五十頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五根據(jù)制劑參數(shù)選擇裝置/介質(zhì)-1制劑的自然屬性決定溶出裝置的類型藥品的表態(tài)：片劑還是膠囊?需要浸泡器吧？在溶出介質(zhì)中DS有多穩(wěn)定？是IR劑型還是ER劑型？是透皮吸收貼片嗎？第五十一頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五根據(jù)制劑參數(shù)選擇裝置/介質(zhì)-2美國藥典1、2通常適用于IR劑型美國藥典3通常適用于ER劑型、緩釋規(guī)格（多重pH和時間點(diǎn)）低劑量DP可以通過低體積（例如100-200毫升容器）測試方法進(jìn)行穿流分析一個裝置一旦選定后且證明是合適的，在驗(yàn)證過程中不需要做進(jìn)一步的評價第五十二頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五根據(jù)制劑參數(shù)選擇裝置/介質(zhì)-3常用介質(zhì)：水、0.1NHCl,各種pH緩沖液水-常用，但是應(yīng)該盡量避免使用原因：pH值易受制劑組分影響，致使數(shù)據(jù)改變0.1NHCl–常用原因：可以模仿胃部的酸性環(huán)境第五十三頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五根據(jù)制劑參數(shù)選擇裝置/介質(zhì)-4其它介質(zhì):pH4.5或6.8的緩沖液水–常用，但是應(yīng)該盡量避免使用模仿病人（空腹或滿腹）期望的胃部狀況改進(jìn)緩釋數(shù)據(jù)和/或減少歧義表面活性劑(例如聚山梨醇酯80)加入后以改進(jìn)溶出特性第五十四頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五影響選擇介質(zhì)的因素DS的溶解度制劑劑型的自然屬性藥物分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)DS物理化學(xué)結(jié)構(gòu)第五十五頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出介質(zhì)的除氣泡-1除氣泡之所以重要是因?yàn)闅馀菘梢杂绊慏S的釋放速度溶出方法原則上應(yīng)該與除氣泡無關(guān)減少除氣泡的影響:需要通過實(shí)驗(yàn)來說明除氣泡程度的不同將不會嚴(yán)重地改變結(jié)果表面活性劑不應(yīng)該除氣泡3個技術(shù):真空過濾、氦氣驅(qū)氣泡、加熱和超聲第五十六頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出介質(zhì)的除氣泡-2真空：

常在加熱/非加熱過濾后，采用水管吸氣法建立低真空水壓改變和抽真空時間的不同會影響除氣泡效果氦氣驅(qū)氣泡:如同在HPLC儀器中驅(qū)趕和置換空氣驅(qū)氣泡時間比較重要加熱：很少采用。

加熱介質(zhì)超過37°C并施以同時攪拌驅(qū)趕溶解的空氣溫度和時間區(qū)間很重要超聲波第五十七頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出介質(zhì)的除氣泡-3氧氣水平可以用來指示除氣泡的有效程度除氣泡應(yīng)該在介質(zhì)使用前進(jìn)行。如果無法在使用前進(jìn)行，需要建立一套氧氣水平、除氣泡和時間的試驗(yàn)數(shù)據(jù)。第五十八頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五轉(zhuǎn)動速度籃子的轉(zhuǎn)速可達(dá)每分鐘1000轉(zhuǎn)，漿葉常用每分鐘5-75轉(zhuǎn)。在驗(yàn)證期間，轉(zhuǎn)速改變±10%以便測試可以方法的穩(wěn)定性第五十九頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五樣品收集-1需要考慮的因素從溶出容器中取等量的樣品過濾等量的樣品自動取樣相對于手動取樣需要建立取樣的等當(dāng)性質(zhì)在自動取樣中從試管中轉(zhuǎn)移取樣時要把偏差控制在可以接受的水平。第六十頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五樣品收集-2根據(jù)程度不同，實(shí)施一個減少樣品轉(zhuǎn)移的過程方法。試管吸附會造成取樣誤差，因此可以僅限于手工取樣。取樣管可以改變?nèi)萜髦械牧黧w力學(xué)在比較自動和手動取樣時需要考慮原則上，取樣管只在取樣時沒入容器中第六十一頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五過濾不溶解輔料需要在分析前過濾掉應(yīng)該進(jìn)行并紀(jì)錄適當(dāng)?shù)幕厥找詸z查偏差原因取樣后應(yīng)立即進(jìn)行過濾第六十二頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五采用非美國藥典做法的效應(yīng)在方法建立或驗(yàn)證過程中需要涉及一些非法定做法（例如采用非額定的容器和浸泡器）為什么一定要采用非法定裝置需要加以說明和論證第六十三頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五清洗的驗(yàn)證通過使用”空白”操作來確定容器的清洗程序是恰當(dāng)?shù)莫?dú)特的清洗程序需要在方法建立和驗(yàn)證時鑒定并包括在最后的測試程序中第六十四頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五取樣程式化-1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)可以用于最后的驗(yàn)證步驟將可以研究所有或部分前面討論的參數(shù)通過表格4.4來說明總結(jié)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)數(shù)據(jù)第六十五頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五取樣程式化-2第六十六頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出方法的驗(yàn)證提綱目的和策略重要的嚴(yán)正參數(shù)溶出重要事項(xiàng)樣品分析重要事項(xiàng)例子第六十七頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出測試的目的檢察制劑和過程的變化(質(zhì)量控制)比較具有不同制劑和過程的藥品(產(chǎn)品開發(fā))溶出的速度(體外)應(yīng)該可以反映高藥物在人體(體內(nèi))釋放/吸收的速度第六十八頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出方法驗(yàn)證的策略-1驗(yàn)證是對一種設(shè)定的測試方法的性能進(jìn)行評估一套完整的數(shù)據(jù)結(jié)果可以支持該測試方法在其應(yīng)用領(lǐng)域的適用性需要一個明確設(shè)定的計(jì)劃來確保獲得有效的、完整的和沒有偏差的一套驗(yàn)證數(shù)據(jù)計(jì)劃需要包括策略、實(shí)驗(yàn)和標(biāo)準(zhǔn)第六十九頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出方法驗(yàn)證的策略-2策略確定哪些性能特征藥品需要評估實(shí)驗(yàn)如何評估每一個性能特征標(biāo)準(zhǔn)期望的最低性能標(biāo)準(zhǔn)是什么？第七十頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五溶出方法驗(yàn)證的策略-3驗(yàn)證方案高度推薦首先定義實(shí)驗(yàn)和接受的標(biāo)準(zhǔn)方案的實(shí)驗(yàn)包括樣品制備和樣品分析的評估第七十一頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五驗(yàn)證要求特征

要求 特征 要求準(zhǔn)確度

+

檢測極限 -精確度

定量極限 -

重復(fù)性

+

中間態(tài)

+1 線性

+專屬性 +

范圍

++ 表示該特征通常需要評估表示該特征通常不需要評估-1

進(jìn)行了重復(fù)性檢查，中間態(tài)精確度就不需要做了第七十二頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五驗(yàn)證的重要參數(shù)溶出不同的除氣泡方法pH對介質(zhì)的效應(yīng)不同的每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)自動相對于手動取樣（過濾方式）采用非美國藥典做法的效應(yīng)(例如使用非額定容器、蒸發(fā)氣帽、不同的浸泡器等)清洗第七十三頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五驗(yàn)證的重要參數(shù)高效液相色譜HPLC/紫外光譜UV分析線性準(zhǔn)確度精確度范圍穩(wěn)定性專屬性第七十四頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五驗(yàn)證參數(shù)分析線性使用新鮮的標(biāo)準(zhǔn)溶液來覆蓋要測的濃度范圍單時間點(diǎn)數(shù)據(jù)收集25%到125%響應(yīng)對濃度作圖視圖檢查、相關(guān)系數(shù)檢查、剩余誤差平方和檢查、Y軸截距檢查第七十五頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五驗(yàn)證參數(shù)分析線性修改釋放產(chǎn)物的溶出情況:在規(guī)定范圍的+/-20%(例如，對于20%到90%的釋放情況，線性范圍應(yīng)該在0%到110%之間)第七十六頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五驗(yàn)證參數(shù)分析準(zhǔn)確度使用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行溶出測試(例如安慰劑）確定因取樣和分析溶液造成的任何偏差對于溶出情況，需要在不同濃度下來確定準(zhǔn)確度理論%第七十七頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五驗(yàn)證參數(shù)分析

精確度重復(fù)性：

六次重復(fù)使用相同的儀器（n=6)中間精度：使用不同的一起做不同的分析（2xn=6）不能區(qū)別方法差異與藥片到藥片的差異精確度最壞的情況（包含有藥片到藥片、取樣和分析的差異）第七十八頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五驗(yàn)證參數(shù)分析精確度修改釋放融溶出情況：確定多時間點(diǎn)的數(shù)據(jù)收集標(biāo)量化數(shù)據(jù)消除一個藥片到另一個藥片的偏差一個批號到另一個批號的偏差只能在研究階段使用第七十九頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五驗(yàn)證參數(shù)分析標(biāo)量化(以一個藥片到另一個藥片的偏差為例）時間%溶出百分比第八十頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五驗(yàn)證參數(shù)分析標(biāo)量化(一個批號到另一個批號的偏差)第八十一頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五驗(yàn)證參數(shù)分析適用范圍:從數(shù)據(jù)結(jié)果的線性、準(zhǔn)確度、精確度幾個方面決定方法的適用范圍單點(diǎn)溶出適用范圍跨度從25%到125%修改釋放制劑的溶出情況下允許在規(guī)定范圍的+/-20%第八十二頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五驗(yàn)證參數(shù)分析穩(wěn)定性高效液相色譜（HPLC）分析柱子、流動相、波長類似于HPLC強(qiáng)度/相關(guān)物質(zhì)純度溶液穩(wěn)定性在不同日子分析溶液在相同日子分析陳溶液和新鮮溶液第八十三頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五驗(yàn)證參數(shù)分析RobustnessUVanalysiswavelengthaccuracy,wavelengthrepeatabilitydilutingsolvent(pH,concentration)solutionstabilitybubbleformationinzipper第八十四頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五驗(yàn)證參數(shù)分析專屬性HPLC分析:排除輔料和系統(tǒng)干擾所能達(dá)到的對藥物的分辨率UV分析：安慰劑對UV的吸收與方法穩(wěn)定性無關(guān)

第八十五頁，共九十七頁，編輯于2023年，星期五進(jìn)行方法驗(yàn)證前的注意事項(xiàng)溶出:使用哪種取樣方法(自動還