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文檔簡介
腦脊液檢驗實驗一腦脊液理學檢查(目的)掌握腦脊液理學檢查的內(nèi)容,方法。(標本)新鮮腦脊液。(操作)1.觀察顏色肉眼觀察腦脊液顏色變化,分別以無色,乳白色,紅色,棕色,或黑色,綠色等文字如實描述報告。2.觀察透明度肉眼觀察腦脊液透明度變化。正常腦脊液清晰透明,病理情況下可出現(xiàn)不同程度渾濁,可分別以“清晰透明”?!拔啞保皽啙帷钡热鐚崍蟾?。3.觀察凝塊或薄膜輕輕傾斜試管,肉眼仔細觀察有無凝塊或薄膜。正常腦脊液無凝塊或薄膜,腦膜炎時可形成凝塊或薄膜,分別以“無凝塊”,“有凝塊”,“有薄膜”等如實報告。(注意事項)
當標本顏色或透明度改變不明顯時,應在燈光下以白色或黑色為背景仔細觀察,同時觀察有無凝塊。
懷疑為結核性腦膜炎時,標本應在2~4℃環(huán)境中靜置12~24h再觀察腦脊液表面有無薄膜形成。參考值:無色,清晰透明,放置后無凝塊或薄膜形成。實驗二腦脊液顯微鏡檢查(目的)掌握腦脊液顯微鏡檢查的內(nèi)容,方法。(器材)顯微鏡,改良牛鮑計數(shù)板,微量吸管??潭任埽≡嚬?。(試劑)生理鹽水或紅細胞稀釋液,冰乙酸,白細胞稀釋液,瑞氏染液或瑞—吉染液。(標本)新鮮腦脊液。(操作)
細胞總數(shù)計數(shù)直接計數(shù)法(適用于清晰透明或微渾腦脊液)充池:微量吸管吸取混勻的腦脊液,充入血細胞計數(shù)板的上下2個計數(shù)池。計數(shù):靜置2~3min,低倍鏡下計數(shù)2個計數(shù)池內(nèi)四角和中央大方格共10個大方格內(nèi)的細胞數(shù)。計算:10個大方格內(nèi)的細胞總數(shù)即為每微升腦脊液細胞總數(shù),再換算稀釋計數(shù)法(適用于渾濁的腦脊液)稀釋:如標本細胞過多,可根據(jù)標本內(nèi)細胞多少,用生理鹽水或紅細胞稀釋液對標本進行一定倍數(shù)稀釋。充池:用微量吸管吸取混勻后的稀釋腦脊液充入1個計數(shù)池。計數(shù):靜置2~3后,低倍鏡計數(shù)1個計數(shù)池內(nèi)四角和中央大方格共5個大方格內(nèi)的細胞數(shù)。計算:根據(jù)5個大方格內(nèi)細胞總數(shù)及稀釋倍數(shù),計算每升腦脊液的細胞總數(shù)。白細胞計數(shù)直接計數(shù)法(非血性清晰透明或微渾腦脊液)除去紅細胞:在小試管內(nèi)加入冰乙酸1~2滴,轉動試管,使內(nèi)壁粘附少許冰乙酸后傾去,滴加混勻的腦脊液3~4滴,混勻,放置數(shù)分鐘,使紅細胞破壞。充池:計數(shù):計算:稀釋計數(shù)法(渾濁腦脊液)稀釋破壞紅細胞:根據(jù)標本內(nèi)白細胞多少情況,用白細胞稀釋液對標本進行一定倍數(shù)的稀釋,混勻,放置數(shù)分鐘,破壞紅細胞。充池:用微量吸管吸取混勻稀釋后的腦脊液充入1個計數(shù)池。計數(shù):靜置2~3min后,低倍鏡計數(shù)1個計數(shù)池內(nèi)的四角和中央大方格內(nèi)的白細胞數(shù)。計算:根據(jù)5個大方格內(nèi)的白細胞總數(shù)和稀釋倍數(shù),計算每升腦脊液的白細胞總數(shù)白細鑰胞分俊類計錢數(shù)直接洋分類緩法白細太胞計貧數(shù)后鞏,轉盡換高握倍鏡滾,根瘋據(jù)細告胞的夫形態(tài)瓣和細腫胞核圈形態(tài)委進行雄直接壇分類防,共唯計數(shù)炒10允0個巴白細植胞(兔包括鋼內(nèi)皮滔細胞掃),初分別潔計數(shù)密單(穩(wěn)個)滅核細績胞(裝包括哭淋巴湖細胞率,單角核細剪胞,驚內(nèi)皮餡細胞鋸)和雹多(奧個)餅核細鼓胞(蓬粒細茶胞系工)的完數(shù)量差,結往果以艇單核至細胞挪百分動比和戒多核準細胞煎百分抖比報厲告。咽如白侄細胞綠不足撥10撐0個豆,可壘直接民寫出渾單核勾細胞熄和多棟核細囑胞具剝體數(shù)冰,若宇白細篇胞數(shù)暗不足狼30化個,劇可不啟做直盯接計材數(shù)而既改用帳涂片健染色金分類峽計數(shù)涂片謀染色持分類大法若直聽接分教類不耗易區(qū)耕別細誦胞時心,可旁將腦太脊液推以10急00很r/易mi頑n離物心5需mi移n,取沉尤淀物尺,制里成均抓勻薄泡片,閉置于圖室溫哥或3跳7℃啊恒溫布箱內(nèi)嬸盡快倡干燥羨,瑞錄氏或勾瑞—辦吉染論色后看,油凍鏡下討進行潛分類顏計數(shù)睜,結喘果報兇告與燦血液獎白細痛胞分畢類計晴數(shù)報免告方咽式相愧同。忽若見遠激活龜型單沉核細撞胞(肢比普才通單杯核細憤胞大壤,胞倘質邊五緣趁巨、呈進花邊炎狀,此胞質筒內(nèi)有役空泡世),梯轉化尖型淋以巴細仙胞(恢形態(tài)憐似異嶺型淋數(shù)巴細登胞)蛋及室族管膜鋒細胞喂(形序態(tài)似蔥大淋城巴細走胞)朝應計插入分縣類的寧百分島比中(注紛意事嶼項)直接率白細灰胞計插數(shù)時岸,也成可用密微量懸吸管匆吸取超冰乙涌酸后衫盡可趟能全瞇部吹基出,奮僅使暖吸管文內(nèi)壁棍粘附眠少許浙冰乙蠻酸,王再吸在取少劣量混遙勻的引腦脊丟液于待吸管諸中,外數(shù)分準鐘后悅吸管延內(nèi)紅晃細胞塔溶解眉,然邪后再搞充池奶計數(shù)怕。細胞倉計數(shù)說時,脈如發(fā)股現(xiàn)較切多紅稍細胞悼有皺匪縮或霧腫脹覽等異論?,F(xiàn)秤象,科應如耗實報續(xù)告,斜以協(xié)精助臨吐床醫(yī)賞生鑒華別是伐陳舊時性出幟血或毒新鮮辯出血倍。血性貸腦脊事液中血的白谷細胞奴必須擴校正工后才基有價哀值白細手胞校節(jié)正數(shù)雙=腦傳脊液券白細杏胞未修校正茶數(shù)—弊腦脊擠液紅塞細胞愈數(shù)×謊血液躺白細寶胞數(shù)懇/血避液內(nèi)滿紅細色胞數(shù)細胞菌涂片房誠時,劑為了琴使細葛胞容腎易粘夠在玻姑片上螞,可新取沉扔淀的度細胞冊懸液虹2滴草,加無血清蘋1滴墨,混后勻后融涂片避。涂片蘆染色老分類鹽時,敗如見菜內(nèi)皮臭細胞決或異鞏常細鉆胞,按則另江行描徹述報痰告,縫必要忠時用刷巴氏邁或H憐E染儲色查辮找腫待瘤細財胞。實驗慣結束塵后,默血細歐胞計惠數(shù)板欲用0交.7娃5%腎(V陳/V古)乙茅醇浸發(fā)泡消褲毒6瞞0m肉in插,忌煤用酚語浸泡仍,以剩免損達壞計喊數(shù)板丟。方法番學評狡價腦脊稈液細炸胞計華數(shù)和通分類絮目前國一般戀任用底手工鞏顯微芽鏡法腹。白拍細胞沃直接速分類宣法簡聚單,冊快速盲,但恭屬粗文略分柄類,墨其準館確性湊差,襲且細精胞較乒小,撞初學亭者難乞把握夕,尤孫其是幻玉陳舊罵性標診本的豬細胞賣變形島,分鉤類更骨困難懶,誤趟差較雪大。沙涂片邊染色隙分類額法分崇類詳門細,劈燕結果算準確媽可靠臺,尤揚其是盛可以瀉發(fā)現(xiàn)噴異常艱細胞默如腫撇瘤細好胞。掠該法嗓被推孕薦使貢用,梳但其但操作鑄較復究雜,鵝費時捐。血液毫分析姥儀也被可進遺行腦腸脊液邁細胞衛(wèi)計數(shù)攔和白商細胞莫分類瞎,此抓法簡判單,惕快速螞,但蹄標本鉆尤其禁是病當理性湊,陳女舊性湯標本丑中的鍵組織結,細封胞的垮碎片祥以及初細胞柔變形虎等都堂可以言影響芽細胞距分類動和計略數(shù),炊故結鞭果重請復性千,可瀉靠性沸有待郊進一泰步探寒討。鴨另外灣,蛋但白質鉛含量便高,紋尤其缸有凝景塊的剃腦脊誘液標貸本容椅易使呈儀器曾堵孔聾,故非不推牙薦使決用質量狠控制標本后采集礙后應做在1岡h內(nèi)加進行凝細胞刪計數(shù)毒,若產(chǎn)放置碧太久任,細土胞可困能凝夠集成段團或山破壞萄,影劫響計廁數(shù)結查果。晨標本爽必須沈混勻參方可工充池頃,否配則影溫響計勸數(shù)結栗果因穿粥刺損悟傷血修管,雄引起童血性售腦脊抵液,桐白細脅胞計舊數(shù)結寬果必循須校做正,亞以剔朗除因勝出血撥而帶胞來的跪白細覽胞。細胞兄計數(shù)他時應襲注意園新型憑隱球立菌與惹白細曬胞,析紅細擴胞區(qū)野別白細茶胞計穗數(shù)直社接法擋的試狐管或墊吸管邀中的紗冰乙逗酸要叼盡量此去盡吹,否財則結疊果偏蓄低。若標卸本陳厚舊,道細胞擋變形充時,棉白細陷胞直聾接分擦類法麻誤差綁大,依推薦較用涂蠶片染搖色分酷類法銹分類寨計數(shù)勉。涂片湯染色基分類雖計數(shù)按時,香離心貿(mào)速度松不能希太快編,否夸則細仍胞形謀態(tài)受爆影響盲,有慰條件屢的單英位可忍用玻忘片離眾心沉饞淀法摟,細腫胞室趟沉淀鉆法等北收集胖細胞賞。涂片找固定殊時間矛不能階太長,更均不能攔高溫賭固定先,以賭免細炊胞皺硬縮。參考殲值①腦否脊液唯細胞蔑總數(shù)以:成雁人(鏟0~注10圍)×臟106/L柳,兒坡童(著0~勁15請)×正10短6/孫L.②無緊紅細說胞,貞僅有窯少數(shù)齒白細世胞,從以單厚個核她細胞惑為主妙,幾功乎完神全為他淋巴濱細胞省,偶猛爾內(nèi)痕皮細癥胞。實驗規(guī)三宅腦脊炊液蛋顆白質四定性晉檢查目的廳)腫掌蛛握腦快脊液肢蛋白分質定芽性試痛驗(懸潘迪齡試驗詳)的跑方法雨。(原喉理)暈腦脊皺液中雪球蛋濟白與濫苯酚送結合昏,形系成不圣溶性缺蛋白蠻鹽而壩產(chǎn)生算白色議渾濁么或沉曬淀。(器王材)承小試腎管,解刻度襲吸管脅,尖師滴管落。(試返劑)減飽和廣苯酚滲溶液繼:取身苯酚團10冒ml歌(有粉結晶港時,摸先放從入5慈6℃騾水浴性箱中嶄加熱遼助溶彈),趴加蒸漸餾水鄙至1城00徒ml昆,充夜分混贏勻,啞置入漁37玩℃溫板箱中答數(shù)小區(qū)時,悔見底春層有流苯酚臣析出瓦,取離上層燃飽和鑼苯酚績?nèi)芤毫阌谧貞n色瓶竊中避競光保險存。(標踩本)畢新鮮飼腦脊頭液。(操方作)1.蓋加試各劑架取試韻劑2能ml旅于小岔試管燈中。2.聰加標音本巨用尖頓滴管虜垂直穗滴加口腦脊睛液標姻本1烤—2懂滴。3.渠觀察央結果脫在領黑暗擴背景連下立栗即用修肉眼剝觀察愁結果風。4.釘判斷材結果(1絹)清挑晰透彈明,欄不呈駛現(xiàn)云慕霧狀火為(卡一)中。(2司)呈六微白料霧狀擱,對幟光不拔易看午見,綿黑色醋背景籍下才獻能見方到為齒(+麻—)(3嚇)灰外白色遙云霧康狀為美(+迫)。(4足)白損色渾糖濁或著白色鑼薄云周狀沉趙淀為駕(+留+)神。(5勁)白面色絮扁狀沉前淀或騎白色慈濃云養(yǎng)塊狀靜為(兇++站+)穗。(6周)立竟即形工成白坡色凝史塊為呀(+直++術+)角。注意抓事項當室釘溫在母10攤℃以能下時掃,應暗將試諸劑保湖存在拜37售℃溫文箱中拖,否笨則飽令和度薄降低冶,可開致假椅陰
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