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文檔簡介
實驗部分
1、雞胚孵化—病毒接種(NDV)—收毒—效價測定(HA和HI)
2、雞胚孵化—雞胚成纖維細(xì)胞的制備
3、傳代細(xì)胞培養(yǎng)與TCID50測定
4、中和試驗(測血清效價)
5、細(xì)胞染色體數(shù)目分析本文檔共57頁;當(dāng)前第1頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分第一章病毒的基本特性與分類
本文檔共57頁;當(dāng)前第2頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分三菌:四體:一毒:一蟲:微生物種類細(xì)菌、放線菌、真菌支原體、立克次氏體、衣原體、螺旋體病毒寄生蟲本文檔共57頁;當(dāng)前第3頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分一、病毒的基本特征(病毒與其它微生物的本質(zhì)區(qū)別)TheirgrowthonartificialmediaDivisionbybinaryfission
WhethertheyhavebothDNAandRNA
Whethertheyhaveribosomes
Whethertheyhave
muramic
acid
Theirsensitivitytoantibiotics
Bacteria
++++++Mycoplasma++++-+Rickettsia-+++++Chlamydia-+++-+Viruses------本文檔共57頁;當(dāng)前第4頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分不具有細(xì)胞結(jié)構(gòu),也不進(jìn)行蛋白質(zhì)、糖和脂類的代謝活動,對抗生素具有明顯的抵抗力。病毒體核衣殼核心衣殼殼粒原體蛋白亞單位細(xì)胞
原核細(xì)菌、藍(lán)藻真核單細(xì)胞和多細(xì)胞
囊膜纖突本文檔共57頁;當(dāng)前第5頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分只具有一種類型的核酸:或DNA或RNA。缺乏完整的酶系統(tǒng),不具備能量合成系統(tǒng),也不具有核糖體。特殊的繁殖方式:不是以二分裂而是以復(fù)制的方式進(jìn)行繁殖。絕對的細(xì)胞內(nèi)寄生。本文檔共57頁;當(dāng)前第6頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分某些RNA病毒(反轉(zhuǎn)錄病毒)的RNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成cDNA,與細(xì)胞基因組整合,并隨細(xì)胞DNA的復(fù)制而增殖,即所謂的DNA前病毒。本文檔共57頁;當(dāng)前第7頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分AproteincapsidthatcontainDNAorRNA(asgeneticmaterials)andiscapableofreplicationitselfinsidehostcells.Theremaybelipidlayercoatingonthecapsid.Itisaproteinboxcontainingnucleicacids.Theboxmayhavelipidsurface.WhatisaVirus?本文檔共57頁;當(dāng)前第8頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分二、病毒體的形態(tài)結(jié)構(gòu)病毒的大小病毒的形狀病毒的殼體結(jié)構(gòu)本文檔共57頁;當(dāng)前第9頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分大小范圍15-400nm
多數(shù)40-200nm最大的病毒:最小的病毒:病毒的大小Relativesizeofvirusesandbacteria痘病毒豬圓環(huán)病毒(PCV)小RNA病毒(FMDV)Bacterium(Staphylococcusaureus)本文檔共57頁;當(dāng)前第10頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分A、大腸桿菌噬菌體(65×95nm)B、腺病毒(70nm)C、脊髓灰質(zhì)炎病毒(30nm)D、乙腦病毒(40nm)E、蛋白分子(10nm)F、流感病毒(100nm)G、煙草花葉病毒(TMV)本文檔共57頁;當(dāng)前第11頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分球形顆粒桿狀顆粒復(fù)雜形狀顆粒病毒的形狀本文檔共57頁;當(dāng)前第12頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分1、球形顆粒(多數(shù)動物病毒)擬球形顆粒等軸顆粒(無囊膜的球形顆粒)本文檔共57頁;當(dāng)前第13頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分2、桿狀顆粒(多數(shù)植物病毒)CloseupofTMVrodsTMV(TEMx376,200)CloseupofasingleTMVrod直桿狀煙草花葉病病毒彎曲桿狀馬鈴薯病毒絲形甜菜黃花病毒線形病毒組馬鈴薯X病毒組本文檔共57頁;當(dāng)前第14頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分3、復(fù)雜形狀顆粒蝌蚪狀有尾噬菌體磚形或卵形痘病毒多形性流感病毒流感病毒具有球形、橢圓形、桿狀、絲狀、蝌蚪狀等多種形態(tài)本文檔共57頁;當(dāng)前第15頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分病毒的殼體結(jié)構(gòu)
二十面體對稱螺旋對稱復(fù)合對稱本文檔共57頁;當(dāng)前第16頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分1、二十面體對稱(icosahedralsymmetry)
5、3、2構(gòu)型,或5、3、2次軸對稱本文檔共57頁;當(dāng)前第17頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分以頂為軸旋轉(zhuǎn)72°,其形不變,要轉(zhuǎn)5次復(fù)位以面為中心,旋轉(zhuǎn)120°,其形不變,要轉(zhuǎn)3次復(fù)位以棱為中心,旋轉(zhuǎn)180°,其形不變,要轉(zhuǎn)2次復(fù)位二十面體對稱有12頂、20面和30棱故又稱5、3、2構(gòu)型,或5、3、2次軸對稱本文檔共57頁;當(dāng)前第18頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分DNA病毒:虹彩病毒科、腺病毒科、乳頭狀瘤病毒科、多形瘤病毒科、非洲豬瘟病毒科、皰疹病毒科、嗜肝DNA病毒科、細(xì)小病毒科、圓環(huán)病毒科RNA病毒:呼腸孤病毒科、雙RNA病毒科、小RNA病毒科、杯狀病毒科、戊肝病毒科、星狀病毒科、披膜病毒科、黃病毒科、動脈炎病毒科、反轉(zhuǎn)錄病毒科本文檔共57頁;當(dāng)前第19頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分2、螺旋對稱(helicalsymmetry)
副流感病毒的破碎病毒粒子,箭頭所指為螺旋對稱的核衣殼,右圖為模式圖本文檔共57頁;當(dāng)前第20頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分多為有囊膜的病毒。在動物病毒中螺旋對稱的病毒均屬有囊膜的單股RNA病毒。RNA病毒:彈狀病毒科、副粘病毒科、絲狀病毒科、波納病毒科、正粘病毒科、布尼病毒科、嵌沙樣病毒科、冠狀病毒科本文檔共57頁;當(dāng)前第21頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分由二十面體對稱和螺旋對稱兩部分組成,如有尾噬菌體:頭部呈二十面體對稱,尾部呈螺旋對稱。3、復(fù)合對稱殼體(complexsymmetry)本文檔共57頁;當(dāng)前第22頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分不規(guī)則的二十面體結(jié)構(gòu)
T-偶數(shù)噬菌體,由兩個半個二十面體通過一短六棱柱連接形成。逆轉(zhuǎn)錄病毒包膜內(nèi)有一個二十面體對稱的殼體,殼體內(nèi)還有由病毒RNA與蛋白質(zhì)結(jié)合形成的,可能為螺旋對稱的核糖核蛋白核心。
本文檔共57頁;當(dāng)前第23頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分呼腸孤病毒具有兩層殼體,內(nèi)殼體和外殼體均為二十面體對稱痘病毒衣殼無明顯的對稱形式本文檔共57頁;當(dāng)前第24頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分
噬菌體的大小和形態(tài)示意圖植物病毒的大小和形態(tài)示意圖本文檔共57頁;當(dāng)前第25頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分病毒體的結(jié)構(gòu)類型
根據(jù)病毒的殼體結(jié)構(gòu)和有無囊膜分為nakedicosahedral
e.g.FMDV,HAV,EDSV
nakedhelical
e.g.TMVenvelopedicosahedral
e.g.PRV,PRRSVenvelopedhelical
e.g.RV,AIV,NDVcomplex
e.g.poxvirus本文檔共57頁;當(dāng)前第26頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分三、病毒的增殖周期
動物病毒的增殖過程大致分為5個主要階段:吸附侵入脫殼病毒成分的合成裝配與釋放本文檔共57頁;當(dāng)前第27頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分吸附:可逆吸附、不可逆吸附侵入:核酸、核衣殼、完整病毒粒子脫殼:脫衣殼、脫囊膜病毒成分的合成:mRNA的轉(zhuǎn)錄、mRNA的翻譯、病毒核酸的復(fù)制、mRNA的再度轉(zhuǎn)錄、mRNA的再度翻譯裝配與釋放(裝配效率很低,只有不到50%的子代病毒組分能組裝成完整的病毒粒子)本文檔共57頁;當(dāng)前第28頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分四、病毒的分類病毒根據(jù)宿主范圍的不同分為:根據(jù)核酸的不同分為:動物病毒植物病毒細(xì)菌病毒(噬菌體)
DNA病毒(單鏈和雙鏈)RNA病毒(單鏈和雙鏈)本文檔共57頁;當(dāng)前第29頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分動物病毒的分類現(xiàn)狀:ICTV的第九次分類報告(2012年)將ICTV所承認(rèn)的2284種病毒和類病毒歸入349個屬,19個亞科,87個科,6個目,脊椎動物病毒有31個科,無脊椎動物病毒有7個科。本文檔共57頁;當(dāng)前第30頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分尾病毒目(Caudovirales)單負(fù)股病毒目(Mononegavirales)冠狀病毒科、動脈炎病毒科、桿套病毒科尼多病毒目(套式病毒目)
(Nidovirales)噬菌體副粘病毒科、彈狀病毒科、絲狀病毒科、波納病毒科蕪菁黃花葉病毒目(Tymovirales)小RNA病毒目(Picornavirales)皰疹病毒目(Herpesvirales)皰疹病毒科小RNA病毒科6個目:甲型線形病毒科Ligmenvirales本文檔共57頁;當(dāng)前第31頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分DNAVIRUSESDoublestrandComplexSinglestrandNon-envelopedEnvelopedEnvelopedNon-envelopedPolymaviridaePapillomaviridaeCircoviridaeParvoviridaePoxviridaeCircularLinearCircularLinearLinearLinearHerpesviridaeHepadnaviridaeAdenoviridaeIridoviridaeAsfarviridaeCircular本文檔共57頁;當(dāng)前第32頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分RNAVIRUSESSinglestrandpositiveDoublestrandSinglestrandnegativeenvelopedNon-EnvelopedEnvelopedNon-envelopedFlaviviridaeTogaviridaeArterviridaeCoronaviridaeRetroviridaeReoviridaeBirnaviridaeOrthomyxoviridaeBunyaviridaeArenaviridaePicornaviridaeCalciviridaeHepeviridaeAstroviridaeRhabdoviridaeParamyxoviridaeFiloviridaeBornaviridaeSegmentedgenomeSegmentedgenomeMono-partitegenome本文檔共57頁;當(dāng)前第33頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分DNA病毒
Parvoviridae細(xì)小病毒科171000X細(xì)小病毒科(Parvoviridae)
1、單鏈DNA病毒豬細(xì)小病毒(PPV)犬細(xì)小病毒(CPV)豬博卡病毒(Bocavirus)豬Hoko病毒(PHoV)科的特點(diǎn):病毒粒子無囊膜,呈球形,直徑25nm(18-26nm),衣殼二十面體對稱?;蚪M為單一分子的線狀單股DNA,大小約5kb。病毒抵抗力強(qiáng)。病毒在細(xì)胞核內(nèi)復(fù)制,需要細(xì)胞有絲分裂過程中的某些功能。本文檔共57頁;當(dāng)前第34頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分圓環(huán)病毒科(Circoviridae):Porcinecircovirus雞貧血病毒(CAV)
豬圓環(huán)病毒(PCV)科的特點(diǎn):無囊膜,球形病毒粒子,直徑17-22nm,衣殼二十面體對稱?;蚪M為單股環(huán)狀單鏈DNA,大小約。宿主范圍窄。本文檔共57頁;當(dāng)前第35頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分痘病毒科(Poxviridae)皰疹病毒科(Herpesviridae)嗜肝DNA病毒科(Hepadnaviridae)
腺病毒科(Adenoviridae)虹彩病毒科(Iridoviridae)非洲豬瘟病毒科(Asfarviridae)多瘤病毒科(Polymaviridae)乳頭瘤病毒科(Papillomaviridae)桿狀病毒科(Baculoviridae)2、雙鏈DNA病毒本文檔共57頁;當(dāng)前第36頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分痘苗病毒天花病毒牛痘病毒豬痘病毒Poxviridae痘病毒科49500X痘病毒科(Poxviridae):科的特點(diǎn):病毒粒子為磚形或卵形,大小為250×200×200nm?;蚪M為單一分子的線性雙股DNA,約170-250kb。病毒通過直接接觸傳播,宿主范圍窄。雞痘病毒鴿痘病毒羊痘病毒猴痘病毒本文檔共57頁;當(dāng)前第37頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分偽狂犬病病毒(PRV)雞傳染性喉氣管炎病毒(ILTV)鴨瘟病毒(DPV)牛傳染性鼻氣管炎病毒(IBRV)馬立克氏病病毒(MDV)
皰疹病毒科(Herpesviridae):
本文檔共57頁;當(dāng)前第38頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分科的特點(diǎn):有囊膜球形粒子,直徑約150nm。二十面體衣殼的直徑約為100nm?;蚪M為單一分子的線狀雙股DNA,大小約125-235kb。病毒從細(xì)胞核膜出芽成熟,并獲得囊膜。Herpesviridae皰疹病毒科189000×本文檔共57頁;當(dāng)前第39頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分Adenoviridae腺病毒科234000×減蛋綜合癥病毒(EDS76)雞包涵體性肝炎(IBH)特點(diǎn):病毒無囊膜,衣殼呈二十面體對稱,直徑約80-120nm?;蚪M為單一分子的線狀雙股DNA,36-44kb。病毒宿主范圍窄。許多腺病毒能引起持續(xù)性感染,有些腺病毒能在新生的倉鼠中引起腫瘤,但在其自然宿主不引起腫瘤。腺病毒科(Adenoviridae)本文檔共57頁;當(dāng)前第40頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分虹彩病毒科(Iridoviridae)非洲豬瘟病毒科(Asfarviridae)
非洲豬瘟病毒
Iridoviridae虹彩病毒科105000X科的特點(diǎn):衣殼20面體對稱,直徑約180nm。基因組為線狀單股DNA分子,大小為170-190kb。病毒以鈍緣蜱為傳播媒介。本文檔共57頁;當(dāng)前第41頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分牛乳頭瘤病毒兔乳頭瘤病毒馬乳頭瘤病毒兔口腔乳頭瘤病毒犬口腔乳頭瘤病毒
Papovaviridae乳多空病毒科135000X特點(diǎn):為無囊膜的球形病毒粒子,直徑45nm(多瘤病毒科)或55nm(乳頭瘤病毒科)。衣殼二十面體對稱。基因組為單一分子的環(huán)狀雙鏈DNA,長約5kb(多瘤病毒科)或8kb(乳頭瘤病毒科)。乳頭瘤病毒科(Papillomaviridae)多瘤病毒科(Polymaviridae)牛多型瘤病毒鼠多型瘤病毒兔腎空泡病毒猴空泡病毒40
本文檔共57頁;當(dāng)前第42頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分反轉(zhuǎn)錄病毒科(Retroviridae):(二)RNA病毒1、RNA反轉(zhuǎn)錄病毒
馬傳染性貧血病毒(EIAV)人免疫缺陷病病毒(HIV)特點(diǎn):有囊膜,病毒粒子直徑為80~100nm,衣殼為二十面體對稱,直徑為60nm。基因組為二倍體,由兩個相同的線性單股正鏈RNA組成,每個單體長約7~11kb。本文檔共57頁;當(dāng)前第43頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分2、雙股RNA病毒Reoviridae呼腸孤病毒科135000X特點(diǎn):為無囊膜的球形病毒粒子。衣殼呈二十面體對稱,直徑60~80nm。病毒粒子含有2個或3個外殼,都為二十面體對稱?;蚪M為線狀雙股RNA,由10個或11個或12個節(jié)段組成。藍(lán)舌病病毒(BTV)輪狀病毒呼腸孤病毒科(Reoviridae):呼吸道腸道孤兒本文檔共57頁;當(dāng)前第44頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分
雙RNA病毒科(Birnaviridae):Birnaviridae雙RNA病毒243000X雞傳染性法氏囊病病毒(IBDV)特點(diǎn):病毒呈二十面體對稱,球形,粒子直徑約60nm,無囊膜。無特征性雙層衣殼?;蚪M為線狀雙股RNA,分為2個節(jié)段。本文檔共57頁;當(dāng)前第45頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分3、單股負(fù)鏈RNA病毒(不分節(jié)段)副粘病毒科(Paramyxoviridae)彈狀病毒科(Rhabdoviridae)絲狀病毒科(Filoviridae)波納病毒科(Bornaviridae)
本文檔共57頁;當(dāng)前第46頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分Paramyxoviridae副粘病毒72000X新城疫病毒(NDV)犬瘟熱病毒牛瘟病毒
副粘病毒科(Paramyxoviridae):特點(diǎn):病毒粒子具有多形性(球形和絲狀兩種形式),直徑150-300nm。有囊膜與纖突,衣殼呈螺旋對稱?;蚪M為單股正鏈的線狀RNA,不分節(jié)段,長約15-16kb。病毒宿主范圍窄。本文檔共57頁;當(dāng)前第47頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分彈狀病毒科(Rhabdoviridae):Rhabdoviridae彈狀病毒216000X狂犬病病毒(RV)水皰性口炎病毒(VSV)特點(diǎn):病毒粒子呈子彈狀,大小約180X75nm,有囊膜。基因組為單一分子的負(fù)鏈單股RNA,長約13-16kb。在感染細(xì)胞胞漿中形成特異性的包涵體,稱為內(nèi)基氏小體(Negribodies)。病毒宿主范圍廣。本文檔共57頁;當(dāng)前第48頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分絲狀病毒科(Filoviridae):
埃博拉病毒(Ebolavirus,EBV)馬爾堡病毒(Marbergvirus,MBV)馬爾堡病毒本文檔共57頁;當(dāng)前第49頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分4、單股負(fù)鏈RNA病毒(分節(jié)段)正粘病毒科(Orthomyxoviridae)布尼病毒科(Bunyaviridae嵌砂病毒科(Arenaviridae)本文檔共57頁;當(dāng)前第50頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分正粘病毒科(Orthomyxviridae)Orthomyxoviridae正粘病毒135000X特點(diǎn):病毒粒子具有多形性(球形和絲狀兩種形式),直徑80~120nm。有囊膜與纖突,纖突具有血凝素與神經(jīng)氨酸酶活性。衣殼為螺旋對稱?;蚪M為單股負(fù)鏈RNA,由8個(A型與B型)或7個(C型)片段組成,總長約10~13.6kb。流感病毒本文檔共57頁;當(dāng)前第51頁;編輯于星期三\9點(diǎn)5分
布尼病毒科(Bunyaviridae):裂谷熱病毒嵌砂病毒科(Ar
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