浙科版生物選修3基因工程

生物選修3

現(xiàn)代生物科技專題浙科版生物選修3基因工程目錄專題1基因工程專題2細(xì)胞工程專題3胚胎工程專題4生物技術(shù)的安全性和倫理問(wèn)題專題5生態(tài)工程浙科版生物選修3基因工程專題1基因工程浙科版生物選修3基因工程基礎(chǔ)理論和技術(shù)的發(fā)展催生了基因工程20世紀(jì)中葉，基礎(chǔ)理論取得了重大突破1.DNA是遺傳物質(zhì)的證明2.DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)和中心法則的確立3.遺傳密碼的破譯浙科版生物選修3基因工程技術(shù)發(fā)明使基因工程的實(shí)施成為可能1.基因轉(zhuǎn)移載體的發(fā)現(xiàn)2.工具酶的發(fā)現(xiàn)3.DNA合成和測(cè)序技術(shù)的發(fā)明4.DNA體外重組的實(shí)現(xiàn)5.重組DNA表達(dá)實(shí)驗(yàn)的成功6.第一例轉(zhuǎn)基因動(dòng)物問(wèn)世7.PCR技術(shù)的發(fā)明浙科版生物選修3基因工程

基因工程又叫基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)。該技術(shù)是在生物體外，通過(guò)對(duì)DNA分子進(jìn)行人工“剪切”和“拼接”，對(duì)生物的基因進(jìn)行改造和重新組合，然后導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行無(wú)性繁殖，使重組基因在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，產(chǎn)生出人類所需要的生物類型和生物產(chǎn)品。一、基因工程的概念基因工程的別名操作環(huán)境操作對(duì)象操作水平基本過(guò)程實(shí)質(zhì)結(jié)果基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)生物體外基因DNA分子水平定向地改造生物的性狀，獲得人類所需要的品種。剪切→拼接→導(dǎo)入→表達(dá)基因重組浙科版生物選修3基因工程基本工具：限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”DNA連接酶——“分子縫合針”基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車”二、DNA重組技術(shù)的基本工具浙科版生物選修3基因工程黏性末端黏性末端黏性末端：被限制酶切開(kāi)的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個(gè)伸出的核苷酸，他們之間正好互補(bǔ)配對(duì)，這樣的切口叫黏性末端。1、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”浙科版生物選修3基因工程當(dāng)限制酶從識(shí)別序列的中心軸線處切開(kāi)時(shí)，產(chǎn)生的是平末端。當(dāng)限制酶從識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)切開(kāi)時(shí)，產(chǎn)生的是黏性末端。浙科版生物選修3基因工程浙科版生物選修3基因工程識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)。主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的一種酶。4000種。

（1）來(lái)源：（2）種類：

（3）作用：（4）結(jié)果：形成兩種末端黏性末端平末端1、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”（小結(jié)）浙科版生物選修3基因工程要想獲得某個(gè)目的基因必須要用限制酶切幾個(gè)切口？可產(chǎn)生幾個(gè)黏性末端？一個(gè)目的基因有幾個(gè)黏性末端？要切兩個(gè)切口，產(chǎn)生四個(gè)黏性末端，兩個(gè)。如果把兩種來(lái)源不同的DNA用同一種限制酶來(lái)切割，會(huì)怎樣呢？

會(huì)產(chǎn)生相同的黏性末端。

是不是把兩者的黏性末端黏合起來(lái)，這樣就真的合成重組的DNA分子了?實(shí)際還不夠,還需要DNA連接酶進(jìn)行連接。思考題：浙科版生物選修3基因工程1、種類：2、作用部位：E·coliDNA連接酶（黏性末端）T4DNA連接酶（黏性末端和平末端）磷酸二酯鍵DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來(lái)，即把梯子兩邊扶手的斷口連接起來(lái)，這樣一個(gè)重組的DNA分子就形成了。2、DNA連接酶——“分子縫合針”浙科版生物選修3基因工程3、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的運(yùn)載體——“分子運(yùn)輸車”（1）運(yùn)載體的作用作為運(yùn)載工具，將外源基因(抗蟲(chóng)基因)轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞(棉花細(xì)胞)中去。利用運(yùn)載體在受體細(xì)胞(棉花細(xì)胞)內(nèi)，對(duì)外源基因(抗蟲(chóng)基因)進(jìn)行大量復(fù)制。（隨載體的復(fù)制而復(fù)制）（2）作為運(yùn)載體必須具備的條件能夠在宿主細(xì)胞中自我復(fù)制并穩(wěn)定地保存。具有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接。具有某些標(biāo)記基因，便于進(jìn)行篩選。必需是安全的，不會(huì)對(duì)受體細(xì)胞有害。大小應(yīng)適合，便于提取和操作浙科版生物選修3基因工程（3）常用的運(yùn)載體

3、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的運(yùn)載體——“分子運(yùn)輸車”細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)的質(zhì)粒λ噬菌體的衍生物動(dòng)植物病毒注意：真正用作運(yùn)載體的質(zhì)粒都是人工改造過(guò)的。浙科版生物選修3基因工程質(zhì)粒：

質(zhì)粒是染色體外能夠進(jìn)行自主復(fù)制的遺傳單位，包括真核生物的細(xì)胞器和細(xì)菌細(xì)胞中核區(qū)外的DNA分子?，F(xiàn)在習(xí)慣上用來(lái)專指細(xì)菌、酵母菌和放線菌等生物中核以外的DNA分子。

質(zhì)粒是基因工程最常用的運(yùn)載體。絕大多數(shù)細(xì)菌質(zhì)粒都是閉合環(huán)狀DNA分子。有的一個(gè)細(xì)菌中有一個(gè)，有的一個(gè)細(xì)菌中有多個(gè)。浙科版生物選修3基因工程3、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的運(yùn)載體——“分子運(yùn)輸車”

最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒，其中常含有抗藥基因，如四環(huán)素的標(biāo)記基因。質(zhì)粒的存在與否對(duì)宿主細(xì)胞生存沒(méi)有決定性作用，但復(fù)制只能在宿主細(xì)胞內(nèi)成。

質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于細(xì)菌染色體（即擬核DNA）之外，并且具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。質(zhì)粒是基因工程最常用的運(yùn)載體。浙科版生物選修3基因工程（補(bǔ)充知識(shí)）基因的結(jié)構(gòu)1、原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)啟動(dòng)子終止子①RNA聚合酶能夠識(shí)別調(diào)控序列中的結(jié)合位點(diǎn)，并與其結(jié)合。②轉(zhuǎn)錄開(kāi)始后，RNA聚合酶沿DNA分子移動(dòng)，并以DNA分子的一條鏈為模板合成RNA。③轉(zhuǎn)錄完畢后，RNA鏈釋放出來(lái)，緊接著RNA聚合酶也從DNA模板鏈上脫落下來(lái)。原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)能轉(zhuǎn)錄相應(yīng)的信使RNA，能編碼蛋白質(zhì)編碼區(qū)非編碼區(qū)①不能轉(zhuǎn)錄為信使RNA，不能編碼蛋白質(zhì)。②有調(diào)控遺傳信息表達(dá)的核苷酸序列，在該序列中，最重要的是位于編碼區(qū)上游的RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)。啟動(dòng)子浙科版生物選修3基因工程2、真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)內(nèi)含子外顯子啟動(dòng)子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游能夠編碼蛋白質(zhì)的序列叫做外顯子不能夠編碼蛋白質(zhì)的序列叫做內(nèi)含子內(nèi)含子：外顯子：真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)非編碼區(qū)外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的序列內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì)的序列有調(diào)控作用的核苷酸序列，包括位于編碼區(qū)上游的RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)。非編碼序列：包括非編碼區(qū)和內(nèi)含子浙科版生物選修3基因工程

啟動(dòng)子與起始密碼

啟動(dòng)子起始密碼

位置DNA上基因的非編碼區(qū)，在編碼區(qū)上游段（左側(cè)）位于mRNA上的開(kāi)始位置的密碼（轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物）

功能轉(zhuǎn)錄時(shí)與RNA聚合酶結(jié)合，對(duì)轉(zhuǎn)錄mRNA起調(diào)控作用。是翻譯的開(kāi)始，是肽鏈延伸的第一個(gè)氨基酸的位點(diǎn)。浙科版生物選修3基因工程原核細(xì)胞真核細(xì)胞不同點(diǎn)編碼區(qū)是_____的編碼區(qū)是間隔的、_____的相同點(diǎn)都由能夠編碼蛋白質(zhì)的______和具有調(diào)控作用的______區(qū)組成的原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)比較思考編碼相同數(shù)目氨基酸的蛋白質(zhì)，原核細(xì)胞與真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)一樣長(zhǎng)嗎？連續(xù)不連續(xù)編碼區(qū)非編碼浙科版生物選修3基因工程浙科版生物選修3基因工程二、基因工程基本操作的四個(gè)步驟目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測(cè)與鑒定浙科版生物選修3基因工程（一）目的基因的獲取1、目的基因主要是指______________________人們所需要的特定基因2、獲取目的基因的常用方法（1）從基因文庫(kù)中獲?。?）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增（3）人工合成未知序列已知序列浙科版生物選修3基因工程（1）從基因文庫(kù)中獲取目的基因：基因文庫(kù):

將含有某種生物不同基因的許多DNA片段,導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存,各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因,稱為基因文庫(kù)(genelibrary)基因組文庫(kù):

基因文庫(kù)中包含了一種生物所有的基因,這種基因文庫(kù)叫做基因組文庫(kù).部分基因文庫(kù):

基因文庫(kù)中包含了一種生物的一部分基因,這種基因文庫(kù)叫做部分基因文庫(kù).浙科版生物選修3基因工程浙科版生物選修3基因工程基因組文庫(kù)和部分基因文庫(kù)(cDNA文庫(kù))比較浙科版生物選修3基因工程①概念：PCR全稱為_(kāi)______________，是在生物____復(fù)制___________的核酸合成技術(shù)③條件：_______________________、

_______________、___________、

__________等前提條件：。②原理：__________④方式：以_____方式擴(kuò)增，即____（n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)）⑤結(jié)果：多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外特定DNA片段DNA復(fù)制已知基因的核苷酸序列四種脫氧核苷酸一對(duì)引物熱穩(wěn)定DNA聚合酶指數(shù)2n使目的基因的片段在短時(shí)間內(nèi)成百萬(wàn)倍地?cái)U(kuò)增(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因雙鏈的解開(kāi)浙科版生物選修3基因工程⑥過(guò)程：a、DNA變性（90℃-95℃）：雙鏈DNA模板在熱作用下，_____斷裂，形成___________b、退火（復(fù)性55℃-60℃）：系統(tǒng)溫度降低，引物與DNA模板結(jié)合，形成局部________。c、延伸（70℃-75℃）：在Taq酶的作用下，從引物的5′端→3′端延伸，合成與模板互補(bǔ)的________。氫鍵單鏈DNA雙鏈DNA鏈浙科版生物選修3基因工程（3）人工合成反轉(zhuǎn)錄法：

以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使RNA為模板，反轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)的單鏈DNA，然后在酶的作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需的基因。目的基因的mRNA雜交雙鏈(單鏈RNA/單鏈DNA)單鏈DNA反轉(zhuǎn)錄酶DNA聚合酶雙鏈DNA(目的基因)浙科版生物選修3基因工程（3）人工合成根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：

根據(jù)已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)出相應(yīng)的信使RNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，再通過(guò)化學(xué)方法，以單核苷酸為原料合成目的基因。蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列推測(cè)推測(cè)目的基因化學(xué)合成浙科版生物選修3基因工程1.用一定的_________切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出____________。2.用_____________切斷目的基因，使其產(chǎn)生_________________。二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建——核心3.將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的______處，再加入適量___________，形成了一個(gè)重組

DNA分子（重組質(zhì)粒）限制酶黏性末端同一種限制酶的黏性末端切口DNA連接酶相同4.一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了目的基因外，還必須有——————、—————、以及————————等。啟動(dòng)子終止子標(biāo)記基因浙科版生物選修3基因工程質(zhì)粒DNA分子一個(gè)切口兩個(gè)黏性末端兩個(gè)切口獲得目的基因DNA連接酶重組DNA分子（重組質(zhì)粒）限制酶處理同一種4.過(guò)程:（二）基因表達(dá)載體的構(gòu)建——核心浙科版生物選修3基因工程5.基因表達(dá)載體的組成：復(fù)制原點(diǎn)+目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因（二）基因表達(dá)載體的構(gòu)建——核心啟動(dòng)子：位于基因的首端的一段特殊的DNA片斷，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得蛋白質(zhì)終止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片斷，能終止mRNA的轉(zhuǎn)錄標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)浙科版生物選修3基因工程(三)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞轉(zhuǎn)化——方法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法——顯微注射法——感受態(tài)細(xì)胞目的基因進(jìn)入_________內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持_____和_____的過(guò)程受體細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)浙科版生物選修3基因工程(三)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞1、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法農(nóng)桿菌介紹:Ti質(zhì)粒上有T-DNA,稱為可轉(zhuǎn)移的DNA,它可轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞,并整合到受體細(xì)胞染色體DNA上.浙科版生物選修3基因工程浙科版生物選修3基因工程2、將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞(受精卵)顯微注射法----世界上第一例“超級(jí)小鼠”的成功設(shè)備:顯微注射儀3、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞(三)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞原核生物的特點(diǎn)：繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少等過(guò)程：①用Ca2+處理細(xì)胞,以增大細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài),這種細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞.②是將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過(guò)程.③目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)，隨其繁殖而復(fù)制，由于細(xì)菌繁殖的速度非常快，在很短的時(shí)間內(nèi)就能獲得大量的目的基因。浙科版生物選修3基因工程四環(huán)素抗性基因氨芐青霉素抗性基因(四)目的基因的檢測(cè)與鑒定——檢查是否成功浙科版生物選修3基因工程通過(guò)目的基因上的標(biāo)記基因，進(jìn)行篩選和檢測(cè)導(dǎo)入過(guò)程完成后，全部受體細(xì)胞都能攝入重組DNA分子嗎？真正能攝入重組DNA分子的受體細(xì)胞很少。所以要對(duì)受體細(xì)胞作怎樣的處理？對(duì)受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入了目的基因進(jìn)行檢測(cè)怎樣進(jìn)行檢測(cè)？浙科版生物選修3基因工程DNA分子雜交示意圖

采用一定的技術(shù)手段，將兩種生物的DNA分子的單鏈放在一起，如果這兩個(gè)單鏈具有互補(bǔ)的堿基序列，那么，互補(bǔ)的堿基序列就會(huì)結(jié)合在一起，形成雜合雙鏈區(qū)；在沒(méi)有互補(bǔ)堿基序列的部位，仍然是兩條游離的單鏈。浙科版生物選修3基因工程(四)目的基因的檢測(cè)與鑒定——檢查是否成功檢測(cè)—鑒定——①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等過(guò)程:A.首先取出轉(zhuǎn)基因生物的基因組DNAB.用含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作標(biāo)記,以此做探針C.使探針和轉(zhuǎn)基因生物的基因組雜交,若顯示出雜交帶,表明染色體已插入染色體DNA中方法:DNA分子雜交方法:分子雜交方法:抗原抗體雜交過(guò)程:用上述探針和轉(zhuǎn)基因生物的mRNA雜交,若出現(xiàn)雜交帶,表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了mRNA.浙科版生物選修3基因工程

為保證目的基因得到有效利用，通常用大量的受體細(xì)胞來(lái)接受不多的目的基因。這樣，處理的受體細(xì)胞中真正攝入了目的基因的很少，必須將它從中檢測(cè)出來(lái)。無(wú)表達(dá)產(chǎn)物無(wú)表達(dá)產(chǎn)物有表達(dá)產(chǎn)物無(wú)表達(dá)產(chǎn)物細(xì)菌的檢測(cè)，將每個(gè)受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)形成菌落，檢測(cè)菌落中是否有目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。淘汰無(wú)表達(dá)產(chǎn)物的菌落，保留有表達(dá)產(chǎn)物的進(jìn)一步培養(yǎng)、研究。浙科版生物選修3基因工程多細(xì)胞生物的檢測(cè)，將每個(gè)受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)并誘導(dǎo)發(fā)育成完整個(gè)體，檢測(cè)這些個(gè)體是否攝入目的基因，攝入的基因是否表達(dá)（是否表現(xiàn)出相應(yīng)的性狀）。淘汰無(wú)變化的個(gè)體，保留有相應(yīng)變化的個(gè)體進(jìn)一步培養(yǎng)、研究。例：用棉鈴飼喂棉鈴蟲(chóng)，如蟲(chóng)吃后不出現(xiàn)中毒癥狀，說(shuō)明未攝入目的基因或攝入目的基因未表達(dá)。如蟲(chóng)吃后中毒死亡，則說(shuō)明攝入了抗蟲(chóng)基因并得到表達(dá)。浙科版生物選修3基因工程蘇云金桿菌毒蛋白普通棉花抗蟲(chóng)棉浙科版生物選修3基因工程基因工程的基本操作程序目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測(cè)與鑒定1、從基因文庫(kù)中獲取目的基因2、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因3、化學(xué)方法人工合成復(fù)制原點(diǎn)+目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法、顯微注射法、Ca2+處理法DNA分子雜交技術(shù)、分子雜交技術(shù)、抗原—抗體雜交技術(shù)分子檢測(cè)外的個(gè)體水平鑒定浙科版生物選修3基因工程三、基因工程的應(yīng)用1、抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因植物方法：從某些生物中分離出具有殺蟲(chóng)活性的基因，將其導(dǎo)入農(nóng)作物中，使其具有抗蟲(chóng)性Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制劑基因、淀粉酶抑制劑基因、植物凝集素基因等（一）植物基因工程碩果累累2、抗病轉(zhuǎn)基因生物目的基因包括：病毒外殼蛋白基因、病毒的復(fù)制酶基因、抗真菌轉(zhuǎn)基因植物中的有幾丁質(zhì)酶基因和抗毒素合成基因浙科版生物選修3基因工程3、抗逆轉(zhuǎn)基因作物4、利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)

方法：將必需氨基酸含量多的蛋白質(zhì)編碼基因，導(dǎo)入植物中，或者改變這些氨基酸合成途徑中某種酶的活性。1、用于提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度

2、用于改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)目的基因：生長(zhǎng)激素基因（二）動(dòng)物基因工程前景廣闊舉例:將腸乳糖酶基因?qū)肽膛；蚪M，獲得轉(zhuǎn)基因牛，其他營(yíng)養(yǎng)不變的情況下，乳糖含量大大降低。浙科版生物選修3基因工程3、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物---動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器獲取目的基因（例如血清蛋白基因）構(gòu)建基因表達(dá)載體（在血清白蛋白基因前加特異表達(dá)的啟動(dòng)子）顯微注射導(dǎo)入哺乳動(dòng)物受精卵中形成胚胎將胚胎送入母體動(dòng)物發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物（只有在產(chǎn)下的雌性動(dòng)物個(gè)體中，轉(zhuǎn)入的基因才能表達(dá)）浙科版生物選修3基因工程4、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植的供體供體動(dòng)物：存在的難題：解決方法：豬免疫排斥將供體基因組導(dǎo)入某種基因調(diào)節(jié)因子，以抑制抗原決定基因的表達(dá)，或設(shè)法除去抗原決定基因，再結(jié)合克隆技術(shù)，培育出沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官。浙科版生物選修3基因工程（三）、基因工程藥品異軍突起

工程菌：用基因工程的方法，使外源基因得到高效率表達(dá)的菌類細(xì)胞株系。

我國(guó)已生產(chǎn)的產(chǎn)品：白細(xì)胞介素-2、干擾素、乙肝疫苗等浙科版生物選修3基因工程（四）基因診斷和基因治療基因診斷定義：基因診斷是用放射性同位素(如32P)、熒光分子等標(biāo)記的DNA分子做探針，利用DNA分子雜交原理，鑒定被檢測(cè)標(biāo)本上的遺傳信息，達(dá)到檢測(cè)疾病的目的。

生物芯片從正常人的基因組中分離出DNA與DNA芯片雜交就可以得出標(biāo)準(zhǔn)圖譜。從病人的基因組中分離出DNA與DNA芯片雜交就可以得出病變圖譜。通過(guò)比較、分析這兩種圖譜，就可以得出病變的DNA信息?；蛐酒\斷技術(shù)以其快速、高效、敏感、經(jīng)濟(jì)、平行化、自動(dòng)化等特點(diǎn)，將成為一項(xiàng)現(xiàn)代化診斷新技術(shù)。浙科版生物選修3基因工程浙科版生物選修3基因工程浙科版生物選修3基因工程1、體外基因治療：2、體內(nèi)基因治療：從病人體內(nèi)獲得某種細(xì)胞，進(jìn)行培養(yǎng)，然后，在體外完成基因轉(zhuǎn)移，再篩選成功轉(zhuǎn)移的細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)，最后重新輸入患者體內(nèi)。直接向人體組織細(xì)胞中轉(zhuǎn)移基因的治病方法。用于基因治療的基因種類A.從健康人體上分離得到的功能正常的基因，用以取代病變基因，或依靠其表達(dá)產(chǎn)物。B.反義基因。即通過(guò)產(chǎn)生的mRNA分子，與病變基因產(chǎn)生的mRNA進(jìn)行互補(bǔ)，來(lái)阻斷蛋白質(zhì)合成。C.編碼可以殺死癌變細(xì)胞的蛋白酶基因，又叫做自殺基因。（四）基因診斷和基因治療基因治療浙科版生物選修3基因工程1、環(huán)境監(jiān)測(cè)

基因工程做成的DNA探針能夠十分靈敏地檢測(cè)環(huán)境中的病毒、細(xì)菌等污染。利用基因工程培育的“指示生物”能十分靈敏地反映環(huán)境污染的情況，卻不易因環(huán)境污染而大量死亡，甚至還可以吸收和轉(zhuǎn)化污染物。2、環(huán)境污染治理

基因工程做成的“超級(jí)細(xì)菌”能吞食和分解多種污染環(huán)境的物質(zhì)。（五）基因工程與環(huán)境保護(hù)浙科版生物選修3基因工程糾錯(cuò)筆記五種酶的比較

項(xiàng)目種類作用底物作用部位作用結(jié)果限制酶DNA分子磷酸二酯鍵形成粘性末端或平末端DNA連接酶DNA分子片段磷酸二酯鍵形成重組DNA分子浙科版生物選修3基因工程

項(xiàng)目種類作用底物作用部位作用結(jié)果DNA聚合酶脫氧核苷酸磷酸二酯鍵形成新的DNA分子DNA(水解)酶DNA分子磷酸二酯鍵形成脫氧核苷酸DNA解旋酶DNA分子堿基對(duì)間的氫鍵形成單鏈DNA分子浙科版生物選修3基因工程蛋白質(zhì)工程的崛起浙科版生物選修3基因工程四、蛋白質(zhì)工程(一)蛋白質(zhì)工程崛起的緣由１、基因工程（１）基因工程的實(shí)質(zhì)：將一種生物的基因轉(zhuǎn)移到另一種生物體內(nèi)，使后者產(chǎn)生本身不能產(chǎn)生的蛋白質(zhì)，從而表現(xiàn)出新的性狀。（２）基因工程的不足：在原則上只能產(chǎn)生自然界已存在的蛋白質(zhì)。２、天然蛋白質(zhì)的不足天然蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能符合特定物種生存的需要，卻不一定完全符合人類生產(chǎn)和生活的需要。浙科版生物選修3基因工程

在已研究過(guò)的幾千種酶中，只有極少數(shù)可以應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)，絕大多數(shù)酶都不能應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)，這些酶雖然在自然狀態(tài)下有活性，但在工業(yè)生產(chǎn)中沒(méi)有活性或活性很低。這是因?yàn)楣I(yè)生產(chǎn)中每一步的反應(yīng)體系中常常會(huì)有酸、堿或有機(jī)溶劑存在，反應(yīng)溫度較高，在這種條件下，大多數(shù)酶會(huì)很快變性失活。提高蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性是工業(yè)生產(chǎn)中一個(gè)非常重要的課題。一般來(lái)說(shuō)，提高蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性包括：1、延長(zhǎng)酶的半衰期2、提高酶的熱穩(wěn)定性3、延長(zhǎng)藥用蛋白的保存期4、抵御由于重要氨基酸氧化引起的活性喪失等。浙科版生物選修3基因工程（二）蛋白質(zhì)工程的概念通過(guò)物理化學(xué)與生物化學(xué)等技術(shù)了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能，并借助計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)、基因定點(diǎn)誘變和重組ＤＮＡ技術(shù)改造基因，以定向改造天然蛋白質(zhì)，甚至創(chuàng)造自然界不存在的蛋白質(zhì)的技術(shù)。其中基因工程是關(guān)鍵技術(shù)，因此蛋白質(zhì)工程又被稱為第二代基因工程。①基礎(chǔ):以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)②手段:基因修飾或基因合成：借助計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)、基因定點(diǎn)誘變和重組ＤＮＡ技術(shù)③目的:對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類生產(chǎn)和生活的需要。浙科版生物選修3基因工程蛋白質(zhì)工程的主要步驟通常包括：（1）從生物體中分離純化目的蛋白；（2）測(cè)定其氨基酸序列；（3）借助核磁共振和X射線晶體衍射等手段，盡可能地了解蛋白質(zhì)的二維重組和三維晶體結(jié)構(gòu);（4）設(shè)計(jì)各種處理?xiàng)l件，了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)變化，包括折疊與去折疊等對(duì)其活性與功能的影響；（5）設(shè)計(jì)編碼該蛋白的基因改造方案，如點(diǎn)突變；（6）分離、純化新蛋白，功能檢測(cè)后投入實(shí)際使用。浙科版生物選修3基因工程一級(jí)結(jié)構(gòu)(二)蛋白質(zhì)工程的基本原理蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)，專指多肽鏈中氨基酸（殘基）的排列的序列（sequence）。浙科版生物選修3基因工程二級(jí)結(jié)構(gòu)(二)蛋白質(zhì)工程的基本原理三級(jí)結(jié)構(gòu)浙科版生物選修3基因工程四級(jí)結(jié)構(gòu)(二)蛋白質(zhì)工程的基本原理浙科版生物選修3基因工程１、蛋白質(zhì)工程的原理（1）了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)方法：自動(dòng)化測(cè)序快速測(cè)定大量蛋白質(zhì)分子的一級(jí)結(jié)構(gòu)用Ｘ射線晶體衍射法測(cè)定三維空間結(jié)構(gòu)，用核磁共振法了解其構(gòu)象。

（2）改造類型：大改、中改和小改。大改：根據(jù)氨基酸性質(zhì)和特點(diǎn)，設(shè)計(jì)并制造出自然界不存在的全新蛋白質(zhì)，使之具有特定的氨基酸序列、空間結(jié)構(gòu)和預(yù)期功能。中改：是指蛋白質(zhì)分子中替代某一個(gè)肽段或一個(gè)特定的結(jié)構(gòu)域。小改：通過(guò)基因工程中的定點(diǎn)誘變技術(shù)，有目的地改造蛋白質(zhì)的性質(zhì)和功能。（定點(diǎn)誘變技術(shù)是改變蛋白質(zhì)的核心技術(shù)之一。）(二)蛋白質(zhì)工程的基本原理浙科版生物選修3基因工程基因定點(diǎn)誘變技術(shù)的理解(蘇教版)項(xiàng)目?jī)?nèi)容條件原料酶引物能量

ＡＴＰ操作方法

ＰＣＲ法結(jié)果適應(yīng)范圍后代中半數(shù)為誘變的ＤＮＡ分子脫氧核苷酸ＤＮＡ聚合酶和ＤＮＡ連接酶含突變順序的ＤＮＡ分子片段空間結(jié)構(gòu)完全清楚的蛋白質(zhì)浙科版生物選修3基因工程思考：基因定點(diǎn)誘變技術(shù)與基因突變的比較比較基因定點(diǎn)誘變基因突變相同點(diǎn)發(fā)生的過(guò)程結(jié)果不同點(diǎn)場(chǎng)所手段方向DNA復(fù)制過(guò)程中產(chǎn)生新基因，從而產(chǎn)生新性狀生物體外生物體內(nèi)定向改造不定向性PCR技術(shù)物理化學(xué)方法浙科版生物選修3基因工程浙科版生物選修3基因工程２、蛋白質(zhì)工程原理（１）原理：由預(yù)期的

找到相應(yīng)

序列

蛋白質(zhì)功能脫氧核苷酸基因表達(dá)（轉(zhuǎn)錄和翻譯）形成氨基酸序列的多肽鏈形成具有高級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)行使生物功能天然蛋白質(zhì)的合成途徑：蛋白質(zhì)工程的途徑：預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列找到相應(yīng)的脫氧核苷酸序列酸浙科版生物選修3基因工程天然胰島素制劑在儲(chǔ)存中易形成二聚體和六聚體，延緩胰島素從注射部位進(jìn)入血液，從而延緩了其降血糖作用，也增加了抗原性，這是胰島素B23-B28氨基酸殘基結(jié)構(gòu)所致。利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)改變這些殘基，則可降低其聚合作用，使胰島素快速起作用。該速效胰島素已通過(guò)臨床實(shí)驗(yàn)。

浙科版生物選修3基因工程干擾素是一種抗病毒、抗腫瘤的藥物。將人的干擾素的cDNA在大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)，產(chǎn)生的干擾素的抗病毒活性為106U/mg，只相當(dāng)于天然產(chǎn)品的十分之一，雖然在大腸桿菌中合成的β-干擾素量很多，但多數(shù)是以無(wú)活性的二聚體形式存在。為什么會(huì)這樣？如何改變這種狀況？研究發(fā)現(xiàn)，β-干擾素蛋白質(zhì)中有3個(gè)半胱氨酸（第17位、31位和141位），推測(cè)可能是有一個(gè)或幾個(gè)半胱氨酸形成了不正確的二硫鍵。研究人員將第17位的半胱氨酸，通過(guò)基因定點(diǎn)突變改變成絲氨酸，結(jié)果使大腸桿菌中生產(chǎn)的β-干擾素的抗病性活性提高到108U/mg，并且比天然β-干擾素的貯存穩(wěn)定性高很多。浙科版生物選修3基因工程

水蛭素是水蛭唾液腺分泌的凝血酶特異抑制劑，它有多種變異體，由65或66個(gè)氨基酸殘基組成。水蛭素在臨床上可作為抗栓藥物用于治療血栓疾病。為提高水蛭素活性，在綜合各變異體結(jié)構(gòu)特點(diǎn)的基礎(chǔ)上提出改造水蛭素主要變異體HV2的設(shè)計(jì)方案，將47位的Asn（天冬酰胺）變成Lys（賴氨酸），使其與分子內(nèi)第4或第5位Thr（蘇氨酸）間形成氫鍵來(lái)幫助水蛭素N端肽段的正確取向，從而提高凝血效率，試管試驗(yàn)活性提高4倍，在動(dòng)物模型上檢驗(yàn)抗血栓形成的效果，提高20倍。浙科版生物選修3基因工程浙科版生物選修3基因工程浙科版生物選修3基因工程浙科版生物選修3基因工程浙科版生物選修3基因工程

現(xiàn)已制備足夠多的R探針和r探針．通過(guò)探針來(lái)檢測(cè)某植物相關(guān)的基因型。據(jù)圖回答下列問(wèn)題： ①若已提取到某抗旱植物Rr的葉肉細(xì)胞總DNA，____（能、不能）以DNA為模板擴(kuò)增抗旱基因。②R或r基因經(jīng)過(guò)處理變成單鏈DNA，若該處理方法不能用解旋酶，可以采取__________方法處理，破壞的是

鍵。③若被檢植物發(fā)生A現(xiàn)象，則被檢植物的基因型為_(kāi)__________。（1）能；（2）加熱；氫鍵；（3）

RR浙科版生物選修3基因工程1）以下說(shuō)法正確的是（）

A、所有的限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列

B、質(zhì)粒是基因工程中唯一的運(yùn)載體

C、運(yùn)載體必須具備的條件之一是：具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接

D、基因控制的性狀都能在后代表現(xiàn)出來(lái)C練習(xí)浙科版生物選修3基因工程2）不屬于質(zhì)粒被選為基因運(yùn)載體的理由是

A、能復(fù)制（）

B、有多個(gè)限制酶切點(diǎn)

C、具有標(biāo)記基因

D、它是環(huán)狀DNAD練習(xí)浙科版生物選修3基因工程3）有關(guān)基因工程的敘述中，錯(cuò)誤的是（）

A、DNA連接酶將黏性末端的堿基對(duì)連接起來(lái)

B、限制性內(nèi)切酶用于目的基因的獲得

C、目的基因須由運(yùn)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞

D、人工合成目的基因不用限制性內(nèi)切酶A練習(xí)浙科版生物選修3基因工程4）有關(guān)基因工程的敘述正確的是（）

A、限制酶只在獲得目的基因時(shí)才用

B、重組質(zhì)粒的形成在細(xì)胞內(nèi)完成

C、質(zhì)粒都可作為運(yùn)載體

D、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)可為合成目的基因提供資料D練習(xí)浙科版生物選修3基因工程5）基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的。在基因操作的基本步驟中，不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的步驟是（）

A、人工合成目的基因

B、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合

C、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞

D、目的基因的檢測(cè)和表達(dá)C練習(xí)浙科版生物選修3基因工程3.下列四條DNA分子，彼此間具有粘性末端的一組是

A．①②B．②③C．③④D．②④答案：D浙科版生物選修3基因工程鞏固練習(xí):1.人們常選用的細(xì)菌質(zhì)粒分子往往帶有一個(gè)抗生素抗性基因,該抗性基因的主要作用是()A.提高受體細(xì)胞在自然環(huán)境中的耐藥性B.有利于對(duì)目的基因是否導(dǎo)入進(jìn)行檢測(cè)C.增加質(zhì)粒分子的分子量D.便于與外源基因連接2.在遺傳工程技術(shù)中,限制性內(nèi)切酶主要用于()A.目的基因的提取和導(dǎo)入B.目的基因的提取和檢測(cè)C.目的基因與載體的結(jié)合和導(dǎo)入D.目的基因的提取與載體結(jié)合BD浙科版生物選修3基因工程3.在遺傳工程技術(shù)中,下列何種目的基因一般以直接分離的方法獲得()A.人的胰島素基因B.蠶的蠶絲蛋白基因C.芽孢桿菌的抗蟲(chóng)基因D.菜豆儲(chǔ)藏蛋白基因4.1976年,美國(guó)的科學(xué)家首次將人的生長(zhǎng)抑制素釋放因子的基因轉(zhuǎn)移到大腸桿菌,并獲得了表達(dá),此文中的表達(dá)是指該基因在大腸桿菌()A.能進(jìn)行DNA復(fù)制B.能傳遞給細(xì)菌后代C.能合成生長(zhǎng)抑制素釋放因子D.能合成人的生長(zhǎng)素CC浙科版生物選修3基因工程3．在基因工程中，科學(xué)家所用的“剪刀”、“針線”和“載體”分別是指()A.大腸桿菌病毒、質(zhì)粒、DNA連接酶

B.噬菌體、質(zhì)粒、DNA連接酶C.限制酶、RNA連接酶、質(zhì)粒

D.限制酶、DNA連接酶、質(zhì)粒D浙科版生物選修3基因工程11．不屬于基因工程方法生產(chǎn)的藥物是A．干擾素 B．白細(xì)胞介素C．青霉素D．乙肝疫苗12．若利用基因工程技術(shù)培育能固氮的水稻新品種，其在環(huán)保上的重要意義是（）A．減少氮肥的使用量，降低生產(chǎn)成本B．減少氮肥的使用量，節(jié)約能源C．避免氮肥過(guò)多引起環(huán)境污染D．改良土壤結(jié)構(gòu)13．基因治療是指（）

A.對(duì)有基因缺陷的細(xì)胞進(jìn)行修復(fù)，從而使其恢復(fù)正常，達(dá)到治療疾病的目的

B.把健康的外源基因?qū)氲接谢蛉毕莸募?xì)胞中，達(dá)到治療疾病的目的

C.運(yùn)用人工誘變的方法，使有基因缺陷的細(xì)胞發(fā)生基因突變恢復(fù)正常

D.運(yùn)用基因工程技術(shù)，把有缺陷的基因切除，達(dá)到治療疾病的目的CCB浙科版生物選修3基因工程6．質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體，它的主要特點(diǎn)是①能自主復(fù)制②不能自主復(fù)制③結(jié)構(gòu)很?、艿鞍踪|(zhì)⑤環(huán)狀RNA⑥環(huán)狀DNA⑦能“友好”地“借居”A．①③⑤⑦ B．①④⑥

C．①③⑥⑦ D．②③⑥⑦C浙科版生物選修3基因工程8．在基因工程中，科學(xué)家常用細(xì)菌、酵母菌等微生物作為受體細(xì)胞，原因是（）

A.結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，操作方便B.遺傳物質(zhì)含量少

C.繁殖速度快D.性狀穩(wěn)定，變異少9．基因工程的操作步驟：①使目的基因與運(yùn)載體相結(jié)合，②將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，③檢測(cè)目的基因的表達(dá)是否符合特定性狀要求，④提取目的基因，正確的操作順序是（）

A．③②④①B.②④①③

C．④①②③D．③④①②CC浙科版生物選修3基因工程15．在基因診斷技術(shù)中，所用的探針DNA分子中必須存在一定量的放射性同位素，后者的作用是（）

A．為形成雜交的DNA分子提供能量

B．引起探針DNA產(chǎn)生不定向的基因突變

C.作為探針DNA的示蹤元素D．增加探針DNA的分子量C浙科版生物選修3基因工程19．現(xiàn)有一長(zhǎng)度為1000堿基對(duì)(by）的DNA分子，用限制性核酸內(nèi)切酶EcoR1酶切后得到的DNA分子仍是1000by，用Kpn1單獨(dú)酶切得到400by和600by兩種長(zhǎng)度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同時(shí)酶切后得到200by和600by兩種長(zhǎng)度的DNA分子。該DNA分子的酶切圖譜正確的是D浙科版生物選修3基因工程20、（2008理綜全國(guó)卷Ⅰ）4．已知某種限制性內(nèi)切酶在一線性DNA分子上有3個(gè)酶切位點(diǎn)，如圖中箭頭所指。如果在該線性DNA分子在3個(gè)酶切位點(diǎn)上都被該酶切斷，則會(huì)產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長(zhǎng)度的DNA片段?，F(xiàn)有多個(gè)上述線性DNA分子，若在每個(gè)DNA分子上至少有1個(gè)酶切位點(diǎn)被該酶切斷，則從理論上講，經(jīng)該酶酶切后，這些線性DNA分子最多能產(chǎn)生長(zhǎng)度不同的DNA片段種類數(shù)是A．3 B．4C．9 D．12C4+3+2=9種。浙科版生物選修3基因工程易混淆的幾種酶 如圖為DNA分子的某一片段，其中①②③分別表示某種酶的作用部位，則相應(yīng)的酶依次是()A．DNA連接酶、限制酶、解旋酶B．限制酶、解旋酶、DNA連接酶C．解旋酶、限制酶、DNA連接酶D．限制酶、DNA連接酶、解旋酶【解析】限制酶、DNA連接酶的作用部位為磷酸二酯鍵，解旋酶的作用部位在氫鍵?！敬鸢浮?/p>

C浙科版生物選修3基因工程3．下表為5種限制性核酸內(nèi)切酶（以下簡(jiǎn)稱“限制酶”）的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)（箭頭位置），某線性DNA分子含有4個(gè)BamHI的識(shí)別序列、4個(gè)BstI的識(shí)別序列，3個(gè)BgIII的識(shí)別序列；據(jù)此判斷下列敘述中，正確的是A．該DNA分子能被Sau3AI切成12個(gè)片段B．一種特定序列只能被一種限制酶識(shí)別并在特定位點(diǎn)被切割C．兩個(gè)能夠互補(bǔ)配對(duì)的DNA片段所具有的粘性末端一定相同D．用BgIII、BamHI兩種限制酶和DNA連接酶對(duì)該DNA分子進(jìn)行反復(fù)切割、連接操作，若干循環(huán)后，BamHI的識(shí)別序列將少于4個(gè)D2浙科版生物選修3基因工程請(qǐng)根據(jù)圖乙電泳圖譜分析各限制酶的酶切位點(diǎn)，并在答題紙的質(zhì)粒上標(biāo)出各個(gè)限制酶的酶切位點(diǎn)和各位點(diǎn)間的大小。浙科版生物選修3基因工程2．若要利用某目的基因(圖甲)和P1噬菌體載體(圖乙)構(gòu)建重組DNA(圖丙)，限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)分別是BglⅡ(AGATCT)、EcoRⅠ(GAATTC)和Sau3AⅠ(GATC)。下列分析合理的是 (

)

A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體B．用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體答案D浙科版生物選修3基因工程5．如圖表示化學(xué)方法合成目的基因Ⅰ的過(guò)程。據(jù)圖分析下列敘述正確的是 (

)A．過(guò)程①需要DNA連接酶B．過(guò)程②需要DNA限制性核酸內(nèi)切酶C．目的基因Ⅰ的堿基序列是已知的D．若某質(zhì)粒能與目的基因Ⅰ重組，則該質(zhì)粒與Ⅰ的堿基序列相同答案C浙科版生物選修3基因工程解析化學(xué)合成目的基因的前提是目的基因的堿基序列是已知的，且目的基因的相對(duì)分子質(zhì)量較小，C正確；圖中①②過(guò)程是預(yù)先設(shè)計(jì)