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文檔簡介

#附件3馬傳染性貧血病毒分離鑒定通常是將病料接種于健康馬駒或接種于馬白細(xì)胞培養(yǎng)物，其中以接種馬駒法更為敏感。馬匹接種試驗(yàn)試驗(yàn)駒：選自非馬傳染性貧血（以下簡稱馬傳貧）疫區(qū)，1~2歲，經(jīng)3周以上系統(tǒng)檢查，確認(rèn)健康者。接種材料：無菌采取可疑馬傳貧馬（最好是可疑性較大或高熱期病馬）的血液。如懷疑混合感染時(shí)，須用細(xì)菌濾器過濾血清，接種材料應(yīng)盡可能低溫保存，保存期不宜過長。接種前進(jìn)行無菌和安全檢查。接種方法：常用2~3匹馬的材料等量混合，接種2匹以上的試驗(yàn)駒，皮下接種0.2~0.3mL左右。觀察期3個(gè)月。每日早、晚定期測溫兩次，定期進(jìn)行臨床、血液學(xué)及抗體檢查。當(dāng)馬駒發(fā)生典型馬傳貧的癥狀和病理變化，或血清中出現(xiàn)馬傳貧特異性抗體時(shí)，即證明被檢材料中含有馬傳貧病毒。用白細(xì)胞培養(yǎng)物分離病毒培養(yǎng)驢白細(xì)胞1~2天后，細(xì)胞已貼壁并伸出突起,換入新鮮營養(yǎng)液，并在營養(yǎng)液中加入被檢材料，接入被檢材料的量應(yīng)不大于營養(yǎng)液量的10%，否則可能使培養(yǎng)物發(fā)生非特異性病變。也可在傾棄舊營養(yǎng)液后,直接接種被檢材料,37℃吸附1~2小時(shí)后吸棄接種物，換入新鮮營養(yǎng)液。初代分離培養(yǎng)通常難以出現(xiàn)細(xì)胞病變，一般需盲傳2~3代，甚至更多的代次（每代7~8天）。如果被檢材料中有馬傳貧病毒存在，培養(yǎng)物將最終出現(xiàn)以細(xì)胞變圓、破碎、脫落為特征的細(xì)胞病變。為了證明細(xì)胞病變是由馬傳貧病毒而不是由其它原因引起的，應(yīng)該以馬傳染性貧血酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（間接法）等檢查培養(yǎng)物的抗原性。如果引起白細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)

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