普魯卡因半數(shù)致死量的測定

普魯卡因半數(shù)致死量的測定本文檔共25頁；當(dāng)前第1頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分毒性試驗(yàn)特殊毒性試驗(yàn)（致畸、致癌、致突變）長期（慢性）毒性試驗(yàn)急性毒性試驗(yàn)：1～7d本文檔共25頁；當(dāng)前第2頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分半數(shù)致死量（lethaldose50%,LD50）：是指能夠引起試驗(yàn)動物一半死亡的藥物劑量，通常用藥物致死劑量的對數(shù)值表示。測定LD50意義(1)是衡量藥物毒性大小的指標(biāo)，評價藥物優(yōu)劣的重要參數(shù)

(2)評價藥物安全性---治療指數(shù)TI=LD50/ED50(3)申報(bào)新藥過程中必須提供的藥理學(xué)資料本文檔共25頁；當(dāng)前第3頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分根據(jù)物質(zhì)的半致死劑量LD50值，美國科學(xué)院把毒性物質(zhì)危險劃分為五個等級①“0”：無毒性，LD50>15g/kg；②“1”：實(shí)際無毒性，5g/kg<LD50<15g/kg；③“2”：輕度毒性，0.5g/kg<LD50<5g/kg；④“3”：中度毒性，50mg/kg<LD50<500mg/kg；⑤“4”：高度毒性，LD50<50mg/kg本文檔共25頁；當(dāng)前第4頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分普魯卡因產(chǎn)生毒性作用的原理:普魯卡因是一種局部麻醉藥，當(dāng)被大量吸收后會產(chǎn)生全身性毒性反應(yīng)，主要表現(xiàn)為中樞神經(jīng)系統(tǒng)先興奮后抑制，初期表現(xiàn)為眩暈、煩躁不安、肌肉震顫，進(jìn)而發(fā)展為神經(jīng)錯亂、驚厥、昏迷、呼吸抑制等?；颊呖梢蚝粑ソ叨劳?。本文檔共25頁；當(dāng)前第5頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分LD50的測定方法有很多。如：目測機(jī)率單位法、加權(quán)機(jī)率單位法(Bliss法)、寇氏法、序貫法等。Bliss法是目前推薦使用的方法。此法對劑量分組無嚴(yán)格要求，不需要劑量組有0%和100%死亡率，是目前公認(rèn)最準(zhǔn)確的測定方法。但本法計(jì)算繁瑣，故現(xiàn)多采用計(jì)算機(jī)程序計(jì)算。改良寇試法簡便而計(jì)算較為精確。本文檔共25頁；當(dāng)前第6頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?.掌握藥物的半數(shù)致死量測定的意義、方法、計(jì)算過程。2.了解藥物給藥后動物所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)及其嚴(yán)重程度。實(shí)驗(yàn)部分本文檔共25頁；當(dāng)前第7頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分實(shí)驗(yàn)動物：小白鼠50只，體重18～２２g，♀♂各半。

實(shí)驗(yàn)器材：計(jì)算機(jī)、電子秤、注射器、小鼠籠。實(shí)驗(yàn)藥品：1%普魯卡因，苦味酸溶液（標(biāo)記）

【實(shí)驗(yàn)材料】本文檔共25頁；當(dāng)前第8頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分1.體重相近（20±2g）。2.健康，雌雄各半。3.懷孕雌鼠剔除不用。實(shí)驗(yàn)小鼠選擇本文檔共25頁；當(dāng)前第9頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分隨機(jī)原則：是指在抽樣時排除主觀上有意識地抽取調(diào)查單位，每個受試單位以概率均等的原則，隨機(jī)地分配到實(shí)驗(yàn)組與對照組。隨機(jī)原則本文檔共25頁；當(dāng)前第10頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分【隨機(jī)】本文檔共25頁；當(dāng)前第11頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分1.將小鼠雌雄分開，分別稱重，一重量段放入一籠。（）2.標(biāo)記小鼠：同一籠小鼠標(biāo)記同一符號。3.雌雄按重量順序隨機(jī)分為5組，保證不同性別體重小鼠均勻分配于各組。小鼠隨機(jī)分組處理本文檔共25頁；當(dāng)前第12頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分分組方式：組號1*2*3*4*5*鼠號1234551234451233451223451……

本文檔共25頁；當(dāng)前第13頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分1.按劑間比1：0.85，腹腔注射1%普魯卡因，5組劑量分別為130mg/kg,153mg/kg,180mg/kg,212mg/kg和249mg/kg。2.觀察30min統(tǒng)計(jì)小鼠死亡數(shù)。3.用改良寇試法和bliss法計(jì)算普魯卡因的LD50和95%可信限?！緦?shí)驗(yàn)步驟】本文檔共25頁；當(dāng)前第14頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分抓好后將小鼠保持頭低位本文檔共25頁；當(dāng)前第15頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分改良寇試法Bliss法計(jì)算LD50及其95%可信限

本文檔共25頁；當(dāng)前第16頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分基本要求1.反映情況符合或接近對數(shù)正態(tài)分析。2.相鄰兩計(jì)量比值相等。3.各組動物數(shù)相等或相近。4.不要求死亡率包括0%和100%，但二者和最好再80%~120%范圍內(nèi)。改良寇試法本文檔共25頁；當(dāng)前第17頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分計(jì)算LD501.最小劑量組死亡率0%，最大劑量組死亡率100%：LD50=lg-1（Xm-i（Σp-0.5））p——各組動物死亡率Xm——最大劑量的對數(shù)i------相鄰兩組對數(shù)劑量差值改良寇試法本文檔共25頁；當(dāng)前第18頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分2.

0%<最小劑量組死亡率<30%，或70%<最大劑量組死亡率<100%時：LD50=lg-1[Xm-i(Σp-(3-Pm-Pn)/4)]Pm------劑量最大組死亡率Pn-------劑量最小組死亡率改良寇試法本文檔共25頁；當(dāng)前第19頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分3.標(biāo)準(zhǔn)物SlgLD50=i√[(Σp-Σp2)/(n-1)]4.LD50的95%可信區(qū)間Lg-1(lgLD50±1.96SlgLD50)改良寇試法本文檔共25頁；當(dāng)前第20頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分傳統(tǒng)計(jì)算方法Bliss法本文檔共25頁；當(dāng)前第21頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分本文檔共25頁；當(dāng)前第22頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分采用Bliss法程序計(jì)算LD50及其95%可信限步驟：啟動微機(jī)，運(yùn)行相應(yīng)程序，進(jìn)入其數(shù)據(jù)處理選項(xiàng)，再進(jìn)入半數(shù)有效量選項(xiàng)。一次輸入各組劑量、動物總數(shù)、動物死亡數(shù)等相關(guān)數(shù)據(jù)。單擊“計(jì)算”按鈕，計(jì)算LD50等參數(shù)。相關(guān)軟件spass，sas，還有專門LD50數(shù)據(jù)處理程序。Bliss法本文檔共25頁；當(dāng)前第23頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分給藥從中劑量組開始。動物的饑飽，實(shí)驗(yàn)室溫度、實(shí)驗(yàn)時間應(yīng)盡量保持一致。精密測量LD50應(yīng)先摸索出合適劑量范圍?！咀⒁馐马?xiàng)】本文檔共25頁；當(dāng)前第24頁；編輯于星期二\2點(diǎn)21分

1.徐叔云，卞如濂，陳修：藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)