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文檔簡介
(優(yōu)選)章核苷酸和核酸本文檔共28頁;當(dāng)前第1頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分2.脫氧核苷酸的水解——脫嘌呤本文檔共28頁;當(dāng)前第2頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分3.紫外線和一些化學(xué)因子、烷化劑對DNA的損傷本文檔共28頁;當(dāng)前第3頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分亞硝酸本文檔共28頁;當(dāng)前第4頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分烷化劑:乙基甲烷磺酸(EMS)本文檔共28頁;當(dāng)前第5頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分紫外線誘導(dǎo)胸腺嘧啶二聚體本文檔共28頁;當(dāng)前第6頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分4.與嵌合劑的反應(yīng)本文檔共28頁;當(dāng)前第7頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分本文檔共28頁;當(dāng)前第8頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分溴乙啶丫啶橙
放線菌素D
本文檔共28頁;當(dāng)前第9頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分二、DNA的酶法甲基化(methylation)甲基供體:S—腺苷甲硫氨酸甲基受體:被修飾堿基(A、C多于G、T)堿基的甲基化修飾不是隨機(jī)的,而是限于一定的順序或DNA的某一區(qū)域,在甲基化酶的作用下進(jìn)行,甲基化是可逆的。甲基化的意義:幫助細(xì)胞識別和區(qū)分自身DNA和外來DNA;調(diào)節(jié)基因表達(dá);幫助DNA修復(fù)等。本文檔共28頁;當(dāng)前第10頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分第八節(jié)
核酸酶和DNA限制性內(nèi)切酶本文檔共28頁;當(dāng)前第11頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分一、核酸酶(nuclease)能水解核酸的酶為核酸酶核酸酶都是磷酸二酯酶(phosphodiesterases)本文檔共28頁;當(dāng)前第12頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分核酸酶的分類按底物專一性分類:核糖核酸酶(RNase)和脫氧核糖核酸酶(DNase)按作用方式分類:內(nèi)切核酸酶和外切核酸酶內(nèi)切核酸酶:從核酸的內(nèi)部切割核酸鏈,產(chǎn)生核酸鏈片段。外切核酸酶:從核酸鏈的一端逐個(gè)切斷磷酸二酯鍵,釋放單核苷酸。按磷酸二酯鍵斷裂方式:3’-核酸酶和5’-核酸酶本文檔共28頁;當(dāng)前第13頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分本文檔共28頁;當(dāng)前第14頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分核酸酶對其底物的作用具有特異性本文檔共28頁;當(dāng)前第15頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分本文檔共28頁;當(dāng)前第16頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分二、限制性內(nèi)切酶(restrictionendonuclease)
限制性內(nèi)切酶是從細(xì)菌中分離的一類專門識別和水解特定核苷酸序列的內(nèi)切酶類。這類酶在原核生物體內(nèi),用于“防御”外來DNA的入侵,將外來DNA以獨(dú)特的方式切成無感染能力的片段,而自身不受損害(甲基化作用)。本文檔共28頁;當(dāng)前第17頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分1.限制性內(nèi)切酶的分類Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ
基因工程技術(shù)中常用Ⅱ型本文檔共28頁;當(dāng)前第18頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分不需要ATP參加;不對DNA進(jìn)行甲基化或其它方式修飾。專門識別和切割特定的核苷酸序列,這個(gè)序列一般含4—6個(gè)核苷酸殘基,并具回文結(jié)構(gòu)“落鶴島上島落鶴,垂柳岸邊岸柳垂”。
2.II型限制性內(nèi)切酶
本文檔共28頁;當(dāng)前第19頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分Ⅱ類酶識別序列特點(diǎn)
回文結(jié)構(gòu)palindrome本文檔共28頁;當(dāng)前第20頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分切口(kerf):粘端,平端本文檔共28頁;當(dāng)前第21頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分本文檔共28頁;當(dāng)前第22頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分本文檔共28頁;當(dāng)前第23頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分3.限制性內(nèi)切酶的種類(約1000多種)
本文檔共28頁;當(dāng)前第24頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分Hin
dⅢ
屬
系
株序Haemophilusinfluenzaed株流感嗜血桿菌d株的第三種酶命名naming第一個(gè)字母取自產(chǎn)生該酶的細(xì)菌屬(genus)名,用大寫;第二、第三個(gè)字母是該細(xì)菌的種(species)名,用小寫;第四個(gè)字母代表株(strain);用羅馬數(shù)字表示發(fā)現(xiàn)的先后次序(sequence)。本文檔共28頁;當(dāng)前第25頁;編輯于星期一\18點(diǎn)20分4.限制性內(nèi)切
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