醫(yī)療器械無菌環(huán)境控制及微生物檢測課件

徐敏鳳醫(yī)療器械無菌環(huán)境控制及微生物檢測16、自己選擇的路、跪著也要把它走完。17、一般情況下)不想三年以后的事，只想現(xiàn)在的事。現(xiàn)在有成就，以后才能更輝煌。18、敢于向黑暗宣戰(zhàn)的人，心里必須充滿光明。19、學(xué)習(xí)的關(guān)鍵--重復(fù)。20、懦弱的人只會裹足不前，莽撞的人只能引為燒身，只有真正勇敢的人才能所向披靡。徐敏鳳醫(yī)療器械無菌環(huán)境控制及微生物檢測徐敏鳳醫(yī)療器械無菌環(huán)境控制及微生物檢測16、自己選擇的路、跪著也要把它走完。17、一般情況下)不想三年以后的事，只想現(xiàn)在的事?，F(xiàn)在有成就，以后才能更輝煌。18、敢于向黑暗宣戰(zhàn)的人，心里必須充滿光明。19、學(xué)習(xí)的關(guān)鍵--重復(fù)。20、懦弱的人只會裹足不前，莽撞的人只能引為燒身，只有真正勇敢的人才能所向披靡。無菌醫(yī)療器械的環(huán)境控制

及微生物檢測上海市食品藥品監(jiān)督管理局上海市食品藥品包裝材料測試所潔凈檢測室徐敏鳳3/16/20212內(nèi)容 YY0033的潔凈室（區(qū)）要求相關(guān)法規(guī)和GMP中關(guān)于潔凈室（區(qū)）的內(nèi)容比較 潔凈室（區(qū)）的測試/維護(hù)及驗(yàn)證產(chǎn)品的微生物檢測3/16/20213空氣凈化系統(tǒng)的三級過濾示意圖6/29/20236通過凈化隔絕或排除污染合理設(shè)計建立的潔凈廠房和有效的管理在無菌醫(yī)療器械生產(chǎn)中會體現(xiàn)出非常優(yōu)越的性能，它通過對墻體、地板、屋頂、管線、水源、照明、通風(fēng)和溫度濕度等功能設(shè)計達(dá)到內(nèi)部的潔凈環(huán)境，通過空氣的三級過濾使進(jìn)入潔凈室的空氣是符合要求的，它能夠通過人員和物料的凈化程序隔絕或消除外來污染，通過氣流組織、壓差和換氣次數(shù)等參數(shù)抑制微生物、微粒的污染，它能夠排除由于光、味道、相對濕度等導(dǎo)致的任何質(zhì)量損害，通過嚴(yán)格的工藝紀(jì)律達(dá)到避免交叉污染的目的。6/29/20237法規(guī)YY0033無菌醫(yī)療器具質(zhì)量管理規(guī)范醫(yī)療器械管理條例其他相關(guān)規(guī)章6/29/20238生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局廠址及廠區(qū)

廠址的選擇：（5.1.1~5.1.2）

遠(yuǎn)離空氣污染、水質(zhì)污染、振動或噪聲干擾的區(qū)域.6/29/20239生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局廠址及廠區(qū)

廠區(qū)內(nèi)的布局（5.1.3~5.1.5）廠區(qū)的道路和綠化、生活區(qū)和輔助區(qū)對生產(chǎn)區(qū)不產(chǎn)生污染為原則.6/29/202310生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局生產(chǎn)廠房

一般生產(chǎn)區(qū)：（5.2.1）應(yīng)設(shè)計合理，采光、通風(fēng)良好，能滿足生產(chǎn)需要.6/29/202311生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局生產(chǎn)廠房

一般生產(chǎn)區(qū)：（5.2.1）應(yīng)設(shè)計合理，采光、通風(fēng)良好，能滿足生產(chǎn)需要.6/29/202312生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局潔凈區(qū) 潔凈度的級別和潔凈度級別的設(shè)置（5.2.2.1)附錄A;附錄B6/29/202313生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局無菌醫(yī)療器具產(chǎn)品生產(chǎn)環(huán)境潔凈度級別設(shè)置指南（附錄B） 潔凈度設(shè)置的原則：1、根據(jù)產(chǎn)品的技術(shù)要求，采用使污染降至最低限的技術(shù)；2、根據(jù)工序的不同要求，采用不同的潔凈度級別.可采用局部工作區(qū)與和全室空氣凈化相結(jié)合.6/29/202314生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局潔凈區(qū)的內(nèi)表面（5.2.2.2）潔凈區(qū)的密封性（5.2.2.3）潔凈區(qū)門的設(shè)置（5.2.2.4/5）工藝流程布局（5.2.2.6）潔凈區(qū)內(nèi)水電設(shè)施（5.2.2.7）潔凈區(qū)的照明（5.2.2.8）潔凈區(qū)內(nèi)的操作臺要求（5.2.2.9）潔凈區(qū)內(nèi)使用的壓縮空氣的要求（5.2.2.10）水池、地漏等（5.2.2.11）6/29/202315生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局人員凈化 人員凈化室（5.3.1） 凈化的程序（5.3.2） 人員凈化中的換鞋的要求（5.3.3） 人員的流向（5.3.4） 盥洗室和風(fēng)淋房的設(shè)置（5.3.5/6） 潔凈區(qū)人均面積的限制（5.3.7）6/29/202316生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局物料凈化 清潔措施（5.4.1） 物料的傳遞（5.4.2） 物料的包裝（5.4.3）6/29/202317生產(chǎn)環(huán)境、實(shí)施及布局工藝布局 按產(chǎn)品形成過程順向布置（5.5.1） 潔凈室內(nèi)的工藝裝備和設(shè)施、產(chǎn)品的中間庫、不同潔凈級別之間的物料傳遞（5.5.2/3/4） 潔凈室內(nèi)的器具和潔具的管理（5.5.5/6）6/29/202318潔凈區(qū)的周邊環(huán)境及格局潔凈室（區(qū)）周圍環(huán)境應(yīng)保持清潔整齊，沒有露土地面。潔凈廠房周圍的道路面層，應(yīng)選用整體性能好、發(fā)塵少的材料。潔凈廠房周圍應(yīng)進(jìn)行綠化，可鋪植草坪，但不應(yīng)種植對生產(chǎn)有害的植物，并不妨礙消防作業(yè)。潔凈室（區(qū)）應(yīng)布置在廠區(qū)內(nèi)環(huán)境清潔，人流物流不穿越或少穿越的區(qū)域。潔凈室（區(qū)）應(yīng)為密閉廠房。生產(chǎn)企業(yè)可以根據(jù)產(chǎn)品的分類和用途確定相應(yīng)潔凈級別，并據(jù)此結(jié)合生產(chǎn)工藝進(jìn)行凈化廠房的設(shè)計和施工，以保證產(chǎn)品在符合規(guī)定的環(huán)境里生產(chǎn)。應(yīng)考慮與產(chǎn)品的生產(chǎn)流程相匹配。以最短的時間，即最小被污染的原則來制訂的。一般來說，生產(chǎn)流程是按照產(chǎn)品的生產(chǎn)流向順序排列，不迂回交叉，不相互影響；應(yīng)考慮影響潔凈指標(biāo)的因素，主要是廠房結(jié)構(gòu)、裝修材料、門窗、生產(chǎn)設(shè)備、布局、工藝、人員等等，應(yīng)在滿足使用要求的同時滿足潔凈要求。6/29/202319潔凈室的基本要求HVAC系統(tǒng)工程、工藝布局和相關(guān)維護(hù)設(shè)施應(yīng)遵循物料和產(chǎn)品發(fā)生任何污染的危險度降至最低的原則。當(dāng)生產(chǎn)技術(shù)不能保證生產(chǎn)不受污染或不能有效排除污染時，該生產(chǎn)區(qū)域的潔凈級別應(yīng)在條件許可的前提下提高生產(chǎn)控制區(qū)應(yīng)為密閉空間，內(nèi)表面應(yīng)平整光滑，無顆粒物脫落，墻面和地面能耐受清洗和消毒，以減少灰塵的積聚。應(yīng)使用現(xiàn)行的設(shè)計和安裝標(biāo)準(zhǔn)6/29/202320對潔凈室（區(qū)）測試的規(guī)定換氣次數(shù)（截面平均風(fēng)速）溫度相對濕度靜壓差懸浮粒子浮游菌沉降菌噪聲照度6/29/202321各國法規(guī)的比較藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（1998年修訂）獸藥生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2001年修訂）CodeofGMPforMedicinalProducts(Draft,2003，F(xiàn)DA)AustralianCodeofGMPforMedicinalProducts(16August2002)CodeofGMPforMedicinalProducts(2003，EU)ISO14644CleanroomsandassociatedcontrolledenvironmentsISO14698Cleanroomsandassociatedcontrolledenvironments－BiocontaminationcontrolUSP27-1116MicrobiologicalEvaluationofCleanRoomsandOtherControlledEnvironmentsPDABethesda,Maryland,USA－MicrobiologicalRiskAssessmentinPharmaceuticalCleanRoomsGB50073－2002潔凈廠房設(shè)計規(guī)范JGJ71－90潔凈室施工和驗(yàn)收規(guī)范等等6/29/202322以懸浮粒子為例與國際標(biāo)準(zhǔn)比較動態(tài)與靜態(tài)分級數(shù)值對核心區(qū)的控制6/29/202323ISO/TC20914644.1Classificationnumber(N)0.10.20.30.515ISOclass1102ISOclass210024104ISOclass31000237102358ISOclass4100002370102035283ISOclass51000002370010200352083229ISOclass61000000237000102000352008320293ISOclass7352000832002930ISOclass8352000083200029300ISOclass93520000083200002930006/29/202324以浮游菌為例與國際標(biāo)準(zhǔn)比較EUGMP附錄1FDAGMPUSP27TGAGMPISO14644潔凈度級別標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級別標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級別標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級別標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級別GradeA<1100<1M3.5≤3GradeA<1Class5GradeB≤101000≤7//GradeB≤10Class6GradeC≤10010000≤10M5.5≤20GradeC≤100Class7GradeD≤200100000≤100M6.5≤100GradeD≤200Class8/////////6/29/202325以沉降菌為例與國際標(biāo)準(zhǔn)比較EUGMP附錄1FDAGMPUSP27TGAGMPISO14644潔凈度級別標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級別標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級別標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級別標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級別GradeA<1100<1M3.5/GradeA<1Class5GradeB≤51000≤3//GradeB≤5Class6GradeC≤5010000≤5M5.5/GradeC≤50Class7GradeD≤100100000≤50M6.5/GradeD≤100Class8/////////6/29/202326以換氣次數(shù)、壓差為例比較換氣次數(shù)靜壓差關(guān)于測試狀態(tài)6/29/202327潔凈室（區(qū)）的分類舉例首先應(yīng)布局合理、質(zhì)量可控其次應(yīng)重視HVAC系統(tǒng)的功能協(xié)調(diào)(1)潔凈送風(fēng)機(jī)組：三級過濾、去濕增濕、空氣調(diào)節(jié)等裝置等。系統(tǒng)的新風(fēng)量為總送風(fēng)量的10～30％，一般人均新風(fēng)占有量為40m3，干凈機(jī)組送風(fēng)量設(shè)計的換氣次數(shù)應(yīng)大于驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)，機(jī)組功能是處理新風(fēng)和回風(fēng)；(2)送回風(fēng)管路：管道、調(diào)節(jié)筏、防火閥，有的裝有消聲裝置等，功能是輸送較為潔凈的空氣；(3)潔凈室的布局按最低污染原則，主要是明確生產(chǎn)工藝流程、明確人流物流和氣流走向、預(yù)測若達(dá)到設(shè)計指標(biāo)后的凈化系統(tǒng)運(yùn)轉(zhuǎn)產(chǎn)生的后果，然后確定最終格局。6/29/202328值得關(guān)注的問題空調(diào)機(jī)組的設(shè)計和安裝與生產(chǎn)需求不適應(yīng)回風(fēng)管道的設(shè)計和安裝不合理廠房布局不適應(yīng)工藝流程及其空氣潔凈度要求，例如，生產(chǎn)區(qū)作為人流或物流通道，交叉往返太多，盥洗室和生產(chǎn)區(qū)或貯存區(qū)直接往來相通。不同生產(chǎn)操作和相鄰的廠房之間未能有效隔離，且有妨礙不同空氣潔凈度級別的潔凈室（區(qū)）之間的人員和物料的出入，沒有防止交叉污染的產(chǎn)生，特別室級別不同的窗戶之間沒有緩沖設(shè)施潔凈室（區(qū)）與非潔凈室（區(qū)）之間，沒有人、物獨(dú)立的緩沖設(shè)施，人流、物流走向也不合理10000級潔凈室（區(qū)）使用的傳輸設(shè)備穿越了更低級別的區(qū)域6/29/202329潔凈室（區(qū)）的測試方法測試人員測試儀器測試方法注意事項6/29/202330人員和物品的出入控制在潔凈室（區(qū)）內(nèi)，所需工作人員應(yīng)滿足最小數(shù)量，同時，潔凈環(huán)境以外區(qū)域的工作人員也應(yīng)盡可能監(jiān)控。這在滿足測試條件時尤其重要；不得在潔凈室（區(qū)）內(nèi)佩戴腕表和飾物、不得化妝；潔凈工作服的選材、式樣及穿戴方式應(yīng)與生產(chǎn)操作的空氣潔凈度等級要求相適應(yīng)所有的工作人員，包括與測試、維護(hù)有關(guān)的人員，應(yīng)該定期接受與潔凈室（區(qū)）生產(chǎn)有關(guān)的培訓(xùn)，其中包含涉及到的衛(wèi)生知識和基本微生物知識潔凈室（區(qū)）的測試人員應(yīng)進(jìn)行本專業(yè)的培訓(xùn)并獲得相應(yīng)資格后才能履行對潔凈室（區(qū)）測試的職責(zé)6/29/202331注意事項在進(jìn)行測試之前，應(yīng)先確定待測區(qū)域、測試狀態(tài)、儀器設(shè)備、測試規(guī)程、采樣點(diǎn)位置、評價標(biāo)準(zhǔn)以及相關(guān)注意事項；建立環(huán)境監(jiān)測程序，這樣才能證實(shí)設(shè)備以及產(chǎn)品的接觸環(huán)境是潔凈和衛(wèi)生的，并可以確定潛在的污染物是否能被控制到適當(dāng)水平；所有儀器設(shè)備在未進(jìn)入被測區(qū)域時，應(yīng)保證其符合性、有效性和已完成清潔，或在相應(yīng)的潔凈室內(nèi)準(zhǔn)備和存放（用保護(hù)罩或其它適當(dāng)?shù)赝庹直Ｗo(hù)儀器）；測試人員在測試時必須穿戴符合被測環(huán)境級別的潔凈工作服；在測試時應(yīng)避免膚屑、微生物或人體皮膚上的油造成潛在的污染；6/29/202332測試方法測試順序溫度,相對濕度的影響換氣次數(shù)/風(fēng)速的影響靜壓差的影響氣流組織與自凈時間對測試的影響測試數(shù)據(jù)的處理6/29/202333檢測結(jié)果的評價檢測數(shù)據(jù)經(jīng)過整理后，可以與標(biāo)準(zhǔn)值比較后得出結(jié)論。檢測時應(yīng)做好記錄，記錄包含足夠的信息?，F(xiàn)場記錄會發(fā)給大家。標(biāo)題、記錄的唯一性標(biāo)識（如編號等）、工序或潔凈室名稱、檢測日期、采用標(biāo)準(zhǔn)、采用儀器名稱及編號、檢測項目、檢測數(shù)據(jù)及其計算、簽名等6/29/202334維護(hù)及驗(yàn)證微生物的控制人員以及管理良好的規(guī)范以及執(zhí)行Part2SupplierGuidePart1UserGuide6/29/202335人員的管理有能力，有資格，有經(jīng)驗(yàn)數(shù)量充分組織機(jī)構(gòu)完善、關(guān)鍵崗位人員配備合理生產(chǎn)，工程，維護(hù)，保潔等部門所有員工的培訓(xùn)：潔凈廠房，衛(wèi)生學(xué)，微生物學(xué)以及行為的基本培訓(xùn)制訂健康規(guī)定，行為規(guī)范，服裝規(guī)則控制人員到最小量，出入控制6/29/202336ＨＶＡＣ系統(tǒng)驗(yàn)證的測試項目氣溶膠對ＨＥＰＡ的檢漏氣溶膠測定儀1.jpg自凈時間氣流流型動態(tài)的重現(xiàn)性核心區(qū)的控制微生物其他常規(guī)項目的測試驗(yàn)證評價回顧性驗(yàn)證6/29/202337HVAC系統(tǒng)的驗(yàn)證步驟常規(guī)的驗(yàn)證工作有以下幾個步驟；1，設(shè)立驗(yàn)證的組織機(jī)構(gòu)（驗(yàn)證小組等）；2，制定驗(yàn)證計劃，確定所需的設(shè)備、系統(tǒng)、過程和時間表；3，制定驗(yàn)證方案，必須確定為達(dá)到預(yù)期目的的具有可操作性的驗(yàn)證方法；包括驗(yàn)證目的、適用范圍、系統(tǒng)或設(shè)備、驗(yàn)證方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、實(shí)施步驟等4，按照驗(yàn)證方案實(shí)施；5，收集驗(yàn)證數(shù)據(jù)出具驗(yàn)證報告，包括驗(yàn)證結(jié)果、驗(yàn)證評價和建議，再驗(yàn)證周期等。6/29/202338微生物的基本知識定義：自然界中除動植物外，還存在一個龐雜，形態(tài)微小結(jié)構(gòu)簡單的生物類群，因個體微小，肉眼不能看到，需借光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大幾百，幾千，幾萬倍才能看到。此類微小的生物統(tǒng)稱為微生物（microorganism）特點(diǎn)：形體小，結(jié)構(gòu)簡單，新陳代謝能力強(qiáng)，生長繁殖快，細(xì)胞未明顯分化，易發(fā)生變異，種類多分布廣。舉例：細(xì)胞，真菌分布：土壤，空氣，水，動植物人體表，腔道中等6/29/202339微生物的主要特性細(xì)菌和菌類名稱

單體尺寸（μm） 菌類（含真菌） 3··80 枯草菌 5··10 水腫菌 5··10 肺炎桿菌 1.1··7 乳酸菌 1··7 白喉菌 1··6 大腸菌 1··5 結(jié)核菌 1.5··4 破傷風(fēng)菌2··4 傷寒桿菌 1··3 普通化膿桿菌 0.7··1.3 白色（黃色）葡萄球菌 0.3··1.2 炭疽桿菌 0.46··0.566/29/202340微生物的基本知識對于細(xì)菌的生長來說所需的營養(yǎng)物質(zhì)有：水，碳源（有機(jī)：糖類；無機(jī)：CO2），氮源（N2，硝酸鹽，銨鹽，有機(jī)蛋白胨，氨基酸等），生長因子（維生素，氨基酸，嘌呤，嘧啶），無機(jī)鹽（磷酸鹽，硫酸鹽，氯鹽，

鉀鹽，鈉鹽，鎂鹽，鈣鹽等）6/29/202341微生物的基本知識生長條件：1.充足的營養(yǎng)2.合適的pH值，6.8-7.43.合適的溫度，哺乳動物寄生的為35℃，其他腐生的為25℃

4.氣體：氧氣，二氧化碳6/29/202342微生物的基本知識培養(yǎng)方法：固體培養(yǎng)基：接種于平板固體培養(yǎng)基上，由單個繁殖形成肉眼可見的集團(tuán)—菌落菌落特點(diǎn)的判定：大小，形狀，光滑或粗糙，色澤（固體培養(yǎng)基上）；若于液體培養(yǎng)基中，有菌生長則呈混濁。6/29/202343微生物的基本知識細(xì)菌的生長：分為延遲期，對數(shù)生長期，穩(wěn)定期，衰亡期。其中，對數(shù)生長期是細(xì)菌生長最旺盛的時期，很多藥物選擇在這一時期作用最有效，我們觀察細(xì)菌生長也是在這一時期最明顯。6/29/202344微生物的基本知識霉菌：絲狀真菌的統(tǒng)稱，有分支或不分支的菌絲與孢子構(gòu)成，形成的菌落疏松呈絨毛狀絮狀。結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁，細(xì)胞膜，細(xì)胞漿，細(xì)胞核。特點(diǎn)：對酸不敏感，pH2-9，生長溫度為22-28℃。6/29/202345革蘭氏染色法分類鑒定菌種的重要指標(biāo)初染（結(jié)晶紫）媒染（碘液）脫色（95%乙醇）復(fù)染（沙黃）陽性菌仍顯紫色陰性菌復(fù)染后呈紅色6/29/202346無菌實(shí)驗(yàn)的基本常識無菌實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境控制要求2005版中國藥典規(guī)定P164GB/T14233.2無菌實(shí)驗(yàn)人員的衛(wèi)生要求個人衛(wèi)生穿戴潔凈工作服的規(guī)范洗手及消