臨床常見微生物標(biāo)本采集法及影響臨床微生物檢驗(yàn)的因素

引子：

流行病學(xué)調(diào)查顯示，臨床感染病原菌種類不斷發(fā)生變化，對(duì)抗微生物藥物的耐藥性不斷增強(qiáng)，因此，臨床醫(yī)生在抗感染治療中越來越重視病原學(xué)的檢測(cè)，對(duì)微生物室的工作要求越來越高。微生物室任務(wù)越來越愛繁重。本文檔共82頁；當(dāng)前第1頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分臨床醫(yī)生要求微生物室應(yīng)做到：

菌種鑒定準(zhǔn)確藥敏試驗(yàn)準(zhǔn)確回報(bào)結(jié)果快速及時(shí)做好咨詢與解釋工作本文檔共82頁；當(dāng)前第2頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

螺旋體衣原體支原體病毒真菌細(xì)菌病原體常見病原體種類本文檔共82頁；當(dāng)前第3頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分流程微生物學(xué)檢查個(gè)體治療感染性標(biāo)本診斷及鑒別診斷感染性疾病本文檔共82頁；當(dāng)前第4頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

在細(xì)菌檢驗(yàn)中，許多因素可以影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，我們?cè)诠ぷ鲿r(shí)應(yīng)當(dāng)加以注意，主要包括以下幾個(gè)方面：標(biāo)本的采集與運(yùn)送細(xì)菌的鑒定及藥敏試驗(yàn)結(jié)果的審核與報(bào)告本文檔共82頁；當(dāng)前第5頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

標(biāo)本的采集與運(yùn)送對(duì)于檢驗(yàn)結(jié)果的重要性

正確的采集與運(yùn)送標(biāo)本是保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確的最基本條件，如果得不到一份合格的標(biāo)本，鑒定及藥敏結(jié)果再準(zhǔn)確，結(jié)果也是不可信的。而從目前狀況看，采集一份合格的標(biāo)本，不是一件容易的事情，微生物檢驗(yàn)標(biāo)本的正確采集、運(yùn)送及處理，與細(xì)菌的培養(yǎng)、鑒定結(jié)果有十分密切的關(guān)系，醫(yī)生、護(hù)士、檢驗(yàn)人員均應(yīng)重視微生物標(biāo)本的正確采集的有關(guān)問題,并有責(zé)任向患者及家屬進(jìn)行正確采集標(biāo)本的宣傳和指導(dǎo).本文檔共82頁；當(dāng)前第6頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分典型案例

我們?cè)谂R床檢驗(yàn)工作當(dāng)中遇到過這樣的事情，腦積水患兒準(zhǔn)備進(jìn)行手術(shù)，術(shù)前三次腦脊液培養(yǎng)均分離出表皮葡萄球菌，腦脊液常規(guī)檢查正常，污染菌？病原菌？臨床請(qǐng)求會(huì)診。本文檔共82頁；當(dāng)前第7頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

標(biāo)本采集運(yùn)送中的影響因素

?抗微生物藥物對(duì)標(biāo)本的影響抗菌藥物抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，影響檢出率，應(yīng)當(dāng)在應(yīng)用抗微生物藥物之前采集標(biāo)本，或者停藥3~5天采集標(biāo)本，或在血漿藥物濃度最低時(shí)采集標(biāo)本。本文檔共82頁；當(dāng)前第8頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分?標(biāo)本留取是否正確無菌部位的標(biāo)本采集是要嚴(yán)格消毒，無菌操作，避免污染。如：血液、無菌體液。主要注意兩個(gè)方面，一是穿刺部位的消毒，二是在將標(biāo)本注入容器時(shí)的無菌操作。

本文檔共82頁；當(dāng)前第9頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分如：肺感染——痰泌尿系感染——尿膿腫——膿汁顱內(nèi)感染——腦脊液發(fā)熱——血、骨髓、尿等根據(jù)可疑感染的部采集相應(yīng)的標(biāo)本本文檔共82頁；當(dāng)前第10頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分臨床實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌分類★需氧、微需氧或兼性厭氧菌※非苛養(yǎng)菌：包括腸桿菌科細(xì)菌、假單胞類非發(fā)酵菌、不動(dòng)桿菌、葡萄球菌屬、腸球菌屬、鏈球菌屬（不含肺炎鏈球菌）※苛養(yǎng)菌：嗜血桿菌、淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌、肺炎鏈球菌★厭氧菌本文檔共82頁；當(dāng)前第11頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

標(biāo)本采集和運(yùn)送標(biāo)本采集的時(shí)間、部位、種類和數(shù)量注明相關(guān)信息（由各種病原體所致感染性疾病的病程來決定）本文檔共82頁；當(dāng)前第12頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分微生物標(biāo)本采集、運(yùn)送、驗(yàn)收和處理注意事項(xiàng)1、標(biāo)本采集（1）申請(qǐng)單必須標(biāo)記清楚姓名、性別、年齡、病原號(hào)、標(biāo)本來源（具體寫明）、檢查項(xiàng)目（目的要明確）等，以便試驗(yàn)室能夠合理選擇培養(yǎng)環(huán)境和培養(yǎng)基。（2）盡量在抗生素應(yīng)用前采集標(biāo)本、以提高陽性檢出率和避免漏檢。（3）標(biāo)本采集應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。（4）采集標(biāo)本的容器必須經(jīng)滅菌處理，不可用消毒劑。本文檔共82頁；當(dāng)前第13頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分2、標(biāo)本運(yùn)送（1）標(biāo)本采集后應(yīng)盡快運(yùn)送到細(xì)菌室。（2）標(biāo)本采集后在室溫下超過2小時(shí)未送到細(xì)菌室的，可視為不合格標(biāo)本。3、標(biāo)本驗(yàn)收（1）實(shí)驗(yàn)室只接受和處理合格標(biāo)本。（2）實(shí)驗(yàn)室對(duì)不合格標(biāo)本退回必須說明原因、并及時(shí)與臨床聯(lián)系。本文檔共82頁；當(dāng)前第14頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分注意事項(xiàng)（1）微生物檢驗(yàn)樣本必須要求采集轉(zhuǎn)運(yùn)，否則將影響檢查結(jié)果，并給評(píng)價(jià)其意義帶來麻煩甚至誤導(dǎo)。（2）微生物樣本極易被污染，污染的樣本雜菌大量繁殖抑制病原菌生長(zhǎng)，條件致病菌也是致病菌，如污染條件致病菌將誤導(dǎo)臨床，造成對(duì)患者的損害以及經(jīng)濟(jì)和時(shí)間的浪費(fèi)。（3）某些標(biāo)本離體極易死亡，應(yīng)在床邊采取和接種或立即保溫送至實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。室溫放置或延遲送檢，可使檢出的陽性率降低；不能使用冷藏的樣本檢驗(yàn)。（4）厭氧菌樣本采取必須隔絕空氣，混入空氣的樣本影響檢驗(yàn)結(jié)果，不能使用。本文檔共82頁；當(dāng)前第15頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分血液標(biāo)本

正常人血液是無菌的，血液標(biāo)本病原學(xué)檢查有助于菌血癥、敗血癥的診斷和疑由菌血癥所致其他癥狀，如皮疹、肝脾腫大、關(guān)節(jié)疼痛、昏迷休克等的鑒別診斷。并通過藥敏試驗(yàn)為臨床治療提供合理的抗生素選擇。

本文檔共82頁；當(dāng)前第16頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分采集時(shí)間發(fā)熱初期寒戰(zhàn)期抗生素應(yīng)用之前下次用藥之前本文檔共82頁；當(dāng)前第17頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分臨床常見的采血指徵

發(fā)熱（38C）或低溫（36C）寒戰(zhàn)白細(xì)胞增多（計(jì)數(shù)大于10，000109/L，特別有“核左移”未成熟的或桿狀核的白細(xì)胞）粒細(xì)胞減少（成熟的多核白細(xì)胞<1000109/L）血小板減少皮膚粘膜出血昏迷，休克多器官衰竭CRP升高采血指徵本文檔共82頁；當(dāng)前第18頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分采集方法2.采樣量：不少于培養(yǎng)基的1/10。成人采血5～10ml骨髓1-2ml兒童采血1～5ml

3.培養(yǎng)要求：除有明確的感染特征，應(yīng)同時(shí)送需氧、厭氧培養(yǎng)。1.采血部位：肘靜脈：無菌采集，1-3次其他部位：亞急性心內(nèi)膜炎等病人，從肘動(dòng)脈或股動(dòng)脈等多次采血本文檔共82頁；當(dāng)前第19頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分標(biāo)本采集后立即送檢,不宜存放于冰箱。標(biāo)本運(yùn)送本文檔共82頁；當(dāng)前第20頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分采集數(shù)量對(duì)結(jié)果的影響因素血培養(yǎng)的數(shù)量研究表明，當(dāng)每套血培養(yǎng)采血20ml時(shí)一套檢出率：65%二套檢出率：80%三套檢出率：96%目前的指南推薦采集2~3套血培養(yǎng)一套血培養(yǎng)瓶（BloodCultureSet）：血培養(yǎng)瓶接種的是同一來源的標(biāo)本（同一穿刺）

PrincipleandProcedureforBloodCulture，CLSI，M47-P,2006本文檔共82頁；當(dāng)前第21頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分Howmanybloodculturesetsshouldbedrawn?

需要抽取多少份血培養(yǎng)樣本？

抽取2-3份血培養(yǎng)樣本可使敗血癥病原菌檢出率達(dá)到~99% 敗血癥患者在初期千萬不要（NEVERdrawonly1blood）僅抽取一瓶血培養(yǎng)注意：“份”是指單獨(dú)的靜脈穿刺的數(shù)量。本文檔共82頁；當(dāng)前第22頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

懷疑急性原發(fā)性菌血癥真菌菌血癥腦膜炎2或3份血培養(yǎng)骨髓炎關(guān)節(jié)炎肺炎

采血份數(shù)徐英春，倪語星等。血培養(yǎng)操作規(guī)范，上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2002,1-31本文檔共82頁；當(dāng)前第23頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分血培養(yǎng)份數(shù)和時(shí)間不明病源的發(fā)熱，如：隱性膿腫 采集2或3份傷寒熱 波浪熱

估計(jì)體溫升高之前 （下午） 再采2份以上

24h至36h后徐英春，倪語星等。血培養(yǎng)操作規(guī)范，上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2002,1-31本文檔共82頁；當(dāng)前第24頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分血培養(yǎng)份數(shù)和時(shí)間

1h2h內(nèi)采集3份24h后陰性再采3份以上

前2周用抗生素第1天第2天第3天2份2份2份急性心內(nèi)膜炎徐英春，倪語星等。血培養(yǎng)操作規(guī)范，上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2002,1-31或可疑亞急性心內(nèi)膜炎患者每間隔一個(gè)小時(shí)采集一份,共采集3份標(biāo)本.本文檔共82頁；當(dāng)前第25頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分送檢目的：有助于泌尿系感染的診斷和鑒別診斷

尿液標(biāo)本本文檔共82頁；當(dāng)前第26頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分采集時(shí)間細(xì)菌培養(yǎng)在未使用抗生素前取晨尿，結(jié)核分枝桿菌檢查應(yīng)停用抗結(jié)核藥物1～2天后留24h尿送檢.本文檔共82頁；當(dāng)前第27頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分因尿道口寄居有正常菌群,故采集標(biāo)本應(yīng)避免雜菌污染。晨起第一次中段尿，保證尿液在膀胱內(nèi)停留時(shí)間4小時(shí)以上，留尿前清洗外陰，排尿過程不要中斷，避免污染。培養(yǎng)后有四種以上細(xì)菌生長(zhǎng)，考慮污染，防止在尿袋中直接采集尿液標(biāo)本?！蛞簶?biāo)本要定量報(bào)告※將尿液標(biāo)本接種于增菌液中或離心后取沉渣進(jìn)行培養(yǎng)都是錯(cuò)誤的。采集辦法本文檔共82頁；當(dāng)前第28頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分尿液標(biāo)本的采集方法有:1.中段尿采集法2.導(dǎo)尿法、3.腎盂尿采集法、4.膀胱穿刺尿采集法、5.24h留尿法本文檔共82頁；當(dāng)前第29頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分中段尿采集法最常用的方法，女性患者用肥皂水沖洗外陰及尿道口;男性患者用肥皂水沖洗尿道口，排出前段尿，再收集中段尿3～5ml于無菌容器內(nèi)送檢。

中段尿采集法本文檔共82頁；當(dāng)前第30頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分使用導(dǎo)尿管導(dǎo)尿是一種較好的無菌采集法,可以防止雜菌染。導(dǎo)尿法本文檔共82頁；當(dāng)前第31頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分用導(dǎo)尿管采集腎盂尿,用于確定菌尿是否來自腎臟。首先充分沖洗膀胱,以最后一次沖洗尿作對(duì)照,然后用導(dǎo)尿管插入輸尿管,分別標(biāo)記左右側(cè),收集三次尿;如果輸尿管菌數(shù)比對(duì)照管菌數(shù)多或第三次尿中菌數(shù)比第一次多,該菌尿可能來自腎臟。反之，則可能來自膀胱。腎盂尿采集法返本文檔共82頁；當(dāng)前第32頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分將病人恥骨上皮膚經(jīng)碘酒消毒后，以無菌空針作膀胱穿刺。主要用于尿液厭氧菌的培養(yǎng)，也可用于采集中段尿困難者或培養(yǎng)結(jié)果與患者病情有矛盾時(shí)。膀胱穿刺尿采集法本文檔共82頁；當(dāng)前第33頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分用一潔凈容器，留取24h尿液，取其沉淀部份盛于清潔瓶?jī)?nèi)送檢。主要用于結(jié)核分枝桿菌的檢查。

24h留尿法本文檔共82頁；當(dāng)前第34頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分尿菌落計(jì)數(shù)低于標(biāo)準(zhǔn)時(shí)應(yīng)考慮如果尿培養(yǎng)菌落數(shù)較少除考慮污染因素外，還可能有以下原因：

?用抗生素治療?尿液稀釋?尿PH<5.0或>8.5細(xì)菌生長(zhǎng)受阻?尿頻，在膀胱貯存時(shí)間短，菌落數(shù)少

?尿道口消毒液混入標(biāo)本中本文檔共82頁；當(dāng)前第35頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

標(biāo)本采集后立即送檢(1h內(nèi)),不能立即運(yùn)送者應(yīng)存放在4℃冰箱內(nèi)保存。

標(biāo)本運(yùn)送本文檔共82頁；當(dāng)前第36頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分糞便標(biāo)本送檢目的：糞便標(biāo)本病原學(xué)檢查有助于對(duì)一些腸道感染性疾病進(jìn)行病原學(xué)診斷和鑒別診斷；為臨床治療提供合理的抗生素選擇；及對(duì)腸道菌群進(jìn)行監(jiān)測(cè)，預(yù)防菌群失調(diào)。

本文檔共82頁；當(dāng)前第37頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分總體原則：應(yīng)在腹瀉急性期(3天內(nèi))及用藥前采樣。1、腹瀉患者于急性期，盡量在用藥前采集糞便。2、傷寒患者于發(fā)病2周后采集糞便。3、懷疑霍亂時(shí)立即采集糞便送檢。采集時(shí)間本文檔共82頁；當(dāng)前第38頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分1.自然排便采集法：自然排便后，固體糞便挑取膿血、粘液部份2～3ｇ；液體糞便取絮狀物2～3ml，盛于無菌容器內(nèi)送檢。2.直腸拭子法：對(duì)不易獲取糞便者，將無菌棉簽用甘油鹽水濕潤(rùn)后，插入肛門內(nèi)4～5cm(幼兒2～3cm)處，輕輕旋轉(zhuǎn)，擦取直腸表面粘液后取出,插入無菌試管或保存液中送檢。

采集方法本文檔共82頁；當(dāng)前第39頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢(1小時(shí)以內(nèi)),不能立即送檢時(shí)應(yīng)放入pH7.0的磷酸鹽甘油中保存。

標(biāo)本運(yùn)送本文檔共82頁；當(dāng)前第40頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分呼吸道標(biāo)本上呼吸道標(biāo)本：咽拭子、鼻拭子下呼吸道標(biāo)本：痰本文檔共82頁；當(dāng)前第41頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分上呼吸道標(biāo)本：最好在清晨，用清水漱口，由檢查者將舌向外拉，使懸雍垂向外牽引，用無菌棉拭子在扁桃體區(qū)域、咽后壁及口腔潰瘍處局部反復(fù)涂抹采樣，然后放入無菌試管內(nèi)立即送檢。采集辦法本文檔共82頁；當(dāng)前第42頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分下呼吸道標(biāo)本：要求采集肺深部的痰液,避免采到唾液，常見方法：①自然咳痰法：最好采集晨痰,在取標(biāo)本之前,用清水反復(fù)漱口幾次，再?gòu)臍夤苌畈靠瘸龅谝豢谔?，盛入無菌容器中立即送檢。②氣管鏡采集法：在病灶附近用導(dǎo)管或用支氣管刷直接取得標(biāo)本。③小兒采集法：用彎壓舌板向后壓舌，用無菌棉拭深入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時(shí)，可噴出肺部和氣管分泌物，粘在棉拭上，將棉拭放入無菌管中立即送檢。④氣管穿刺法：通過氣管穿刺取得痰液，主要用于厭氧菌培養(yǎng)。本文檔共82頁；當(dāng)前第43頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

通常以自然咳痰法采集標(biāo)本最常見。應(yīng)囑咐患者晨起漱口，咳深部痰，告知唾液的培養(yǎng)結(jié)果對(duì)臨床無指導(dǎo)意義，以便引起患者對(duì)留取標(biāo)本的重視。檢驗(yàn)痰液標(biāo)本是否合格應(yīng)進(jìn)行涂片。涂片合格后的痰標(biāo)本建議使用鹽水稀釋方法接種于相應(yīng)培養(yǎng)基上

本文檔共82頁；當(dāng)前第44頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

痰涂片顯微鏡檢查判別標(biāo)準(zhǔn)分類細(xì)胞數(shù)/低倍視野標(biāo)本判別白細(xì)胞鱗狀上皮細(xì)胞A＞25＜10合格，用于細(xì)菌培養(yǎng)B＞2510~25尚合格，可用于細(xì)菌培養(yǎng)C＜10＞25不合格，建議重送標(biāo)本本文檔共82頁；當(dāng)前第45頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,以防某些細(xì)菌在外環(huán)境中死亡。作結(jié)核分枝桿菌或真菌培養(yǎng)的痰液如不能及時(shí)送檢，應(yīng)置于4℃冰箱保存。

標(biāo)本運(yùn)輸本文檔共82頁；當(dāng)前第46頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分分級(jí)劃線區(qū)菌落數(shù)目1區(qū)2區(qū)3區(qū)少見（1+）﹤10少量（2+）﹥10﹤5中量（3+）﹥10﹥5﹤5多量（4+）﹥10﹥5﹥5

痰標(biāo)本在平板上的菌落量化指標(biāo)注：1+多為污染，2+污染可能，3+感染可能，4+多為感染病原菌本文檔共82頁；當(dāng)前第47頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分一般應(yīng)在用藥之前或停止用藥1～2天后采集標(biāo)本。1、腦脊液標(biāo)本（1）采集時(shí)間：懷疑腦膜炎時(shí)應(yīng)立即采集腦脊液，最好是在應(yīng)用抗生素之前采集腦脊液。（2）采集方法:無菌腰穿采集腦脊液1-3ML注入血培養(yǎng)瓶中。2、穿刺液標(biāo)本（1）穿刺液標(biāo)本包括胸腹水、關(guān)節(jié)液等。（2）無菌操作穿刺抽取標(biāo)本》1ML立即送檢。3、胃液及膽汁：抽取5ML左右后置于無菌管中立即送檢。4、深部膿液：用無菌注射器抽取后立即送檢。腦脊液與其他無菌體液標(biāo)本本文檔共82頁；當(dāng)前第48頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

采集方法1.腦脊液標(biāo)本：無菌操作腰椎穿刺，抽取腦脊液2～3ml于無菌試管中送檢。其它無菌體液標(biāo)本以無菌操作抽取標(biāo)本送檢。2.其他無菌性體液：無菌操作（漿膜腔穿刺液）大量留取本文檔共82頁；當(dāng)前第49頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分腦脊液標(biāo)本采集后應(yīng)立即保溫送檢或床旁接種,不宜置于冰箱保存。胸水、腹水等無菌體液標(biāo)本采集后立即送檢或置于冰箱4℃保存。

腦脊液不能存放于標(biāo)本其他標(biāo)本可放于冰箱保存

立即送檢標(biāo)本運(yùn)輸本文檔共82頁；當(dāng)前第50頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分眼、耳部標(biāo)本無菌采集拭子采樣局部麻醉后取角膜刮屑立即送檢本文檔共82頁；當(dāng)前第51頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分一般應(yīng)在用藥之前或停止用藥7～10天采集標(biāo)本。泌尿生殖道標(biāo)本本文檔共82頁；當(dāng)前第52頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分男性尿道拭子女性宮口取材按摩前列腺采集方法男性尿道口分泌物：先用生理鹽水局部清洗，用無菌棉拭插入尿道口1～2cm，停留半分鐘，輕輕旋轉(zhuǎn)采集標(biāo)本女性陰道及宮頸口分泌物：則需在窺陰器下操作,用長(zhǎng)的無菌棉拭采集分泌物前列腺液：按摩本文檔共82頁；當(dāng)前第53頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢或放于保存液中置4℃冰箱內(nèi)保存（淋球菌培養(yǎng)除外）。

標(biāo)本運(yùn)送本文檔共82頁；當(dāng)前第54頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分創(chuàng)傷、組織、和膿腫標(biāo)本最好在抗生素使用之前采集標(biāo)本。在創(chuàng)傷出血時(shí)、敷用藥物2h內(nèi)及燒傷后12h內(nèi)不應(yīng)采集標(biāo)本。本文檔共82頁；當(dāng)前第55頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分總體取材原則：取接近新生組織處的標(biāo)本，既可以提高陽性率，又能獲得該部感染病原菌，中心部位的膿汁，由于營(yíng)養(yǎng)差，不利于細(xì)菌生長(zhǎng)，陽性率低。開放部位的膿汁采集，應(yīng)首先用無菌生理鹽水沖洗表面污染菌，然后擠壓深部組織里的膿汁進(jìn)行培養(yǎng)。取組織進(jìn)行培養(yǎng)最好。1.清創(chuàng)、消毒2.大面積創(chuàng)傷：多部位采樣3.封閉性膿腫：無菌注射器抽取4.開放性膿腫：無菌棉拭子采集膿液及病灶深部的分泌物，5.瘺管：取組織碎片6.厭氧菌感染：應(yīng)采集深部膿液并隔絕空氣運(yùn)送。排凈注射器內(nèi)空氣，針頭插入無菌橡皮塞送檢采集方法本文檔共82頁；當(dāng)前第56頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分傷口標(biāo)本采集要求1、在傷口切開排膿時(shí)留取標(biāo)本2、不能在傷口清潔消毒后留取標(biāo)本3、盡量采集傷口深部的濃汁送檢本文檔共82頁；當(dāng)前第57頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分組織或吸取物中革蘭染色的評(píng)價(jià)鏡下所見備注出現(xiàn)鱗狀上皮細(xì)胞標(biāo)本采集技術(shù)不過關(guān)，培養(yǎng)提示皮膚菌群污染大量中性粒細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間仔細(xì)尋找病原菌，這時(shí)菌有可能在細(xì)胞內(nèi)大量的中性粒細(xì)胞，混合G-和G+小細(xì)菌混合厭氧或兼性厭氧菌感染少見或可見破損的中性粒細(xì)胞和粗大G不定的或G+b可能是梭菌屬細(xì)菌引起的組織壞死，手術(shù)應(yīng)激，提示產(chǎn)期莢膜梭菌引起的氣性壞疽中性粒細(xì)胞罕見，無其他體細(xì)胞病人沒能產(chǎn)生足夠的免疫反應(yīng)，或細(xì)菌沒有能激活中性粒細(xì)胞（如球菌），仍然高度懷疑細(xì)菌感染細(xì)胞內(nèi)微生物活動(dòng)性細(xì)菌感染小的、淺的、不規(guī)則、鏈狀排列G+c呈堆排列如果分離自膿腫,提示咽峽炎鏈球菌群(米勒鏈球菌)很細(xì)小G-b特別是如果標(biāo)本為淋巴結(jié)或組織時(shí)，這些菌可能為生物恐怖病原菌（布氏桿菌，耶爾森菌，弗朗西斯菌），標(biāo)本須在安全柜里處理。平皿需用膠帶封起來，培養(yǎng)物只能在生物安全柜中進(jìn)行。不可聞平皿。本文檔共82頁；當(dāng)前第58頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分膿液標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢或存放于保存液中。

標(biāo)本運(yùn)輸本文檔共82頁；當(dāng)前第59頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分影響微生物檢驗(yàn)的其它因素?

標(biāo)本容器是否合格 應(yīng)該采用無菌、清潔、干燥、無溢漏的容器盛裝標(biāo)本，血液、骨髓、無菌體液等標(biāo)本采用儀器法培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)將標(biāo)本直接注入特定培養(yǎng)瓶中，但在注入標(biāo)本之前，應(yīng)該將瓶塞進(jìn)行消毒。

本文檔共82頁；當(dāng)前第60頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

根據(jù)標(biāo)本的種類選擇合適的容器。厭氧菌培養(yǎng)，應(yīng)將標(biāo)本置厭氧環(huán)境容器中送檢，以免厭氧菌接觸空氣死亡本文檔共82頁；當(dāng)前第61頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

?送檢時(shí)間標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢，一般細(xì)菌培養(yǎng)送檢時(shí)間不應(yīng)超過2小時(shí)，苛養(yǎng)菌應(yīng)在30分鐘內(nèi)送檢，否則，細(xì)菌死亡，導(dǎo)致培養(yǎng)結(jié)果陰性。對(duì)于客觀條件限制，不能立即送檢的標(biāo)本，應(yīng)用轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基保存標(biāo)本送檢。血培養(yǎng)標(biāo)本應(yīng)放置室溫保存。本文檔共82頁；當(dāng)前第62頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分?

標(biāo)本采集的量要符合標(biāo)準(zhǔn)太少：捕捉細(xì)菌的幾率少；太多：與培養(yǎng)基比例不適當(dāng)，營(yíng)養(yǎng)供給不足?不合格標(biāo)本的處理標(biāo)本標(biāo)識(shí)與申請(qǐng)單不一致；采集的標(biāo)本與申請(qǐng)單不一致；非無菌容器留取的標(biāo)本或采用不合格的容器；

本文檔共82頁；當(dāng)前第63頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

容器中無標(biāo)本；將有菌容器的標(biāo)本重新倒入無菌容器；盛標(biāo)本的容器未加蓋；取材后將標(biāo)本放置時(shí)間過長(zhǎng)；本文檔共82頁；當(dāng)前第64頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

換藥后取材；從輸液管直接采集標(biāo)本；正在點(diǎn)滴抗菌藥物過程中采集血液標(biāo)本；用注射器直接送檢血液標(biāo)本；從尿液收集袋中直接抽取標(biāo)本；用拭子采集厭氧菌標(biāo)本；

本文檔共82頁；當(dāng)前第65頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

對(duì)于這些不合格的標(biāo)本實(shí)驗(yàn)室應(yīng)拒絕接受，在拒絕接受的同時(shí)，要及時(shí)通知臨床醫(yī)生或護(hù)士，說明標(biāo)本采集不合格的原因，并給予正確指導(dǎo)。本文檔共82頁；當(dāng)前第66頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

血平板：適合于各類細(xì)菌生長(zhǎng)巧克力平板：含V、X因子中國(guó)藍(lán)平板或伊紅美蘭平板：弱選擇性培養(yǎng)基麥康凱平板：中等強(qiáng)度選擇培養(yǎng)基SS瓊脂平板：強(qiáng)選擇培養(yǎng)基堿性瓊脂或TCBS瓊脂：弧菌

本文檔共82頁；當(dāng)前第67頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

血液增菌培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)肉湯厭氧平板

本文檔共82頁；當(dāng)前第68頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

?標(biāo)本接種平板培養(yǎng)基在使用前應(yīng)放孵育箱中烘干表面的水分，取材接種方式：不同的標(biāo)本有不同的要求培養(yǎng)環(huán)境：氣體（氧氣，CO2，）、厭氧、溫度、濕度培養(yǎng)時(shí)間本文檔共82頁；當(dāng)前第69頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分?病原菌的選擇及純化根據(jù)標(biāo)本來源不同，選擇有臨床意義的病原菌，特別注意有正常菌群部位標(biāo)本中病原菌的選擇（如痰、咽、糞便標(biāo)本）。將挑選出的細(xì)菌分純、涂片后進(jìn)行菌種鑒定。本文檔共82頁；當(dāng)前第70頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

結(jié)果回報(bào)

?審核：包括患者信息和檢驗(yàn)結(jié)果及報(bào)告內(nèi)容。核對(duì)患者的信息資料：如姓名、性別、年齡、標(biāo)本種類、檢驗(yàn)項(xiàng)目等。

病人結(jié)果的確認(rèn)：審核菌種和所測(cè)試的藥敏結(jié)果，包括以下內(nèi)容：藥敏結(jié)果與菌株鑒定是否一致

本文檔共82頁；當(dāng)前第71頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

單個(gè)藥敏結(jié)果與特定藥物種類中活性規(guī)則層次是一致的（如三代頭孢菌素對(duì)腸桿菌科細(xì)菌抗菌活性高于一、二代頭孢菌素）。分離株未被證明耐藥及“僅有敏感”解釋標(biāo)準(zhǔn)的藥物是敏感的，如化膿性鏈球菌和無乳鏈球菌對(duì)萬古霉素是敏感的；頭孢噻肟和頭孢曲松對(duì)流感嗜血桿菌是敏感的。

本文檔共82頁；當(dāng)前第72頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分

出現(xiàn)非常見或者不一致結(jié)果，應(yīng)分析錯(cuò)誤原因：謄寫錯(cuò)誤試劑污染查找非常見或不一致結(jié)果原因，必要時(shí)重新進(jìn)行菌種鑒定和藥敏試驗(yàn)，可以考慮換一種試驗(yàn)方法。比如；氨芐青霉素耐藥的肺炎克雷伯菌；青霉素耐藥的化膿性鏈球菌等。本文檔共82頁；當(dāng)前第73頁；編輯于星期二\9點(diǎn)13分?評(píng)論或修正對(duì)于某些細(xì)菌或具有某些耐藥表型細(xì)菌的藥敏結(jié)果，其體外藥敏試驗(yàn)可能與臨床療效