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第二章細(xì)菌的生理醫(yī)學(xué)微生物學(xué)11、水:
75-90%細(xì)胞重量2、有機(jī)物:C,H,O,N,P,S,蛋白質(zhì),脂類,核酸等3、無機(jī)離子:
K、Na、Fe、Mg、Ca,等4、特有成分:肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、D型
氨基酸、吡啶二羧酸、二氨基庚二酸(DAP)第一節(jié)細(xì)菌的理化性狀(自學(xué))一、細(xì)菌的化學(xué)組成21光學(xué)性質(zhì):半透明體,比濁法計(jì)數(shù)2表面積大:直徑1μm葡萄球菌:1cm3表面積60000cm2直徑1cm生物體:1cm3表面積6cm2二、細(xì)菌的物理性狀意義:物質(zhì)交換33帶電現(xiàn)象G+菌等電點(diǎn)為pH2-3G-菌等電點(diǎn)為pH4-5
近中性或弱堿性環(huán)境中,細(xì)菌均帶負(fù)電荷,G+菌帶得更多意義:與細(xì)菌的染色反應(yīng)、凝集反應(yīng)、
抑菌、殺菌作用密切相關(guān)。菌體成分50-80%為蛋白質(zhì)44半透性物質(zhì)交換吸收營(yíng)養(yǎng),排出廢物5滲透壓高滲,G+菌(20-25大氣壓)大于G-(5-6)菌意義:高鹽高糖保存食物5一、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
水:營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)必須先溶于水,營(yíng)養(yǎng)的吸收與代謝均需有水才能進(jìn)行。氮源:來源于氨基酸、蛋白質(zhì)等,合成菌體成分。碳源:來源于糖類,提供能量。無機(jī)鹽:鉀、鈉、鈣、鎂、磷、硫等。生長(zhǎng)因子:生長(zhǎng)必需但自身不能合成的物質(zhì),如維生素、氨基酸等。第二節(jié)細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)與生長(zhǎng)繁殖6二、細(xì)菌攝取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的機(jī)制-自學(xué)被動(dòng)擴(kuò)散主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)第二節(jié)細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)與生長(zhǎng)繁殖7三、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)類型-自學(xué)自養(yǎng)菌(autotroph)異養(yǎng)菌(heterotroph)
病原菌都是異養(yǎng)菌四、影響細(xì)菌生長(zhǎng)的因素營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)氫離子濃度(pH)
多數(shù)病原菌最適pH為7.2~7.6溫度多數(shù)病原菌最適37℃84.氣體(1)專性需氧菌eg:結(jié)核分枝桿菌(2)微需氧菌低氧:5-6%,大于10%不生長(zhǎng)eg:空腸彎曲菌、幽門螺桿菌(3)兼性厭氧菌大多數(shù)病原菌(4)專性厭氧菌eg:破傷風(fēng)梭菌、脆弱類桿菌9厭氧菌為什么不能在有氧的環(huán)境中生長(zhǎng)?原因:缺乏過氧化氫酶、過氧化物酶、超氧化物歧化酶或氧化還原電勢(shì)高的呼吸酶類。5.滲透壓嗜鹽菌需適量的氯化鈉如:副溶血性弧菌需3%氯化鈉10五、細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖
代時(shí):細(xì)菌分裂數(shù)量倍增所需的時(shí)間。一般為20-30min
例外:TB1方式:二分裂無性繁殖方式(一)細(xì)菌個(gè)體的生長(zhǎng)繁殖1112(二)細(xì)菌群體的生長(zhǎng)繁殖(生長(zhǎng)曲線)(1)遲緩期
1-4h(2)對(duì)數(shù)期
8-18h(3)穩(wěn)定期:產(chǎn)生芽孢、外毒素和抗生素(4)衰退期13細(xì)菌新陳代謝包括分解代謝與合成代謝分解代謝:營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)分解和轉(zhuǎn)化為能量的過程合成代謝:所產(chǎn)生的能量和少數(shù)簡(jiǎn)單的前體用于
細(xì)胞組分的合成第三節(jié)細(xì)菌的新陳代謝141、EMP途徑(糖酵解)2、磷酸戊糖途徑3、需氧呼吸:以分子氧為受氫體的代謝過程1分子葡萄糖產(chǎn)生38分子ATP4、厭氧呼吸:
以其他無機(jī)物為受氫體的代謝過程1分子葡萄糖產(chǎn)生2分子ATP一、細(xì)菌的能量代謝—自學(xué)第三節(jié)細(xì)菌的新陳代謝15二、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物分解代謝產(chǎn)物和生化反應(yīng)
細(xì)菌對(duì)糖、蛋白質(zhì)的分解能力的不同,因而代謝產(chǎn)物各異,利用生物化學(xué)方法鑒別不同細(xì)菌稱為細(xì)菌的生化反應(yīng)。第三節(jié)細(xì)菌的新陳代謝16糖發(fā)酵試驗(yàn):乳糖乳酸乳糖酶葡萄糖發(fā)酵試驗(yàn):細(xì)菌葡萄糖丙酮酸各種酸類甲酸H2+CO2解氫酶第三節(jié)細(xì)菌的新陳代謝17吲哚試驗(yàn)(Indoletest):
色氨酸 氨基苯甲醛玫瑰吲哚甲基紅試驗(yàn)(Methyredtest):葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇(中性)pH≥5.4 桔黃色:陰性pH≤4.5 紅 色: 陽性色氨酸酶細(xì)菌脫羧第三節(jié)細(xì)菌的新陳代謝18VP試驗(yàn):
細(xì)菌脫羧氧化葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基甲醇
枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)(Citrateutilizatio):枸櫞酸鹽碳酸鹽
銨
鹽氨(堿性)含胍基化合物溴麝香草酚藍(lán)由淡綠變深藍(lán)二乙酰紅色的化合物(VP試驗(yàn)陽性)第三節(jié)細(xì)菌的新陳代謝19IMViC試驗(yàn)大腸桿菌:+ +--產(chǎn)氣桿菌:- -++20硫化氫試驗(yàn):分解含硫氨基酸尿素酶試驗(yàn):分解尿素(二)合成代謝產(chǎn)物及其在醫(yī)學(xué)上的意義(1)熱原質(zhì)(pyrogen)/致熱原a)概念:熱原質(zhì)是細(xì)菌合成的、可引起人/動(dòng)物發(fā)生發(fā)熱反應(yīng)的物質(zhì)。多數(shù)G-菌:LPS第三節(jié)細(xì)菌的新陳代謝21B)性質(zhì):耐高熱、高壓蒸氣滅菌不被破壞250℃干烤吸咐劑/特殊石棉濾板蒸餾法(2)毒素與侵襲性酶a)毒素內(nèi)毒素:外毒素:G-菌LPS,菌體死亡游離出來。多數(shù)G+菌,少數(shù)G-菌分泌產(chǎn)生的蛋白質(zhì)。第三節(jié)細(xì)菌的新陳代謝22b)侵襲性酶透明質(zhì)酸酶、鏈激酶、鏈道酶等(3)色素a)
水溶性色素:b)
脂溶性色素:銅綠假單胞菌金黃色葡萄球菌第三節(jié)細(xì)菌的新陳代謝23(4)抗生素大多由真菌和放線菌產(chǎn)生(5)細(xì)菌素某些菌株產(chǎn)生的一類具有抗菌作用的蛋白質(zhì)。(6)維生素大腸埃希菌:VitB、VitK第三節(jié)細(xì)菌的新陳代謝24
代謝產(chǎn)物的實(shí)際意義:供鑒別細(xì)菌的代謝產(chǎn)物
細(xì)菌的生化反應(yīng)細(xì)菌的色素:顏色、性質(zhì)(水溶性脂溶性)
細(xì)菌素與致病性有關(guān)的代謝產(chǎn)物
毒素、侵襲性酶、熱原質(zhì)供治療用的代謝產(chǎn)物
抗生素、維生素第三節(jié)細(xì)菌的新陳代謝25三、細(xì)菌的分泌系統(tǒng)-自學(xué)細(xì)菌依賴分泌通路進(jìn)行蛋白質(zhì)的跨胞質(zhì)膜轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)。四、細(xì)菌的免疫系統(tǒng)—自學(xué)限制修飾系統(tǒng)流產(chǎn)感染系統(tǒng)毒素-抗毒素系統(tǒng)CRISPR-Cas系統(tǒng)
第三節(jié)細(xì)菌的新陳代謝26第四節(jié)細(xì)菌的人工培養(yǎng)-實(shí)驗(yàn)課講272、消毒(disinfection)
殺滅物體上或環(huán)境中的病原微生物、并不一定殺死細(xì)菌芽胞或非病原微生物的方法。消毒劑(disinfectant):用以消毒的藥品1、滅菌(sterilization)
殺滅物體上所有微生物的方法,包括殺滅細(xì)菌芽胞、病毒和霉菌在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。一、消毒滅菌的常用術(shù)語第五節(jié)抑制或殺滅微生物的理化因素283、防腐(antisepsis)防止或抑制微生物生長(zhǎng)繁殖的方法。細(xì)菌不死亡。防腐劑(antiseptic):用以防腐的藥物。4、清潔(cleaning)
去除塵埃,減少微生物數(shù)量5、無菌:不存在活菌,多是滅菌的結(jié)果6、無菌操作:防止細(xì)菌及其他微生物進(jìn)入人體或
其他物品的操作技術(shù)。29消毒、滅菌的方法一般可分為:物理消毒滅菌法化學(xué)消毒滅菌法熱力滅菌法輻射殺菌法濾過除菌法干燥與低溫抑菌法二、物理消毒滅菌法30(二)輻射殺菌法(一)熱力滅菌法干熱滅菌法濕熱滅菌法紫外線電離輻射(三)濾過除菌法微波二、物理消毒滅菌法31(一)熱力滅菌法1、干熱滅菌法①焚燒32②燒灼33③干烤④紅外線烤箱160℃
2h,121℃16h170℃15℃170℃15℃170℃20℃34同一溫度,濕熱好于干熱
①菌體蛋白易凝固變性②穿透力大③蒸汽有潛熱效應(yīng),水由
氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時(shí)釋放潛熱潛熱2、濕熱滅菌法:35①巴氏消毒法(pasteurization):61.1~62.8℃30min或71.7℃15~30s用于酒類、牛奶的消毒。②煮沸法2%碳酸氫鈉100℃,5-10min;加入2%碳酸氫鈉沸點(diǎn)為105℃,防金屬物品生銹。36④間歇蒸氣滅菌法100℃,15-30min,37℃過夜(3次)③流動(dòng)蒸汽消毒法100℃,15-30min不能殺滅全部細(xì)菌芽孢37⑤高壓蒸汽滅菌法
103.4kPa(1.05kg/cm2)(121.3℃,維持15-20min)
滅菌效果最好。用于一般培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料等耐高溫、耐濕物品的滅菌。38㈡輻射殺菌法1、紫外線:紫外線DNAT-T二聚體波長(zhǎng):240-300nm,265-266nm最強(qiáng)DNA不能復(fù)制與轉(zhuǎn)錄變異與死亡39紫外線殺菌特點(diǎn):穿透力弱;只能殺死細(xì)菌的繁殖體,不能殺死細(xì)菌
的芽胞。常用于空氣或不耐熱物品的表面消毒。403、微波機(jī)制:干擾DNA的合成、破壞細(xì)胞膜、產(chǎn)生H2O2等特點(diǎn):穿透力強(qiáng),不升高溫度;用途:大量一次性醫(yī)用塑料制品、食品、藥品、生物制品的消毒。2、電離輻射:
包括β射線和γ射線41(三)濾過除菌法:孔徑0.22μm或0.45μm濾膜。用于血清、毒素、抗生素、空氣等的除菌。不能除去病毒、支原體、衣原體和有些L型細(xì)菌。(五)干燥與低溫抑菌法:干燥法:保存食物低溫:保存菌種。常用冷凍真空干燥法。42三、化學(xué)消毒滅菌法(一)殺菌機(jī)制
1、促進(jìn)菌體蛋白變性或凝固2、干擾細(xì)菌酶系統(tǒng)及代謝3、損傷菌細(xì)胞膜431、高效消毒劑
范圍:殺滅所有微生物(包括芽胞)
適用:不耐熱,但要進(jìn)入人體內(nèi)部物品
舉例:含氯消毒劑;過氧化物、醛類和環(huán)氧乙烷
2、中效消毒劑
范圍:殺滅細(xì)菌繁殖體、真菌及大多數(shù)病毒
適用:不耐熱,但要進(jìn)入人體帶菌部位物品
3、低效消毒劑
范圍:殺滅多數(shù)細(xì)菌繁殖體、部分真菌及病毒
適用:物體及機(jī)體表面(二)根據(jù)殺菌能力分類44四、消毒滅菌的運(yùn)用醫(yī)療器械物品的消毒滅菌室內(nèi)空氣消毒滅菌:紫外線、濾過除菌;化學(xué)消毒劑噴霧、熏蒸手和皮膚消毒:75%乙醇、2%碘酊、0.5%洗必泰黏膜消毒:3%H2O2、0.1%高錳酸鉀等、0.5%洗必泰病人排泄物與分泌物:等量的20%漂白粉、5%石炭酸
或2%來蘇兒攪拌均勻,作用2小時(shí)病人污染物品的消毒飲水消毒:氯氣、漂白粉環(huán)境的消毒45五、影響消毒滅菌效果的因素微生物種類;微生物的生理狀態(tài);微生物的數(shù)量;消毒劑性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間;多數(shù):高濃度殺菌作用強(qiáng)大
乙醇例外:70-75%最好溫度:溫度升高提高消毒效果酸堿度;有機(jī)物。46傳統(tǒng)分類
據(jù)生物學(xué)性狀分類2.種系分類(phylogenicclassification)
自然分類法
(naturalclassification)
以細(xì)菌的發(fā)育進(jìn)化關(guān)系為基礎(chǔ)第六節(jié)細(xì)菌的分類一、細(xì)菌的分類原則與層次47表型分類
據(jù)形態(tài)和生理特征為依據(jù)2.分析分類
3.
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