需氧和兼性厭氧性球菌鑒定-鏈球菌屬的鑒定（微生物檢驗(yàn)課件）

第二節(jié)鏈球菌屬

(Streptococcus)一、生物學(xué)特性（一）形態(tài)與染色G+，球形或橢圓形，呈鏈狀排列，無鞭毛、無芽胞，有莢膜。一、生物學(xué)特性（二）培養(yǎng)特性條件：營養(yǎng)要求較高，多數(shù)為兼性厭氧菌，少數(shù)專性厭氧,5%CO2。液體：沉淀生長（絮狀或顆粒狀）。血液瓊脂平板：

鏈球菌在血平板上菌落特征甲鏈乙鏈丙鏈（三）生化反應(yīng)

活潑

分解多種糖類、蛋白質(zhì)、氨基酸。菊糖（-）膽汁溶菌試驗(yàn)（-）

optochin敏感試驗(yàn)（-）觸酶（-）（區(qū)別于葡萄球菌屬）（區(qū)別甲鏈與肺鏈）（四）抗原構(gòu)造１、多糖抗原（C抗原）：群特異性。２、蛋白抗原（M、T、R、S）型特異性，M蛋白抗原是與致病有關(guān)的主要物質(zhì)，引起超敏反應(yīng)。多糖抗原蛋白質(zhì)抗原核蛋白抗原鏈球菌抗原構(gòu)造模式圖莢膜（五）分類

１、按溶血情況分類：（1）甲型溶血性鏈球菌：條件致病菌。（2）乙型溶血性鏈球菌：致病力強(qiáng)，引起多種疾病。（3）丙型鏈球菌：無溶血環(huán)，不致?。?、按抗原結(jié)構(gòu)分類：按多糖抗原分群：ABCD…20群，對(duì)人致病的以A群為主。3、按對(duì)氧的需求分型：需氧菌、厭氧菌、兼性厭氧菌。（六）抵抗力不強(qiáng)，60℃30min殺死，對(duì)多種消毒劑敏感。乙鏈：對(duì)青霉素、四環(huán)素、紅霉素等敏感。肺炎鏈球菌：PRSP和多重耐藥。其他群的細(xì)菌：對(duì)青霉素耐藥頻度增加。（七）變異性肺炎鏈球菌莢膜變異：有莢膜的光滑（S）型菌有毒力，失去莢膜的粗糙（R）型毒力減低或消失。二、致病性和免疫性（一）致病物質(zhì)

1、鏈球菌溶血素（1）鏈球菌溶血素O(SLO):SLO抗體

抗鏈球菌溶血素O試驗(yàn)：協(xié)助診斷風(fēng)濕熱（>1:400)

（2）鏈球菌溶血素S(SLS)：無抗原性。2、致熱外毒素（猩紅熱毒素/紅疹毒素）3、M蛋白4、透明質(zhì)酸酶5、鏈激酶6、鏈道酶（二）所致疾病

主要由A群鏈球菌引起。

1、化膿性感染：由皮膚傷口侵入，經(jīng)呼吸道侵入，其他途徑（如產(chǎn)褥熱、蜂窩組織炎）特點(diǎn)：病灶界限不清,膿汁稀薄2．中毒性疾?。盒杉t熱。由產(chǎn)生致熱外毒素的A族鏈球菌所致的急性呼吸道傳染病。3．變態(tài)反應(yīng)性疾?。猴L(fēng)濕熱、急性腎小球腎炎

4．其他疾?。杭仔停ú菥G色）鏈球菌：引起亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎。B群、D群：正常菌群，引起呼吸道、泌尿道感染或菌血癥、敗血癥等感染。C群：咽喉炎的病原菌肺炎鏈球菌分85型，對(duì)人致病的有20多型。Ⅰ-Ⅲ型引起大葉性肺炎。還可引起胸膜炎、膿胸，、慢性支氣管炎、中耳炎、腦膜炎、敗血癥等。三、微生物學(xué)檢驗(yàn)（一）標(biāo)本采集（二）檢驗(yàn)程序（三）檢驗(yàn)方法（一）標(biāo)本采集根據(jù)病情采集標(biāo)本種類：膿液、鼻咽拭子、血液等風(fēng)濕熱查血清抗體（二）鏈球菌的檢驗(yàn)程序痰、膿、穿刺液咽拭子等腦脊液血液直接涂片染色測(cè)抗原分離培養(yǎng)增菌培養(yǎng)(5%CO2葡萄糖肉湯)血平板（5%CO2）可疑菌落鑒定試驗(yàn)初步報(bào)告血清學(xué)鑒定（分群）桿菌肽試驗(yàn)optochin膽汁溶菌試驗(yàn)其他鑒定敏感試驗(yàn)試驗(yàn)肺炎鏈球菌檢驗(yàn)程序痰、膿腦脊液血液直接涂片分離培養(yǎng)革蘭染色、美蘭染色莢膜腫脹試驗(yàn)增菌培養(yǎng)（葡萄糖肉湯、硫酸鎂肉湯）（血平板）挑選可疑菌落純培養(yǎng)初報(bào)兔血清肉湯小白鼠毒力試驗(yàn)涂片莢膜腫脹試驗(yàn)?zāi)懼芫囼?yàn)菊糖發(fā)酵Optochin試驗(yàn)藥敏試驗(yàn)報(bào)告（三）鏈球菌的檢驗(yàn)方法（1）直接鏡檢：（痰、膿、穿刺液、咽拭子等）初報(bào)：發(fā)現(xiàn)G+球菌，呈鏈狀排列

（2）分離培養(yǎng)：①血液、腦脊液肉湯增菌

②膿液、咽拭子等血平板分離（3）鑒定鏈球菌的主要試驗(yàn)：根據(jù)形態(tài)、菌落、溶血情況進(jìn)行：①桿菌肽敏感試驗(yàn)：A群敏感(d>10mm)②Optochin敏感試驗(yàn)：肺炎鏈球菌d>18mm，

d<15mm為陰性。③膽汁溶菌試驗(yàn)：肺炎鏈球菌+

④CAMP試驗(yàn)：Ｂ群無乳鏈球菌為＋

⑤PYR試驗(yàn)：A群鏈球菌陽性膽汁溶菌試驗(yàn)陽性：加入膽汁或10%去氧膽酸鈉，37℃，5-10min，激活本菌的自溶酶，出現(xiàn)溶菌現(xiàn)象。Optochin敏感試驗(yàn)陽性：取肉湯培養(yǎng)液均勻涂于血平板上用optochin紙片貼于接種區(qū)中央（或分區(qū)劃線法，紙片貼于1-2區(qū)），35℃需氧培養(yǎng)過夜，抑菌圈>18mm。⑥血清學(xué)鑒定：⑦抗O試驗(yàn)：風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、急性腎小球腎炎，效價(jià)>400為+⑧膽汁七葉苷試驗(yàn)：D群鏈球菌陽性肺炎鏈球菌與甲型溶血性鏈球菌的鑒別形態(tài)菌落血清膽汁菊糖Opto-小鼠肉湯溶菌chin毒力試驗(yàn)肺鏈甲鏈矛頭狀，稍大，濕潤渾濁++++成雙，扁平，有莢膜臍窩狀圓形，較小，稍干，沉淀—

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—無莢膜圓，凸起（四）結(jié)