陰道微生態(tài)評價

陰道微生態(tài)評價第一頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四護理生殖道關(guān)注微生態(tài)最重要！第二頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四陰道粘膜陰道正常菌群陰道免疫系統(tǒng)陰道微生態(tài)概念陰道防御系統(tǒng)陰道微生態(tài)是陰道最重要的防御系統(tǒng)第三頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四陰道原籍菌(乳酸桿菌)數(shù)量:8x107cfu/ml5%95%123

正常育齡婦女陰道菌群由六種不同種類的細菌以及念珠菌、支原體等組成。正常陰道內(nèi)有100種微生物存在。這些微生物在陰道內(nèi)形成生態(tài)平衡。陰道菌群（陰道的微生態(tài)系統(tǒng)）陰道微生態(tài)概念第四頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四CFU(Colony-FormingUnits)經(jīng)培養(yǎng)所得菌簇形成單位的英文縮寫。細菌（可見）和真菌的測量單位。cfu:colony-formingunit，菌落形成單位，將稀釋后的一定量的菌液通過澆注或涂布的方法，讓其內(nèi)的微生物單細胞一一分散在瓊脂平板上，待培養(yǎng)后，每一活細胞就形成一個菌落。與常規(guī)利用顯微鏡對微生物數(shù)量進行測量不同，主要是對可見（即多數(shù)情況下形成菌落）的細菌數(shù)量進行測量的單位。意思就是每毫升菌液中含有多少單細胞！第五頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四陰道粘膜上皮細胞縱切面示意圖（過路菌）乳桿菌（原籍菌）（條件致病菌）是由不同種屬的宿主傳來的是其自身宿主個體對其無免疫反應(yīng)或低免疫反應(yīng)，是宿主個體固有的菌群是由同種屬不同宿主個體傳來的陰道微生態(tài)概念第六頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四乳桿菌的作用機制分解糖原，維持陰道酸性環(huán)境。產(chǎn)生多種抑菌物質(zhì)：乙酸、16-18碳脂肪酸

H202、乳酸菌素、硬脂酸等。競爭粘附：也稱占位性保護。競爭營養(yǎng)物質(zhì)：大量定位于陰道中的乳桿菌處于競爭優(yōu)勢狀態(tài)，利用陰道上皮細胞中的糖原，減少其他細菌的碳源供應(yīng)，通過競爭營養(yǎng)物質(zhì)而干擾一些厭氧菌如白色假絲酵母菌（白念）的生長。第七頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四維持酸性環(huán)境形成保護性菌膜殺滅致病菌乳酸桿菌正常陰道菌群作用陰道微生態(tài)平衡的核心：維持乳酸菌特別是產(chǎn)H2O2乳酸菌在陰道菌群中的優(yōu)勢地位！

在陰道粘膜表面形成一層保護性菌膜，防止入侵微生物在陰道粘膜上定植乳酸菌產(chǎn)生的乳酸使陰道分泌物維持酸性環(huán)境；乳酸菌產(chǎn)生的H2O2可殺滅入侵的致病菌。陰道微生態(tài)概念第八頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四

乳桿菌數(shù)量減少，生化指標改變，陰道微生態(tài)破壞陰道菌群失調(diào)各類陰道炎加重陰道菌群失調(diào)各種誘因各類陰道炎的共性---源于或伴有微生態(tài)破壞！為什么要關(guān)注陰道微生態(tài)第九頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四菌群演變造成菌群結(jié)構(gòu)改變，特點：1、厭氧菌需氧菌、等條件致病菌大量增加

2、乳酸菌特別是產(chǎn)過氧化氫乳酸菌減少或消失所有的陰道感染都源于或伴有陰道微生態(tài)改變第十頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四

乳酸菌%厭氧菌%加德納菌%支原體%

LB-

LB正常80-10070-100

10-400-30

20-40宮頸炎10-4010-3030-5020-4060-80BV

0-20

0-10

40-70

60-80

40-60滴蟲陰道炎10-400-2010-300-3020-40霉菌陰道炎20-500-4020-3010-4020-30

老年性陰道炎0-200-1040-6020-4050-60第十一頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四通過形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)和分子生物學(xué)等方法所獲得的陰道菌群數(shù)量和功能方面的信息分析陰道菌群結(jié)構(gòu)的演替正常優(yōu)勢菌的菌群數(shù)量與功能變化條件致病微生物菌群數(shù)量與功能變化外來致病微生物菌群數(shù)量與功能變化機體反應(yīng)水平如何評價陰道微生態(tài)？--陰道微生態(tài)評價的內(nèi)涵為什么要關(guān)注陰道微生態(tài)第十二頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四形態(tài)學(xué)＋生物標志物菌群數(shù)量與功能的變化形態(tài)學(xué)評價---菌群數(shù)量的變化：

形態(tài)學(xué)的方法系統(tǒng)的方法----------陰道微生態(tài)評價內(nèi)容陰道微生態(tài)評價的內(nèi)容第十三頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四

標本中細菌分布、排列的密集程度，即每克或每毫升標本中的菌落數(shù)。分級標準(放大倍10×100觀察每視野平均細菌數(shù))I級（記為“+”）1個～9個

II級（記為“++”）

10個～99個

III級（記為“+++”）

100個以上

IV級（記為“++++”）細菌聚集成團

(涂片中所見細菌種類)

I級（記為“+”）能辨別1～3種細菌；

II級（記為“++”）

能辨別4～6種細菌；

III級（記為“+++”）能辨別7～10種細菌；

IV級（記為"++++"）能辨別11種以上細菌。(局部有無炎癥---菌群的致病性)有無白細胞、膿細胞滲出，有無吞噬現(xiàn)象等。？菌群的密集度機體炎性反應(yīng)菌群的多樣性優(yōu)勢菌陰道微生態(tài)形態(tài)學(xué)評價

存在的問題

形態(tài)學(xué)評價結(jié)果的可靠性與實驗室人員的技能和責任有關(guān)不能了解陰道菌群中正常優(yōu)勢菌和有害菌的功能陰道微生態(tài)評價的內(nèi)容第十四頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四

A、正常優(yōu)勢菌功能生物學(xué)標志B、致病微生物與條件致病微生物增殖的生物學(xué)標志C、機體反應(yīng)性的生物學(xué)標志了解菌群數(shù)量的變化形態(tài)學(xué)評價生物標志物了解菌群數(shù)量與功能的變化陰道微生態(tài)系統(tǒng)評價陰道微生態(tài)評價的內(nèi)容第十五頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四

唾液酸苷酶BV↑門冬酰胺蛋白酶霉菌性陰道炎↑胱胺酰蛋白酶滴蟲性陰道炎↑乳酸脫氫酶急性化膿性陰道炎↑透明質(zhì)酸酶BV、淋菌性陰道炎↑白細胞酯酶宮頸炎及各種陰道感染↑

短鏈脂肪酸（如乙酸、琥珀酸）增加單胺和多胺增加（胺試驗陽性）菌胞壁糖類（如阿拉伯醇糖）增加

陰道微生態(tài)評價的方法生物化學(xué)方法微生物學(xué)方法分子生物學(xué)方法免疫學(xué)方法1優(yōu)勢菌(乳酸菌)功能的生化標志物2致病與條件致病微生物增殖的生化標志物3機體反應(yīng)性的生化標志物

乳酸菌代謝包括：過氧化氫、乳酸乳酸菌素微生物代謝產(chǎn)物

細菌、衣原體等病原體大量增殖→白細胞吞噬病原體過多→病原體釋放的水解酶和毒素分解白細胞壁→白細胞酯酶釋放到胞外→分泌物中白細胞酯酶活性增高。第十六頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四過氧化氫濃度SNA活性LE活性生態(tài)優(yōu)勢菌指標致病菌指標宿主反應(yīng)指標衛(wèi)生部十年百項計劃推廣項目江西省星火計劃項目浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生科技重點推廣項目了解陰道菌群結(jié)構(gòu)和功能的變化，評價陰道的微生態(tài)狀況陰道微生態(tài)評價適宜技術(shù)

陰道微生態(tài)評價適宜技術(shù)--------細菌性陰道病聯(lián)合測定技術(shù)介紹

第十七頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四標本采集要規(guī)范各種病原體的性質(zhì)和檢測要求的不同，決定了標本的種類、取材部位、和保存條件標本運輸方式等都有不同，采集標本上如有錯誤或疏忽，都會影響檢驗結(jié)果。標本采集的規(guī)范第十八頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四

一般陰道感染診斷的取材，須取陰道后穹隆部位的分泌物。取材前，要用一支棉簽揩去取材部位堆積的膿液，用另一支棉簽取材，為提高陽性率，還可采用重復(fù)兩次取材或兩個部位的標本混合后檢驗的方法。

要盡量使用大一些的棉簽取樣，要將棉簽在取材部位旋轉(zhuǎn)并停留20秒

要使用試劑盒配套的保存液保存標本。標本在2-8℃保存不宜超過2天。取材之前24小時內(nèi)，應(yīng)無性交、無盆浴或陰道沖洗；在48小時內(nèi)未使用陰道潤滑劑或陰道“興奮劑”等化學(xué)物質(zhì)一般要求取材部位要準確取材方法要得當標本量要充足標本要正確保存及時檢驗正確取材要把握一下幾點標本采集的規(guī)范第十九頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四檢驗原理H2O2——陰道乳酸桿菌標志物唾液酸苷酶NAase——加德納菌、游動彎曲桿菌等BV致病菌的標志物。白細胞酯酶——炎性細胞的標志物。第二十頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四H2O2（反應(yīng)裝置上部的反應(yīng)孔）陰道液中過氧化氫經(jīng)過過氧化物酶作用，釋放出新生態(tài)氧，后者在4-氨基安替吡啉存在下，使3,5-二氯-2-羥基苯磺酸氧化成紅色或紫色，在反應(yīng)系統(tǒng)中加入3,5-二氯-2-羥基苯磺酸的拮抗物，當標本中H2O2濃度≥2μmol/L，反應(yīng)結(jié)果呈紅色或紫色，呈色深度與H2O2

濃度成正比，標本中H2O2濃度＜2μmol/L，反應(yīng)結(jié)果呈藍色。結(jié)果判讀：陰性：顯紅色、紫色或藍紫色陽性：藍色參考范圍：≥2μmol/L為陰性第二十一頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四唾液酸苷酶活性測定

（反應(yīng)裝置中部的反應(yīng)孔）唾液酸苷酶水解5-溴-4-氯-3-吲哚神經(jīng)氨酸鹽，釋放出溴吲哚基遇重氮鹽起反應(yīng)呈紅色或紫色，呈色深度與唾液酸苷酶活性呈正比。結(jié)果判讀：陰性：不顯色或黃色陽性：紅色、紫色或藍色，顯藍色表示唾液酸苷酶活性濃度很高。參考范圍：＜7U/ml為陰性第二十二頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四白細胞酯酶（反應(yīng)裝置下部的反應(yīng)孔）白細胞酯酶水解5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽，釋放出溴吲哚基，后者在氧的條件下呈藍色或綠色，呈色深度與白細胞酯酶活性成正比。結(jié)果判讀：參照比色板比色判讀結(jié)果陰性：“-”或“±”陽性：“+”、“++”、“+++”參考范圍：白細胞酯酶＜7U/ml為陰性第二十三頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四

產(chǎn)過氧化氫乳酸菌占優(yōu)勢地位

粘膜修復(fù)炎癥消失

無引發(fā)BV的細菌繁殖正常正常陰性異常增

高陽性過氧化氫濃度LE活性SNa活性乳酸菌減少或消失各種陰道感染致病菌、條件致病菌增加陰道微生態(tài)評價適宜技術(shù)第二十四頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四糾正了以白細胞升高才為“炎癥”的生殖道感染的概念陰道感染診斷治療思路的新突破臨床用途指導(dǎo)婦產(chǎn)科臨床醫(yī)師從微生態(tài)角度重新審視婦科感染性疾病；關(guān)注感染及治療后的陰道微生態(tài)狀況，樹立“將陰道微生態(tài)恢復(fù)正常作為陰道炎治療的最終目標”的理念。A、彌補現(xiàn)有白帶常規(guī)檢查只做形態(tài)學(xué)檢查、不做生化檢查，不能準確判斷感染的程度及陰道微生態(tài)、不能評價預(yù)后等不足；B、陰道微生態(tài)評價C、從微生態(tài)角度評價陰道炎是否治愈；D、陰道生態(tài)制劑的用藥指標；E、了解產(chǎn)后陰道生態(tài)，確定是否恢復(fù)性生活；F、BV診斷與療效評價，需氧菌陰道炎、衣原體感染篩查。陰道微生態(tài)評價意義第二十五頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四機體反應(yīng)的生化標志物白細胞對細菌的吞噬過程陰道微生態(tài)評價的內(nèi)容第二十六頁，共三十二頁，編輯于2023年，星期四

白細胞數(shù)量與白細胞酯酶的關(guān)系