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實(shí)驗(yàn)細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色和革蘭氏染色2023/7/231第1頁,課件共10頁,創(chuàng)作于2023年2月一、目的1、學(xué)習(xí)微生物涂片、染色的基本技術(shù);2、掌握細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色和革蘭氏染色;3、了解革蘭氏染色法的原理及其在細(xì)菌分類鑒定中的重要性;4、鞏固顯微鏡油鏡的使用方法。2023/7/232第2頁,課件共10頁,創(chuàng)作于2023年2月二、基本原理
革蘭氏染色法是由丹麥醫(yī)生C.Gram于1884年發(fā)明,是細(xì)菌學(xué)中最重要的鑒別染色法。革蘭氏染色法的基本步驟是:先用初染劑結(jié)晶紫進(jìn)行染色,再用碘液媒染,然后用乙醇脫色,最后用復(fù)染劑復(fù)染。各種細(xì)菌經(jīng)革蘭氏染色法染色后,能區(qū)分成兩大類,一類最終染成紫色,稱革蘭氏陽性細(xì)菌(G+),另一類被染成紅色,稱革蘭氏陰性細(xì)菌(G-)。2023/7/233第3頁,課件共10頁,創(chuàng)作于2023年2月革蘭氏染色陰性2023/7/234第4頁,課件共10頁,創(chuàng)作于2023年2月革蘭氏染色陽性
2023/7/235第5頁,課件共10頁,創(chuàng)作于2023年2月三、器材1、菌種大腸桿菌、四聯(lián)球菌
12~18h營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物;2、染色劑革蘭氏染色液3、儀器或其他用具光學(xué)顯微鏡、酒精燈、載玻片、香柏油、二甲苯、擦鏡紙、牙簽。2023/7/236第6頁,課件共10頁,創(chuàng)作于2023年2月四、操作步驟1、細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色用牙簽挑取少許牙垢涂片、固定、干燥染色1~2min水洗、干燥、鏡檢。2、細(xì)菌的革蘭氏染色在無菌操作下用接種環(huán)挑取少許細(xì)菌斜面培養(yǎng)物涂片、固定、干燥、初染1分鐘媒染1分鐘脫色20~30s復(fù)染1分鐘、水洗、干燥、鏡檢。2023/7/237第7頁,課件共10頁,創(chuàng)作于2023年2月2023/7/238第8頁,課件共10頁,創(chuàng)作于2023年2月五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告1、繪圖示你自己牙垢的細(xì)菌形態(tài)圖;2、說明染色觀察各菌的形狀、顏色和革蘭氏染色反應(yīng);3、思考題見實(shí)驗(yàn)教材(老)P.30~31
第(1)、(4)和(6)題。2023/7/239第9頁,課件共10頁,創(chuàng)作于2023年2月
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