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PAGEPAGE1馬齒莧有效成分的提取及定量分析馬齒莧是一種常見的野菜,含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分和藥用價(jià)值。其中,主要有效成分為黃酮類、類胡蘿卜素和多糖等,擁有抗氧化、抗炎、降壓、降脂等多種生物活性,因此備受關(guān)注。提取和定量分析馬齒莧中有效成分是開展深入研究的前提。以下將介紹馬齒莧有效成分提取及定量分析的方法。一、提取方法1.酸水浸提法將馬齒莧枝葉用蒸餾水清洗后,切碎、加酸(如1%的稀醋酸或0.1%的鹽酸)混合均勻,封閉于常溫條件下進(jìn)行浸泡提取,常溫下浸泡6h即可。2.酒精浸提法馬齒莧枝葉清洗干凈后切碎,加入適量的酒精(如95%的乙醇)中,混合均勻后封閉于室溫下提取,一般提取12~24h左右即可。3.超聲波浸提法將馬齒莧枝葉清洗后切碎,加入適量的蒸餾水或酒精中,將樣品置于超聲波提取儀中,進(jìn)行超聲波提取3次,每次30min左右,最后將提取液混合即可。二、有效成分的定量分析方法1.黃酮類的定量分析方法常用的黃酮類有梧桐素、蘆丁、巖菊素、橙皮素等。建議采用高效液相色譜法分析,主要步驟如下:1)制備樣品:將提取液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中蒸發(fā)至干燥,再用一定的溶劑重溶后濾取,待用。2)色譜操作:采用AgilentZorbaxSB-C18色譜柱(5μm,4.6mm×250mm),流動(dòng)相A:乙腈-乙酸酸性溶液(10:90,pH=2.5),流動(dòng)相B:水-乙酸酸性溶液(90:10,pH=2.5),梯度淋洗,流速0.8mL/min。3)檢測(cè)條件:檢測(cè)波長(zhǎng)為350nm,柱溫為25℃。2.類胡蘿卜素的定量分析方法馬齒莧中類胡蘿卜素主要是β-胡蘿卜素。建議采用高效液相色譜法分析,主要步驟如下:1)制備樣品:將提取液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中蒸發(fā)至干燥,再用一定的溶劑重溶后濾取,待用。2)色譜操作:采用WatersSymmetryC18色譜柱(5μm,4.6mm×150mm),流動(dòng)相A:甲醇-乙腈(1:1),流動(dòng)相B:乙腈,梯度淋洗,流速0.6mL/min。3)檢測(cè)條件:檢測(cè)波長(zhǎng)為450nm,柱溫為25℃。3.多糖的定量分析方法常用的多糖有阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖等。建議采用酚硫酸顯色法分析,主要步驟如下:1)制備樣品:將提取液中的多糖酸解后中和,再用酚硫酸顯色。2)檢測(cè)條件:在490nm波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè),同時(shí)以葡萄糖為對(duì)照品,
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