我課間檢導(dǎo)論病毒感染與免疫

一、病毒的變異現(xiàn)象（一）毒力變異（virulent

variation）（二）抗原性變異(antigenic

variation)（三）宿主范圍變異：宿主范圍突變株：由于病毒基因組改變影響了對(duì)宿主細(xì)胞的感染范圍，可感染野生型病毒不能感染的細(xì)胞，也可利用其特性制備疫苗。1第四節(jié) 病毒的遺傳和變異（四）條件致死性突變：條件致死性突變株在某種條件下能夠增殖，而在另種條件下不能增殖的病毒株。溫度敏感突變（五）耐藥突變株(drug-resistant

mutant)

：因編碼病毒酶基因的改變而降低了靶酶對(duì)藥物的親和力或作用，從而使病毒對(duì)藥物不敏感而能繼續(xù)增殖。2二、病毒變異機(jī)制3（一）突變（二）基因重組與重配基因重組：兩種有不同生物學(xué)性狀而有親緣關(guān)系的病毒在感染同一細(xì)胞時(shí)，病毒之間發(fā)生基因的交換而形成子代的過(guò)程。重配：通過(guò)交換RNA節(jié)段而進(jìn)行重組。交叉4隨機(jī)5（三）整合：病毒基因組與細(xì)胞基因組（四）病毒非基因組變異所致的表型改變互補(bǔ)、表型混合、核殼轉(zhuǎn)移6第五節(jié)病毒的感染與免疫病毒的傳播方式一、水平傳播病毒在人群不同個(gè)體間的傳播病毒侵入機(jī)體的三大重要門(mén)戶皮膚呼吸道消化道7二、垂直傳播通過(guò)胎盤(pán)或產(chǎn)道，病毒由母親傳給胎兒的方式胎盤(pán)

產(chǎn)道8（一）病毒對(duì)宿主細(xì)胞的直接作用1．溶細(xì)胞效應(yīng)（cytocidal

effect）病毒在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制成熟，并于很短時(shí)間內(nèi)大量增殖，引起細(xì)胞裂解，釋放出病毒，在普通顯微鏡下可見(jiàn)到明顯的細(xì)胞病變（cytopathic

effect,CPE），正常細(xì)胞9CPE細(xì)胞病毒的致病機(jī)制2．穩(wěn)定狀態(tài)感染（steady

state

infection）10有些病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖不引起細(xì)胞溶解死亡，也不阻礙細(xì)胞代謝，呈穩(wěn)定狀態(tài)感染，稱為非溶解細(xì)胞病毒。所引起的感染稱為穩(wěn)定狀態(tài)感染。細(xì)胞融合（cell

fusion）細(xì)胞膜出現(xiàn)新抗原(new

antigen

presented

in

cell

membrane)3．細(xì)胞凋亡（cell

apoptosis）細(xì)胞基因自身指令發(fā)生的一種程序性死亡。4．包涵體的形成有些病毒感染的細(xì)胞在顯微鏡下可觀察到胞質(zhì)或核內(nèi)出現(xiàn)嗜酸性或嗜堿性，圓/橢圓形/不規(guī)則形狀的團(tuán)塊結(jié)構(gòu)，大小、數(shù)目不等，稱為包涵體（inclusion）

。5．細(xì)胞轉(zhuǎn)化增生6．病毒基因的整合：病毒DNA或RNA的互補(bǔ)DNA整合入細(xì)胞染色體上或以質(zhì)粒形式存在于細(xì)胞質(zhì)中，稱整合感染通過(guò)兩種方式整合入宿主細(xì)胞11免疫病理?yè)p傷及對(duì)免疫系統(tǒng)的影響體液免疫、細(xì)胞免疫的損傷作用循環(huán)-免疫復(fù)合物引起的損傷自身免疫應(yīng)答引起的損傷抗體增強(qiáng)病毒感染作用12（二）病毒感染引起的機(jī)體變化感染的類型向外播散病毒機(jī)體獲得特異性免疫隱性感染顯性感染慢性感染

潛伏感染

慢發(fā)病毒感染13急性感染持續(xù)性感染↙

↓↘顯性感染（apparent

infection）14病毒感染后，患者出現(xiàn)明顯的臨床癥狀 可表現(xiàn)為局部和全身感染；急性感染：潛伏期短，發(fā)病急，病程短，恢復(fù)后 病毒被徹底清除，機(jī)體獲得免疫力。如流感，甲肝等。持續(xù)性感染（persistent

infection）：病毒在體內(nèi)持續(xù)存在幾個(gè)月,幾年,幾十年，甚至終身攜帶，經(jīng)常/反復(fù)有病毒排除體外，但缺乏持續(xù)性的臨床表現(xiàn)。慢性感染（chronic

infection）15顯性、隱性感染后，病毒未完全清除，持續(xù)存在血液或組織中，處于持續(xù)增殖狀態(tài)，并不斷排出體外。臨床癥狀可有、可無(wú)。病程長(zhǎng)（數(shù)月、數(shù)年、數(shù)十年），病毒慢性進(jìn)行性損傷機(jī)體，并能檢出病毒的存在。病程長(zhǎng)病毒可檢出如HBV潛伏感染（latent

infection）顯、隱性感染后，病毒存在于一定組織或細(xì)胞內(nèi)，不產(chǎn)生感染性病毒體。在某些條件下，病毒基因

被激活而急性發(fā)作，增殖出病毒顆粒，出現(xiàn)顯性

感染?？煞磸?fù)激活，急性發(fā)作，病毒只有在急性發(fā)作時(shí)才被檢出。如HSV、VZV慢發(fā)病毒感染（slow

virus

infection）16又稱遲發(fā)病毒感染（delay

infection）;

病毒感染后，在機(jī)體內(nèi)經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期潛伏(數(shù)月、數(shù)年、數(shù)十年)后，出現(xiàn)慢性進(jìn)行性疾病，最終導(dǎo)致死亡;常見(jiàn)病毒引起：HIV→

AIDS;麻疹病毒→亞急性硬化性全腦炎（SSPE）非常見(jiàn)病毒/待定致病因子引起：朊?！虬W疫(scrapie)，庫(kù)魯病(Kulu)等抗病毒免疫17一、非特異性免疫1、屏障作用2、巨噬細(xì)胞的作用3、干擾素——獲得性非特異性免疫干擾素18定義：由病毒或其他干擾素誘生劑刺激機(jī)體細(xì)胞所產(chǎn)生的一種具有多種生物學(xué)作用的糖蛋白種類：IFN類型主要來(lái)源特點(diǎn)I型αIFN人WBC抑制病毒作用I>IIβIFN人成纖維CII型γIFNTC免疫調(diào)節(jié)作用II>I作用機(jī)理

不是直接殺滅病毒IFN→細(xì)胞基因→抗病毒蛋白(蛋白激酶,磷酸二脂酶,2’-5’腺嘌呤核苷合成)↓降解病毒mRNA抑制病毒蛋白合成抑制病毒組裝、釋放↓抑制病毒復(fù)制↓中斷病毒感染；限制病毒擴(kuò)散19生物學(xué)活性:廣譜的抗病毒作用；抑制病毒感染、阻止病毒在體內(nèi)擴(kuò)散、促進(jìn)痊愈;調(diào)節(jié)免疫功能；抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)；IFN作用特點(diǎn):產(chǎn)生早；中斷受染細(xì)胞的病毒感染，限制病毒擴(kuò)散；IFN誘導(dǎo)的抗病毒蛋白，只對(duì)病毒起作用，不影響宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)合成。20二、特異性免疫細(xì)胞免疫：體液免疫：按種類：IgG

IgM

IgA按功能：中和抗體、補(bǔ)體結(jié)合抗體、血凝抑制抗體中和抗體：定義、機(jī)理和免疫球蛋白的類型抗病毒免疫的主要成分TD、TC

、NK、M21理化因素對(duì)病毒的影響22溫度：大多病毒耐冷不耐熱，但有例外的，如HBV等pH：病毒在pH5.0以下或pH9.0以上迅速滅活射線：γ射線，χ射線，紫外線多能使病毒滅活氧化劑，鹵素及其他化合物有滅活病毒的功能酚類可除去病毒衣殼蛋白

脂溶劑可破壞有包膜的病毒甲醛可破壞對(duì)病毒的感染性而對(duì)抗原性影響不大23組織培養(yǎng)器官培養(yǎng)移植培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)原代細(xì)胞培養(yǎng)

二倍體細(xì)胞培養(yǎng)傳代細(xì)胞培養(yǎng)三大培養(yǎng)方法（三）病毒的培養(yǎng)方法動(dòng)物接種雞胚接種（三）病毒的培養(yǎng)方法25動(dòng)物接種優(yōu)點(diǎn)：體外培養(yǎng)生長(zhǎng)緩慢的嗜神經(jīng)V、方法簡(jiǎn)便缺點(diǎn)：動(dòng)物可能攜帶V（需要認(rèn)證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物） 飼養(yǎng)工作量大。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小/大鼠，豚鼠，兔，猴等。接種途徑：鼻內(nèi),皮內(nèi),皮下,腦內(nèi),腹腔,靜脈等。雞胚接種一般9-14天的雞胚。優(yōu)點(diǎn)：本身不帶V；易管理；接種簡(jiǎn)便。缺點(diǎn)：不易大量制備病毒；接種部位尿囊腔、羊膜腔流感V、腮腺炎V卵黃囊流行性乙型腦炎V26組織培養(yǎng)27定義：將離體活組織塊/器官/分散的 活細(xì)胞，給予適當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)條件， 使其在體外繼續(xù)生存或增殖，統(tǒng)稱為組織培養(yǎng)。器官培養(yǎng)、移植培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)28分散的活細(xì)胞在體外培養(yǎng)。用途：分離培養(yǎng)V；制備疫苗；研究V與C相互作用；檢測(cè)中和Ab；包括：原代細(xì)胞培養(yǎng)；傳代細(xì)胞培養(yǎng)：二倍體細(xì)胞株傳代細(xì)胞系:病毒感染的診斷與防治原則29一.病毒感染的診斷：1.標(biāo)本的采集、送檢:原則：盡早采取部位適宜冷藏速送：冰塊或干冰50%的甘油緩沖鹽水抗生素雙份血清標(biāo)本：急性期、恢復(fù)期雙份血清檢驗(yàn)標(biāo)本→殺滅雜菌

(青鏈霉素)接種動(dòng)物接種→出現(xiàn)病狀

雞胚接種→病變或死亡細(xì)胞培養(yǎng)→細(xì)胞病變鑒定病毒種型302.

方法:病毒分離的一般程序：（1）V分離培養(yǎng)與鑒定：V分離培養(yǎng)方法：細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物接種、雞胚接種鑒定方法：CPE、血吸附現(xiàn)象、用已知Ab檢測(cè)V-Ag顯微鏡：特征性的包涵體電鏡：直接觀察V顆粒。HRVSARS-CoV31病毒抗原、特異性抗體的檢查檢測(cè)患者Ab；已知Ag：V裂解Ag、基因工程抗原等；被檢Ab：IgM--早期診斷；IgG--雙份血清Ab效價(jià)≥或≤4倍；方法