微生物免疫學(xué)實驗報告

..授課進(jìn)度 第 周，第 次課〔2學(xué)時〕授課日期 年月日授課題目(教學(xué)章、節(jié)細(xì)菌的形態(tài)學(xué)檢查〔一〕或主題)學(xué)會顯微鏡的使用，重點把握油鏡的使用與保護(hù)。教學(xué)進(jìn)一步生疏細(xì)菌的形態(tài)，明確細(xì)菌的大小與測量單位。目標(biāo)生疏細(xì)菌的特別構(gòu)造。油鏡的觀看和使用教學(xué)重點油鏡的觀看和使用教學(xué)難點請選擇你授課時所承受的教學(xué)方法〔在括號中畫“√〞講授法﹝﹞，爭論法﹝﹞，演示法﹝﹞，案例法﹝﹞，覺察法﹝﹞，探究法﹝﹞，教學(xué)談話法﹝﹞，試驗法﹝√﹞，參觀法﹝﹞，考察法﹝﹞，自學(xué)輔導(dǎo)法﹝﹞，練習(xí)方法法〔習(xí)題或操作課〕﹝﹞，讀書指導(dǎo)法﹝﹞，聽說法﹝﹞，寫生法﹝﹞，視唱法﹝﹞，工序法〔技能課〕﹝﹞，實習(xí)作業(yè)法﹝﹞，其他﹝﹞請選擇你授課時所承受的教學(xué)手段〔在括號中畫“√〞教學(xué)實物﹝﹞﹝﹞﹝﹞﹝﹞I課件﹝﹞﹝﹞√﹞，手段掛圖﹝﹞，模型﹝﹞，其他﹝﹞試驗報告討論、思考題、作業(yè)參考【M】.北京.科學(xué)出版社.2023年.文獻(xiàn)【M】.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)出版社，2023試驗內(nèi)容：顯微鏡油鏡的使用與保護(hù)。細(xì)菌的形態(tài)與構(gòu)造的觀看。試驗?zāi)康模簩W(xué)會顯微鏡的使用，重點把握油鏡的使用與保護(hù)。進(jìn)一步生疏細(xì)菌的形態(tài)，明確細(xì)菌的大小與測量單位。生疏細(xì)菌的特別構(gòu)造。試驗材料：顯微鏡、擦鏡紙、液體石蠟、消毒液、細(xì)菌的根本形態(tài)標(biāo)本、細(xì)菌的特別構(gòu)造標(biāo)本。4 試驗方法：顯微鏡油鏡的使用與保護(hù)顯微鏡是一種貴重的光學(xué)儀器，而油鏡又是顯微鏡的最周密局部，是觀看細(xì)菌最重要的工具。因此，要求大家必需嫻熟地把握顯微鏡的使用和保護(hù)，尤其是油鏡，防止損壞。識別油鏡：95╳、100╳、HI、OeL。對好光源后，染色標(biāo)本將聚光器上升，光圈放開。3、調(diào)整焦距：選一張細(xì)菌染色標(biāo)本置于載物臺上，用推動器固定，用低倍鏡先找準(zhǔn)物象，再用高倍鏡看清物體，于標(biāo)本上加鏡油一滴。免損壞油鏡。⑵用左眼從接目鏡觀看，緩緩向上轉(zhuǎn)動粗螺旋調(diào)整器，見模糊物象后，再用細(xì)螺旋調(diào)整器，直到物象完全清楚為止。4、顯微鏡的保護(hù)：二甲苯擦拭，再用干擦鏡紙擦去二甲苯，以防二甲苯鏡頭上的固定膠，致使鏡片脫落。⑵顯微鏡的光學(xué)局部應(yīng)防止日光直射。防止接觸強(qiáng)酸、強(qiáng)鹼、氯仿、酒精。上，雙手端平送入鏡箱內(nèi)。置于枯燥處，以防受潮。(二)細(xì)菌形態(tài)觀看1、細(xì)菌的根本形態(tài)；球菌：肺炎球菌、腦膜炎球菌、葡萄球菌、鏈球菌桿菌：大腸桿菌、炭疽桿菌、結(jié)核桿菌、白喉桿菌弧菌：霍亂弧菌2、細(xì)菌的特別構(gòu)造：莢膜：肺炎球菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌鞭毛：水弧菌〔周毛菌〕芽胞：破傷風(fēng)桿菌〔芽胞位于菌體頂端，呈鼓槌狀〕授課進(jìn)度授課進(jìn)度第周，第次課〔2 學(xué)時〕授課日期年月日授課題目或主題)細(xì)菌的形態(tài)學(xué)檢查〔二〕進(jìn)一步了解細(xì)菌特別構(gòu)造在鑒別細(xì)菌過程中的有用意義。教學(xué)把握革蘭染色的操作法，充分生疏革蘭染色的臨床意義。目標(biāo)革蘭染色的操作法教學(xué)重點革蘭染色的操作法教學(xué)難點講授法﹝﹞，爭論法﹝﹞，演示法﹝﹞，案例法﹝﹞，覺察法﹝﹞，探究法﹝﹞，教學(xué)談話法﹝﹞，試驗法﹝√﹞，參觀法﹝﹞，考察法﹝﹞，自學(xué)輔導(dǎo)法﹝﹞，練習(xí)方法法〔習(xí)題或操作課〕﹝﹞，讀書指導(dǎo)法﹝﹞，聽說法﹝﹞，寫生法﹝﹞，視唱法﹝﹞，工序法〔技能課〕﹝﹞，實習(xí)作業(yè)法﹝﹞，其他﹝﹞教學(xué)實物課件﹝﹞，手段掛圖﹝﹞，模型﹝﹞，其他﹝√﹞試驗報告討論、思考題、作業(yè)參考文獻(xiàn)【M】.北京.科學(xué)出版社.2023年.【M】.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)出版社，2023一、試驗內(nèi)容：細(xì)菌標(biāo)本片的制備〔操作〕革蘭染色法〔操作〕二、試驗?zāi)康模哼M(jìn)一步了解細(xì)菌特別構(gòu)造在鑒別細(xì)菌過程中的有用意義。把握革蘭染色的操作法，充分生疏革蘭染色的臨床意義。三、試驗材料：革蘭染色液全套、擦鏡紙、二甲苯、大腸桿菌培育物、葡萄球菌培育物、生理鹽水、玻片、接種環(huán)、酒精燈。四、試驗方法：㈠細(xì)菌標(biāo)本片的制備〔操作〕1、涂片：點燃酒精燈；取干凈玻片一張，右手持接種環(huán)一酒精燈火焰中消毒，稍冷后取1－2環(huán)生理鹽水置于玻片中心；再次消毒后，用接種環(huán)取菌落中的細(xì)菌或菌液或標(biāo)本少許，在生理鹽水中涂勻制成約1cm左右的薄膜，并將接種環(huán)再次消毒后，置于試管架中。2細(xì)菌被破壞后染色效果差。3、固定：右手持玻片一端，標(biāo)本面對上，在酒精燈火焰上方快速地來回通過三次，2妙種。固定的目的是殺死細(xì)菌，使細(xì)菌與玻片粘附較嚴(yán)密。㈡革蘭染色法〔操作〕1、初染：滴加結(jié)晶紫染液于標(biāo)本上，以掩蓋滿為度，染1分鐘后水洗，灑去積水。2、媒染：加魯格碘液，媒染1分鐘后水洗，灑去積水。7脫色：加95％酒精脫色〔邊加酒精邊搖擺玻片，使酒精流去再加酒精，如此反復(fù)2－3次〕約30妙鐘后水洗，灑去積水。12復(fù)染：加復(fù)紅染液染30妙鐘后水洗，灑去積水，待干或用吸水紙吸干后鏡檢。先低倍鏡觀看效果，再用高倍鏡看清物象，滴加鏡油后用油鏡觀看。結(jié)果：G＋菌呈紫色，G－菌呈紅色。授課進(jìn)度授課進(jìn)度第周，第次課〔2 學(xué)時〕授課日期年月日授課題目或主題)細(xì)菌的培育及代謝產(chǎn)物的檢查生疏細(xì)菌的培育方法，進(jìn)一步把握人工培育細(xì)菌的臨床意義。教學(xué)了解細(xì)菌代謝產(chǎn)物在鑒別細(xì)菌中的意義。目標(biāo)培育基的制備教學(xué)重點細(xì)菌代謝產(chǎn)物教學(xué)難點講授法﹝﹞，爭論法﹝﹞，演示法﹝﹞，案例法﹝﹞，覺察法﹝﹞，探究法﹝﹞，教學(xué)談話法﹝﹞，試驗法﹝√﹞，參觀法﹝﹞，考察法﹝﹞，自學(xué)輔導(dǎo)法﹝﹞，練習(xí)方法法〔習(xí)題或操作課〕﹝﹞，讀書指導(dǎo)法﹝﹞，聽說法﹝﹞，寫生法﹝﹞，視唱法﹝﹞，工序法〔技能課〕﹝﹞，實習(xí)作業(yè)法﹝﹞，其他﹝﹞教學(xué)實物課件﹝﹞，手段掛圖﹝﹞，模型﹝﹞，其他﹝√﹞試驗報告討論、思考題、作業(yè)參考文獻(xiàn)【M】.北京.科學(xué)出版社.2023年.【M】.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)出版社，2023一、試驗內(nèi)容1、培育基的制備〔操作〕2、細(xì)菌的人工培育法〔操作〕3、細(xì)菌代謝產(chǎn)物觀看〔示教〕4、藥敏試驗〔示教〕二、試驗?zāi)康?、生疏細(xì)菌的培育方法，進(jìn)一步把握人工培育細(xì)菌的臨床意義。2、了解細(xì)菌代謝產(chǎn)物在鑒別細(xì)菌中的意義。三、試驗材料SS1molNaOH0.1molNaOH0.02%酚紅指示劑、pH比色器、無菌培育皿、無菌試管、接種環(huán)、酒精燈、各種鑒別培育基、高壓消毒滅菌器、量筒、三角燒瓶、吸管、剪刀、繩索、葡萄球菌菌液、大腸桿菌菌液、傷寒桿菌菌液、乙型副傷寒桿菌菌液等。四、試驗方法㈠培育基的制備〔操作〕1、培育基的制備程序稱量 溶化 pH測定與矯正 分裝 滅菌 檢定 保存。2、液體培育基的制備131051000m1000m。2〕混合溶解：加熱溶化，待冷至4050oC時，測定并矯正pH為77.6。3〕pH測定與矯正方法：⑴預(yù)備工作：取pH7.4①、7.6③酚紅標(biāo)準(zhǔn)比色管及蒸餾水管②各1支，按圖示裝好；取口徑與比色管一樣的試管3支，各加待測液體基5ml，分別編上④、⑤、⑥號，按圖示裝好。⑵比色：將比色架對光目視比色，比較二排管的顏色是否一樣，假設(shè)基為酸性〔一般呈酸0.02%酚紅指示劑0.25ml1ml吸管一支吸取0.1molNaOH1ml，NaOH的用量。⑶計算：5ml基矯正至pH7.6用去0.1molNaOH0.2ml，剩余的培育基那么需參與1molNaOH為Xml。用比例公式計算。N1：V1＝N2：V25：975＝0.2：XX＝0.2*975/5=39(ml)0.1molNaOH需要39ml，而加1molNaOH只需。4〕分裝：分裝十適當(dāng)容器內(nèi)〔試管㈡細(xì)菌的人工培育法〔操作〕1、平板劃線接種法：1〕點燃酒精燈，右手以握筆式持接種環(huán)，在火焰上滅菌后稍冷，挑取葡萄球菌、大腸桿菌混合菌液一環(huán)。2〕用左手掌持瓊脂平板，以左手拇指將平板蓋啟開，右手將取了菌液的接種環(huán)伸入平板，呈45O角，用分段劃線法別離細(xì)菌〔如以以下圖3〕于平板底部貼上標(biāo)簽，寫明班、組、菌名、日期，底向上，置于37OC溫箱中培育24h后，觀看結(jié)果。2、液體培育基接種法：置于37OC溫箱中培育24h后，觀看結(jié)果。㈢細(xì)菌代謝產(chǎn)物觀看〔示教〕菌種＋＋乳糖大腸桿菌傷寒桿菌＋－菌種＋＋乳糖大腸桿菌傷寒桿菌＋－2、硫化氫試驗：某些細(xì)菌能分解培育基中的含硫氨基酸，產(chǎn)生硫化氫氣體。硫化氫與培育基中的鐵鹽或鉛鹽反響，形成黑色的硫化鐵或硫化鉛沉淀，為陽性，無黑色沉淀為陰性。大腸桿菌硫化氫試驗為陰性，乙型副傷寒桿菌為陽性。㈣藥敏試驗〔示教〕1、平板劃線：1〕用密集劃線法將細(xì)菌布滿平板，方法同平板劃線接種法。25cm放置平板培育基外表，蓋好平板，貼上標(biāo)簽，置于37OC溫箱中培育24h后，觀看結(jié)果。3〕結(jié)果：觀看抑菌區(qū)有無，測量抑菌區(qū)的直徑。直徑<5mm為陰性(不敏感)、直徑510mm為輕度敏感、直徑1015mm為中度敏感、直徑>15mm為高度敏感。授課進(jìn)度 第 周，第 次課〔2學(xué)時〕 授課日期 年月日授課題目(教學(xué)章、節(jié)細(xì)菌的分布與消毒滅菌檢查或主題)證明在自然界和正常人體體表有很多細(xì)菌存在，以樹立嚴(yán)格的消毒及無菌觀念。教學(xué)了解常用消毒滅菌器械的使用方法，初步把握紫外線的滅菌方法護(hù)本卷須知。目標(biāo)細(xì)菌的檢查及消毒滅菌器械的使用方法教學(xué)重點滅菌方法使用時的本卷須知教學(xué)難點請選擇你授課時所承受的教學(xué)方法〔在括號中畫“√〞講授法﹝﹞，爭論法﹝﹞，演示法﹝﹞，案例法﹝﹞，覺察法﹝﹞，探究法﹝﹞，教學(xué)談話法﹝﹞，試驗法﹝√﹞，參觀法﹝﹞，考察法﹝﹞，自學(xué)輔導(dǎo)法﹝﹞，練習(xí)方法法〔習(xí)題或操作課〕﹝﹞，讀書指導(dǎo)法﹝﹞，聽說法﹝﹞，寫生法﹝﹞，視唱法﹝﹞，工序法〔技能課〕﹝﹞，實習(xí)作業(yè)法﹝﹞，其他﹝﹞請選擇你授課時所承受的教學(xué)手段〔在括號中畫“√〞教學(xué)實物課件﹝﹞，手段掛圖﹝﹞，模型﹝﹞，其他﹝√﹞試驗報告討論、思考題、作業(yè)參考【M】.北京.科學(xué)出版社.2023年.文獻(xiàn)【M】.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)出版社，2023一、試驗內(nèi)容1、空氣中細(xì)菌的檢查〔操作〕2、皮膚消毒試驗〔操作〕3、咽喉部細(xì)菌的檢查〔操作〕4、常用消毒滅菌器械的使用〔示教〕二、試驗?zāi)康?、證明在自然界和正常人體體表有很多細(xì)菌存在，以樹立嚴(yán)格的消毒及無菌觀念。2、了解常用消毒滅菌器械的使用方法，初步把握紫外線的滅菌方法護(hù)本卷須知。三、試驗材料SS大腸桿菌培育液、1％龍膽紫、2.5％碘酒，75％乙醇、無菌棉簽、鑷子等。四、試驗方法㈠空氣中細(xì)菌的檢查〔操作〕1、取一般瓊脂平板4個，啟開皿蓋，培育基面對上，分別放在試驗室、寢室、室外及無菌操作臺等處，暴露1020min后加蓋。2、于平板底部貼上標(biāo)簽，寫明班、組、菌名、日期，底向上，置于37OC溫箱中培育24h后，觀看結(jié)果。3、結(jié)果：照實填寫。㈡皮膚消毒試驗〔操作〕1、取一般瓊脂平板1抹培育基外表。2、用2.5％碘酒消毒右手食指后，再用消毒后的手食指輕輕涂抹培育基外表，加蓋。3、于平板底部貼上標(biāo)簽，寫明班、組、菌名、日期，底向上，置于37OC溫箱中培育24h后，觀看結(jié)果。4、結(jié)果：照實填寫。㈢咽喉部細(xì)菌的檢查〔操作〕1、取血平板1個，啟開皿蓋，口對培育基外表〔距離約10cm加蓋。2、于平板底部貼上標(biāo)簽，寫明班、組、菌名、日期，底向上，置于37OC溫箱中培育24h后，觀看結(jié)果。3、結(jié)果：照實填寫。㈣常用消毒滅菌器械的使用〔示教、介紹〕1、紫外線殺菌試驗1右手持接種環(huán)在火焰上滅菌后，稍冷，取大腸桿菌培育液一環(huán)，密集劃線，加蓋。⑵將培育基置于無菌接種箱內(nèi)照耀30min后，加蓋。⑶于平板底部貼上標(biāo)簽，寫明班、組、菌名、日期，底向上，置于37OC溫箱中培育24h后，觀看結(jié)果。⑷結(jié)果：照實填寫。2、手提式高壓蒸氣滅菌器〔介紹〕⑴構(gòu)造：略⑵用法：加水至規(guī)定的水平面、放入滅菌物品，加蓋、旋緊，翻開排氣閥；通電加熱、溫度漸漸上升時，器內(nèi)冷空氣由排氣閥排出，待有大量蒸氣逸出時，關(guān)閉排氣閥，連續(xù)加熱，直到壓力表的指針指在所需的位置后，調(diào)整電源，把握溫度，維持2030min后，翻開排氣閥排氣，待壓力表指針指向“0〞時，再開蓋取物。⑶本卷須知：①滅菌開頭時必需排盡冷空氣；②滅菌完畢，切不行突然翻開蓋子排氣減壓，以免瓶內(nèi)液體等沖出外溢；③放置物品不應(yīng)太擠。⑷用途：用于耐高溫存不怕潮濕的物品滅菌。授課進(jìn)度授課進(jìn)度第周，第次課〔2學(xué)時〕授課日期年月日授課題目病原性球菌的檢查(或主題)通過試驗讓學(xué)生把握病原性球菌的形態(tài)、染色特性。了解膿汁標(biāo)本的病原性球菌教學(xué)的別離鑒定的程序。了解抗“O〞試驗的原理、方法及臨床意義。目標(biāo)1、病原性球菌標(biāo)本的觀看。教學(xué)2、膿汁標(biāo)本中病原性球菌的別離鑒定的程序。重點3、抗“O〞試驗抗“O〞試驗的原理教學(xué)難點請選擇你授課時所承受的教學(xué)方法〔在括號中畫“√〞講授法﹝﹞，爭論法﹝﹞，演示法﹝﹞，案例法﹝﹞，覺察法﹝﹞，探究法﹝﹞，教學(xué)談話法﹝﹞，試驗法﹝√﹞，參觀法﹝﹞，考察法﹝﹞，自學(xué)輔導(dǎo)法﹝﹞，練習(xí)方法法〔習(xí)題或操作課〕﹝﹞，讀書指導(dǎo)法﹝﹞，聽說法﹝﹞，寫生法﹝﹞，視唱法﹝﹞，工序法〔技能課〕﹝﹞，實習(xí)作業(yè)法﹝﹞，其他﹝﹞請選擇你授課時所承受的教學(xué)手段〔在括號中畫“√〞教學(xué)實物課件﹝﹞，手段掛圖﹝﹞，模型﹝﹞，其他﹝√﹞試驗報告討論、思考題、作業(yè)參考【M】.北京.科學(xué)出版社.2023年.文獻(xiàn)【M】.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)出版社，2023病原性球菌的檢查試驗?zāi)康模喊盐詹≡郧蚓男螒B(tài)、染色特性。了解膿汁標(biāo)本的病原性球菌的別離鑒定的程序。了解抗“O〞試驗的原理、方法及臨床意義。試驗內(nèi)容：1、病原性球菌標(biāo)本的觀看。2、膿汁標(biāo)本中病原性球菌的別離鑒定的程序。3、抗“O〞試驗試驗材料：顯微鏡、細(xì)菌標(biāo)本、玻片、試管、試管架、吸管、水浴箱、注射器、2.5%碘酒、棉簽、生理鹽水、血平板、兔血漿、抗“O〞試劑、血平板。試驗方法：病原性球菌標(biāo)本的觀看1、葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌、腦膜炎球菌、淋球菌的形態(tài)觀看〔操作2、葡萄球菌、鏈球菌溶血現(xiàn)象觀看〔示教膿汁標(biāo)本中病原性球菌的別離鑒定的程序直接涂片 革蘭染色 鏡檢膿汁標(biāo)本 觀看菌特征及溶液血狀況接種血平板24h培育后觀看 取菌落涂片 革蘭染色 鏡檢取菌落作生化反響、致病力試驗抗“O〞試驗原理：乙型溶血性鏈球菌能產(chǎn)生溶血素“O〞，能溶液解人和兔紅細(xì)胞并有很強(qiáng)的抗原性，能刺激機(jī)體產(chǎn)生抗溶血素“O“O〞能中和溶血素“O〞的溶血作用。本法是將病人血清與溶血素“O〞抗原先混合，作用一段時間后，再參與紅細(xì)胞懸液。假設(shè)紅細(xì)胞不被溶解為陽性，溶解為陰性。方法：1、取小試管6支，分別編號，分兩排置于試管架上〔1-3為第一排，4-62、第一排試管加待檢血清(0.25ml)分別稀釋為200、400、800倍；其次排試管加待檢血清(0.25ml)分別稀釋300、600、1200倍。3、分別加鏈球菌溶血素“O〞抗原，充分混勻，置于37oC水浴箱中10min。7分別加5%紅細(xì)胞懸液，充分混勻，置37oC水浴箱中30min后觀看結(jié)果。結(jié)果：以完全不溶液血的血清最高稀釋度為抗“O〞抗體的效價。正常值為500單位以下。用途：600單位及以上有診斷意義，用于關(guān)心診斷活動性風(fēng)濕。(四)血漿凝固酶試驗取玻片一張，加生理鹽水一環(huán)。用接種環(huán)取葡萄球菌少許，混勻。加血漿一滴、混勻，數(shù)分鐘后觀看結(jié)果。消滅顆粒狀凝集的為陽性、反之為陰性。授課進(jìn)度授課進(jìn)度授課題目(第周，第次課〔2學(xué)時〕授課日期年月日腸道桿菌的檢查或主題)通過試驗讓學(xué)生把握腸道桿菌的形態(tài)、染色特性。了解腸道桿菌的別離鑒定的程教學(xué)序。了解肥達(dá)試驗的原理、方法及臨床意義。目標(biāo)1、腸道桿菌形態(tài)標(biāo)本的觀看。教學(xué)2、腸道桿菌的別離鑒定程序。重點3、肥達(dá)試驗。肥達(dá)試驗的原理方法及結(jié)果分析教學(xué)難點請選擇你授課時所承受的教學(xué)方法〔在括號中畫“√〞講授法﹝﹞，爭論法﹝﹞，演示法﹝﹞，案例法﹝﹞，覺察法﹝﹞，探究法﹝﹞，教學(xué)談話法﹝﹞，試驗法﹝√﹞，參觀法﹝﹞，考察法﹝﹞，自學(xué)輔導(dǎo)法﹝﹞，練習(xí)方法法〔習(xí)題或操作課〕﹝﹞，讀書指導(dǎo)法﹝﹞，聽說法﹝﹞，寫生法﹝﹞，視唱法﹝﹞，工序法〔技能課〕﹝﹞，實習(xí)作業(yè)法﹝﹞，其他﹝﹞請選擇你授課時所承受的教學(xué)手段〔在括號中畫“√〞教學(xué)實物課件﹝﹞，手段掛圖﹝﹞，模型﹝﹞，其他﹝√﹞試驗報告討論、思考題、作業(yè)參考【M】.北京.科學(xué)出版社.2023年.文獻(xiàn)【M】.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)出版社，2023腸道桿菌的檢查試驗?zāi)康模?、把握腸道桿菌的形態(tài)、染色特性。2、了解腸道桿菌的別離鑒定的程序。3試驗內(nèi)容：1、腸道桿菌形態(tài)標(biāo)本的觀看。2、腸道桿菌的別離鑒定程序。3、肥達(dá)試驗。試驗材料：顯微鏡、細(xì)菌標(biāo)本、玻片、試管、試管架、吸管、水浴箱、注射器、2.5%碘酒、棉簽、生理鹽水、SS1：10O菌液、H菌液、甲、乙型副傷寒H菌液。試驗方法：一、腸道桿菌的形態(tài)觀看【材料】大腸桿菌、變形桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌革蘭染色示教片。道桿菌之間的鑒別依據(jù)。二、腸道桿菌培育物與生化反響觀看SS尿素及蛋白胨水培育基上24小時培育物?！痉椒ā?、觀看大腸桿菌、變形桿菌、痢疾桿菌EMB培育基上生長狀況，留意菌落的形態(tài)、大小、顏色及透亮度。菌種傷寒沙乙型副傷寒大腸桿菌變形桿菌菌種傷寒沙乙型副傷寒大腸桿菌變形桿菌痢疾桿菌門菌 沙門菌培育基菌落紅色菌落無色半菌落無同傷寒桿菌菌落，菌落瓊脂平板之中心，不黑心，直徑明，直徑菌菌落。可帶黑心。透亮，直徑2mm左右，有2mm左2-3mm左右2-3mm左右時呈膜狀生右。長。小至中菌落扁平，圓形菌落，扁等透明透亮，光滑紫黑色，具平，無色或半EMB 或半透明，不發(fā)糖，中等大澤菌酵乳糖小2、觀看大腸桿菌、變形桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌及乙型副傷寒桿菌在雙糖鐵、尿素及蛋白胨水培育基上生長狀況，留意生化反響與動力的鑒別。表2五種腸道桿菌生化反響與動力鑒別表生化反應(yīng)菌名動力葡萄糖乳糖H2S尿素靛基質(zhì)大腸桿菌⊕⊕--++變形桿菌⊕-+/-++/-+副傷寒乙桿菌⊕-+++--+傷寒桿菌+--/+--+痢疾桿菌+---+/--三、糞便標(biāo)本中腸道桿菌的別離鑒定〔一〕標(biāo)本采集能馬上送檢，可將標(biāo)本保存于30%甘油緩沖鹽水中?！捕硻z驗程序腸道桿菌檢驗程序〔三〕檢驗方法：1、別離培育【材料】穎糞便標(biāo)本、SS瓊脂平板?！痉椒ā堪瓷鲜鰴z驗程序進(jìn)展第一日的檢驗步驟，即用接種環(huán)挑取穎糞便標(biāo)本，劃線接種于EMB或SS平板上，37℃培育24小時?！窘Y(jié)果】在EMB2、初步鑒定【材料】雙糖鐵培育基【方法】Kligler37℃培育18-24小時后，觀看結(jié)果，并據(jù)此判定細(xì)菌屬性?！窘Y(jié)果】上層+下層+動力+H2S-非致病菌++---+--痢疾桿菌-+++傷寒桿菌-+++副傷寒桿菌【用途】初步鑒別腸道致病菌用，可以觀看葡萄糖、乳糖的發(fā)酵，并可觀看有無H2S產(chǎn)生及細(xì)菌有無動力?！驹怼恐杏袣馀莼蛄严断麥?。培育基中乳糖含量大，被分解后產(chǎn)酸多，因此不僅培育基下層變黃，葡萄糖。培育基中含有硫酸亞鐵，如有硫化氫產(chǎn)生，那么生成黑色硫化亞鐵，使培育基中消滅黑色。硫代硫酸鈉是一種復(fù)原劑，防止培育基中氧化物與H2S作用而影響FeS的生成。3、血清學(xué)鑒定【材料】沙門菌屬、志賀菌屬多價診斷血清，生理鹽水，載玻片等?！痉椒ā可睇}水診斷血清生理鹽水診斷血清++細(xì)菌細(xì)菌〔2〕凝集試驗陽性者，報告結(jié)果；凝集試驗陰性者應(yīng)保存菌種進(jìn)一步鑒定?！舅伎碱}】1、腸道桿菌有何共同特征？2、大腸、變形、痢疾、傷寒桿菌及乙型副傷寒桿菌的鑒別要點是什么？3、假設(shè)大腸桿菌、傷寒桿菌、乙型副傷寒桿菌和痢疾桿菌混雜在肉湯培育基中，你怎樣把它們別離出來，使各自成為純培育物?【附注】痢疾桿菌熒光菌球試驗【原理】長，形成痢疾桿菌微小菌團(tuán)。如在抗體上標(biāo)記熒光，那么形成痢疾桿菌熒光菌球?！静牧吓c方法】1.將痢疾桿菌接種于含有確定量的熒光抗體的蛋白胨水中，37℃培育10小時。玻片上，放上蓋玻片，在熒光顯微鏡下觀看?！窘Y(jié)果】四周較圓，整齊，菌球四周有刺毛，孵育時間短時，菌球往往呈多形性。肥達(dá)反響【方法】取清潔小試管32支，分成4排，每排8支，依次編號。于小試管內(nèi)各注入0.5ml生理鹽水。其次管作對倍稀釋，……