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文檔簡介
實驗檢測生物組織第1頁,課件共11頁,創(chuàng)作于2023年2月
斐林試劑蘇丹Ⅲ橘黃色紅色磚紅色沉淀紫色蘇丹Ⅳ
雙縮脲試劑鑒定物質試劑實驗現象還原性糖脂肪蛋白質某些化學試劑能夠使生物組織中的有關有機化合物產生特定的顏色反應。實驗原理第2頁,課件共11頁,創(chuàng)作于2023年2月選材:含糖量較高的白色或近于白色的植物組織(排除色素對顯色的干擾),蘋果、梨最好
。
實驗流程(步驟)1.可溶性還原糖
制備組織樣液:制漿:去皮、切塊、研磨,過濾:(用單層紗布)取液:(2mL)顯色反應2mL組織樣液剛配制的斐林試劑2mL現象:
呈現藍色變成磚紅色(用前混勻)50~65.C水浴加熱2min第3頁,課件共11頁,創(chuàng)作于2023年2月還原糖的檢測和觀察:第4頁,課件共11頁,創(chuàng)作于2023年2月還原糖的檢測結果第5頁,課件共11頁,創(chuàng)作于2023年2月2.脂肪的鑒定
取材:花生種子(浸泡3-4h),去皮,將子葉削成薄片
制片:①選取最薄的薄片移至載玻片中央②在薄片上滴加蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)染液2-3滴,染色2-3min③滴加體積分數為50%的酒精溶液1—2滴,洗去浮色(多余的蘇丹Ⅲ
)④吸去余液,滴1-2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片,制成臨時裝片顯微觀察:先在低倍鏡下找到已著色的薄片,后用高倍鏡觀察現象:有被染成橘黃色(或紅色)的脂肪微粒脂肪微粒第6頁,課件共11頁,創(chuàng)作于2023年2月脂肪的檢測結果第7頁,課件共11頁,創(chuàng)作于2023年2月3.蛋白質的鑒定選材與制備組織樣液:豆?jié){溶液豆?jié){顯色反應2mL組織樣液雙縮脲試劑A2mL現象:無色雙縮脲試劑B3-4滴紫色或紫紅色(創(chuàng)設堿性條件)(提供Cu2+)第8頁,課件共11頁,創(chuàng)作于2023年2月蛋白質的檢測結果第9頁,課件共11頁,創(chuàng)作于2023年2月還原性糖的鑒定關鍵步驟:斐林試劑甲(0.1g/ml的NaOH溶液2ml)和乙液(0.05g/ml的CuSO4溶液2ml)先混合,再使用。現配現用。脂肪的鑒定關鍵步驟:子葉削成理想薄片。蛋白質的鑒定關鍵步驟:先加試劑A(0.1g/ml的NaOH溶液2ml),再加試劑B(0.05g/ml的CuSO4溶液3~4滴)。第10頁,課件共11頁,創(chuàng)作于2023年2月鑒定物質實驗試劑實驗現象注意事項還原性糖斐林試劑磚紅色沉淀試劑現用現配、沸水浴加熱脂肪蘇丹Ⅲ、ⅣⅢ橘黃色、Ⅳ紅色必須用顯微
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