醫(yī)學專題-傳染性胃腸炎TGEV

傳染性胃腸炎TGEV第一頁，共十九頁。編輯課件豬傳染性胃腸炎研究(yánjiū)概況豬傳染性胃腸炎（TGE）是豬的一種急性傳染病，由豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）引起。在1933年，美國依利諾斯州記載了TGE。1945年，Doyle和Hutchings在美國首次報道了該病，直到1946年才確定該病的病原為冠狀病毒。隨后歐州國家、中南美洲、加拿大、韓國、朝鮮、菲律賓和中國(zhōnɡɡuó)大陸都報道了本病。豬呼吸道冠狀病毒（PRCV）是一種豬傳染性胃腸炎病毒的致病性突變體。隨著PRCV的出現(xiàn)，由PRCV誘導交叉保護性免疫，使TGE在歐洲變得不那么普遍。1956年，我國廣東省有關(guān)于本病的報道,近年來，TGEV在國內(nèi)的流行形勢嚴峻，并且經(jīng)常伴隨著與豬輪狀病毒病和豬流行性腹瀉病的混合感染，無有效的治療藥物，因此已經(jīng)成為嚴重危害養(yǎng)豬業(yè)的重要疫病之一，給我國豬養(yǎng)殖業(yè)帶來了嚴重的經(jīng)濟損失。第二頁，共十九頁。編輯課件一、病原學1、形態(tài)學特征TGEV屬于冠狀病毒科冠狀病毒屬,電鏡負染觀察，TGE病毒粒子呈圓形、橢圓形或多邊形。病毒直徑為90-200nm，有雙層膜，病毒表面有囊膜和明顯的花瓣狀纖突，纖突的長度約在12～25nm之間。因TGEV是RNA病毒，所以TGEV的纖突容易脫落，導致在電鏡下觀察病毒粒子的結(jié)構(gòu)時不易看到纖突。3種膜相關(guān)蛋白（S、M、sM）鑲嵌在囊膜脂質(zhì)雙層中，其中，M為膜糖蛋白且多次橫穿(hénɡchuān)脂質(zhì)雙層；S為重要的纖突糖蛋白。sM為鑲嵌于囊膜中的小包膜蛋白。TGEV模型(móxíng)圖第三頁，共十九頁。編輯課件一、病原學2、培養(yǎng)特性TGEV可在本屬動物或其細胞(xìbāo)系上繁殖,在不同細胞(xìbāo)系上的生物學特性表現(xiàn)的也不一致，比較敏感的細胞(xìbāo)系有豬唾液腺細胞(xìbāo)、豬甲狀腺細胞(xìbāo)、豬睪丸(SwinTesticle，ST)細胞(xìbāo)、仔豬的腎細胞(xìbāo)（pk-15）。經(jīng)研究表明最為敏感的傳代細胞系為豬睪丸細胞（Swinetesticle，ST），適應ST細胞后的病毒效價提高的較快，其次是PK15細胞系，兩者是實驗室常用的繁殖TGEV的細胞系。第四頁，共十九頁。編輯課件一、病原學3、理化特性TGEV并不耐熱，加熱56℃45min或65℃10min可被完全滅活，隨著溫度的升高，病毒滴度也會隨著下降(xiàjiàng)。TGEV在冷凍環(huán)境下貯存非常穩(wěn)定，在室溫下或更高的溫度下相對不穩(wěn)定。用甲醛溶液處理病毒，37℃20min亦能使病發(fā)生滅活。TGEV對光和紫外線敏感，二者在一定條件下均能很容易的將TGEV滅活。TGEV在膽汁中存在相當穩(wěn)定而對乙醚、氯仿和去氧膽酸鈉這三種試劑敏感。此毒對胰酶有抵抗力，能耐受0.5%胰蛋白酶時間長達1h。TGEV在pH為4-8的區(qū)間時表現(xiàn)穩(wěn)定。第五頁，共十九頁。編輯課件一、病原學4、抗原性病毒存在于豬的各器官、體液和排泄物中,但病豬的空腸、十二指腸組織,腸系膜淋巴結(jié)含毒量最高。在病的早期,呼吸道和腎的含毒量也相當高。對來自美國、英國和日本的用豬傳代及用細胞培養(yǎng)傳代的10個毒株進行交叉中和實驗和蝕斑減數(shù)實驗,證明TGEV只有一個血清型,各毒株之間抗原性密切相關(guān)。近年來,在歐洲及北美發(fā)現(xiàn)一種被認為是TGEV基因缺失變異株的冠狀病毒—豬呼吸道冠狀病毒（PRCV）。TGEV和PRCV能誘導機體產(chǎn)生交叉反應的中和抗體，但PRCV只能引起(yǐnqǐ)輕微臨床癥狀。第六頁，共十九頁。編輯課件二、流行病學(liúxínɡbìnɡxué)1、傳染源、傳播途徑和易感動物⑴豬傳染性胃腸炎病的傳染源主要為發(fā)病豬、帶毒豬，其它帶毒動物也可作為傳染源。⑵TGEV的傳播可以通過消化道和呼吸道與受感染的個體或攜帶疾病的豬的糞便、乳汁、嘔吐物、呼吸及鼻腔分泌物的直接接觸而發(fā)生,病毒也可能存在于被污染的飼料、飲水、空氣和飼喂(sìwèi)用具中。⑶感染動物為豬，各種年齡的豬都易感，但以10日齡以內(nèi)的仔豬發(fā)病率和病死率高。狗、貓、狐貍等可帶毒排毒，但不發(fā)病。第七頁，共十九頁。編輯課件二、流行病學(liúxínɡbìnɡxué)2、流行特點TGE的發(fā)生和流行有明顯的季節(jié)性，多見于初春和冬季，發(fā)病高峰期為每年的1-2月。這種流行特點可能與病毒的理化特性有關(guān)，TGEV不耐熱，但在冰凍的條件下比較穩(wěn)定。豬場一旦感染(gǎnrǎn)TGEV，便大量暴發(fā)感染(gǎnrǎn)。哺乳母豬常發(fā)病，表現(xiàn)為厭食和無乳，從而進一步導致仔豬死亡率的上升。本病還呈周期性地方流行性，其流行的間歇期，病毒隱藏在豬體而成為仔豬的傳染源，每年的冬季豬群可重新感染。曾感染過TGE的母豬具有免疫力，能夠抵抗病毒侵害，一般不重復感染。第八頁，共十九頁。編輯課件爆發(fā)(bàofā)圖分布圖第九頁，共十九頁。編輯課件三、臨床(línchuánɡ)癥狀本病潛伏期短,18h～72h大部分豬感染發(fā)病,根據(jù)此特點可作為臨床診斷的依據(jù)。仔豬潛伏期很短,一般為12h～24h,突然發(fā)生嘔吐,接著頻繁劇烈水樣腹瀉,糞便黃色、綠色或灰色,腥臭,常夾有未消化的凝乳塊。病豬極度口渴,迅速脫水,消瘦,日齡越小、病程越短、病死率越高。10日齡以內(nèi)的仔豬多在2d～5d內(nèi)死亡,隨著日齡的增長病死率逐漸降低。病愈仔豬生長發(fā)育不良。后備豬、架子豬和成年豬癥狀輕重不一,表現(xiàn)為停食,個別病豬出現(xiàn)(chūxiàn)嘔吐,急性腹瀉,排出灰色或灰褐色水樣便,伴有未消化的飼料,5d～7d自愈,很少死亡。第十頁，共十九頁。編輯課件四、病理變化主要病變在胃和小腸,胃內(nèi)充滿未消化的凝乳塊,胃底黏膜充血,小腸內(nèi)充滿黃綠色或灰白色液狀物,含有泡沫和未消化的凝乳塊,小腸壁變薄,彈性降低,以致腸管擴張,呈半透明狀,腸系膜血管充血擴張,淋巴結(jié)腫脹。將空腸縱向剪開,用生理鹽水將腸內(nèi)容物沖掉,置于玻璃平皿內(nèi)鋪平,加入少量生理鹽水,在低倍顯微鏡下觀察,可見到空腸絨毛顯著縮短,是本病重要(zhòngyào)病理變化特征。第十一頁，共十九頁。編輯課件五、發(fā)病(fābìng)機理小腸是本病毒的靶器官。無論是口腔還是鼻腔途徑感染,病毒都被吞咽進入消化道,它能抵抗胃酸和蛋白水解酶而保持活性進入小腸。大量小腸上皮細胞受感染后,腸粘膜的功能性上皮細胞迅速遭到破壞,導致小腸內(nèi)的酶活性明顯降低,不能分解乳糖和其他營養(yǎng)物質(zhì)。乳糖在腸腔中的存在,使?jié)B透壓升高,致使體液滯留甚至(shènzhì)從身體組織內(nèi)吸收體液而引起腹瀉和脫水。TGEV的感染還可引起空腸鈉運輸?shù)母淖兒脱芡獾鞍踪|(zhì)丟失而引起腸道內(nèi)電解質(zhì)和水積聚。死亡的原因可能是脫水和代謝性酸中毒以及由于高血鉀而引起的心功能異常和腎功能減退。新生仔豬小腸內(nèi)正常絨毛細胞的更換速度較慢,免疫系統(tǒng)發(fā)育不完善及TGEV易于在新生豬絨毛吸收細胞的尖端小血管系統(tǒng)積聚,而使病毒數(shù)量大增,可能是仔豬易感和高死亡率的主要原因。第十二頁，共十九頁。編輯課件六、診斷(zhěnduàn)1病毒抗原檢測常用免疫熒光法(IF)2病毒的電鏡檢測免疫電鏡(IEM)比常規(guī)EM技術(shù)更好3血清學診斷病毒中和試驗(VN)，ELISA法較之以往的血清學方法具有敏感性高、特異性強的特點。

4病毒核酸檢測RT-PCR法是目前鑒別診斷TGEV和PEDV最敏感(mǐngǎn)、特異的方法。第十三頁，共十九頁。編輯課件七、防治(fángzhì)抗生素等常規(guī)藥物無治療作用,因此該病以預防為主。目前獸用疫苗的研究主要(zhǔyào)經(jīng)歷了滅活疫苗,減毒弱毒疫苗以及基因工程疫苗等三個階段。隨著分子生物學實驗技術(shù)的推廣和成熟,基因工程苗已經(jīng)成為疫苗研究中的熱點。其中核酸疫苗與傳統(tǒng)疫苗相比有許多潛在的優(yōu)勢,被譽為第三次疫苗革命。聯(lián)合疫苗：二聯(lián)、三聯(lián)。第十四頁，共十九頁。編輯課件八、TGEV的分子生物學1、TGEV基因組結(jié)構(gòu)TGEV基因組為單股正鏈不分節(jié)段的RNA,大小約為2.86x104bp。分為7個區(qū),每個區(qū)有一個(yīɡè)或多個開放閱讀框架(OpenReadingFrames,ORFs)。2、S基因S基因長約4.3kb,翻譯并指導S蛋白(E2)的合成,形成病毒的囊膜突起。核苷酸數(shù)目因不同毒株而有差別,Purdue一115株為4341個堿基,而Miller和FS772/70株為4347個堿基。第十五頁，共十九頁。編輯課件八、TGEV的分子生物學3、TGEV結(jié)構(gòu)蛋白與功能TGEV由四種主要的結(jié)構(gòu)蛋白構(gòu)成(gòuchéng)。

⑴S蛋白又稱E2,為大的糖蛋白,它形成病毒粒子的冠狀突起。⑵M蛋白又稱E1,包埋在脂質(zhì)囊膜中。⑶N蛋白包裹整個基因組RNA。⑷sM蛋白位于病毒粒子囊膜上。第十六頁，共十九頁。編輯課件八、TGEV的分子生物學S糖蛋白的生物學功能:①攜帶主要的B淋巴細胞抗原決定簇,是唯一能夠誘導產(chǎn)生中和抗體和提供免疫保護的結(jié)構(gòu)蛋白。含有宿主細胞(xìbāo)氨肽酶受體(PAPN)的識別位點,決定宿主細胞(xìbāo)的親嗜性。決定TGEV的致病性。④具有細胞融合作用,使病毒蛋白進入細胞漿。決定TGEV的血凝作用。第十七頁，共十九頁。編輯課件謝謝(xièxie)觀看！第十八頁，共十九頁。編輯課件內(nèi)容(nèiróng)總結(jié)傳染