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第5章細(xì)菌的遺傳與變異目的要求1.掌握:細(xì)菌的遺傳物質(zhì);插入序列、轉(zhuǎn)座子的概念;細(xì)菌的基因轉(zhuǎn)移和重組的幾種方式(轉(zhuǎn)化、接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)、溶原性轉(zhuǎn)換、原生質(zhì)體融合)的概念和機(jī)制;2.熟悉:遺傳變異的原理;細(xì)菌的變異現(xiàn)象。3.了解:細(xì)菌基因突變的規(guī)律;遺傳變異在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。細(xì)菌染色體質(zhì)粒噬菌體轉(zhuǎn)座子整合子插入序列第一節(jié)細(xì)菌基因組主要成分主要的特殊結(jié)構(gòu)1.細(xì)菌染色體(bacterialchromosome):為一條環(huán)狀雙螺旋的DNA分子組成的細(xì)菌染色體相對聚集在一起,形成一個較為致密的區(qū)域,稱為類核(nucleoid)。共價閉合環(huán)狀雙股螺旋DNA,類核折疊盤旋成松散網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),裸露于胞質(zhì)內(nèi),無核膜包裹不含有組蛋白無內(nèi)含子,轉(zhuǎn)錄后無需剪切染色體上的耐藥基因(drugresistancegene)和致病島(pathogenicityisland)的存在,反映了細(xì)菌種內(nèi)和種間存在廣泛的遺傳交換致病島:致病菌染色體上編碼與毒力相關(guān)基因的外源DNA片段,是分子量較大(20~100kb)的基因群。細(xì)菌染色體噬菌體基因組(bacteriophage)溫和噬菌體—前噬菌體插入序列(insertionsequence,IS)是最小的轉(zhuǎn)位因子,<2kb不攜帶任何已知與插入功能無關(guān)的基因區(qū)域兩側(cè)末端有反向重復(fù)序列能介導(dǎo)高頻重組菌株的形成轉(zhuǎn)座子(transposon,Tn)>2kb,除攜帶與轉(zhuǎn)位有關(guān)的基因外,還攜帶耐藥性基因、抗金屬基因、毒素基因及其他結(jié)構(gòu)基因??赡芘c細(xì)菌的多重耐藥性有關(guān)。整合子(Integron,In)是一種可以動的DNA分子,具有獨(dú)特結(jié)構(gòu)看捕獲和整合外源性基因,是之轉(zhuǎn)變?yōu)楣δ苄曰虻谋磉_(dá)單位,可通過轉(zhuǎn)座子或接合性質(zhì)粒,使多種耐藥基因在細(xì)菌中進(jìn)行水平傳播。第二節(jié)細(xì)菌基因突變突變(mutation):是細(xì)菌遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)(核苷酸序列)發(fā)生突然而穩(wěn)定的改變,導(dǎo)致細(xì)菌性狀的遺傳性改變(突變型)。點(diǎn)突變(又稱為小突變):細(xì)菌DNA上核苷酸序列的改變,僅為一個或幾個堿基的置換、插入、丟失。單點(diǎn)突變;多點(diǎn)突變?nèi)旧w畸變(大突變):染色體重排、倒位、重復(fù)、缺失一、基因突變規(guī)律可以自發(fā)突變,也可以誘發(fā)突變突變率:指細(xì)菌生長時發(fā)生突變的頻率。自發(fā)突變率:10-9~10-6誘發(fā)突變率:10-6~10-4(10~1000倍)突變與選擇回復(fù)突變與抑制突變正向突變:野生型→突變型回復(fù)突變(表型):突變株→野生株(第二次抑制突變后)二、突變型細(xì)菌及其分離抗性突變型:耐藥性突變營養(yǎng)缺陷突變型條件致死性突變型:溫度敏感突變株發(fā)酵陰性突變型第三節(jié)、基因的轉(zhuǎn)移和重組ABCD供體菌供體菌DNA片段受體菌供體DNA受體DNADNA接合蛋白細(xì)菌的轉(zhuǎn)化F+F-F+F-F+F+F+F+F質(zhì)粒接合通過性菌毛的接觸溝通將接合性質(zhì)粒從供菌轉(zhuǎn)移到受菌。DonorRecipientF質(zhì)粒的接合高頻重組株(Hfr)Hfr接合F’質(zhì)粒:Hfr菌中的F質(zhì)粒有時會從染色體上脫離,終止Hfr狀態(tài),從染色體上脫離的F質(zhì)粒還會攜帶有相鄰染色體DNA片段,稱為F’質(zhì)粒ACDB轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction)由噬菌體介導(dǎo),將供菌的DNA片段轉(zhuǎn)入受菌,使受菌獲得供菌的部分遺傳性狀。分為普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)和局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)1、在噬菌體成熟裝配過程中,誤將宿主(供菌)染色體片段或質(zhì)粒片段裝入噬菌體內(nèi),產(chǎn)生轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體。當(dāng)它感染其他菌時,便將供菌DNA轉(zhuǎn)入受菌。2、任何供菌DNA片段都有可能被誤裝入噬菌體內(nèi),故成為普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)。3、毒性噬菌體和溫和噬菌體都能介導(dǎo)普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)。普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)供體菌受體菌普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)結(jié)局轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體完全轉(zhuǎn)導(dǎo)流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)1、進(jìn)入溶原期的溫和噬菌體,以前噬菌體形式整合在細(xì)菌染色體的某一位置,當(dāng)其自發(fā)或經(jīng)誘導(dǎo)中止溶原狀態(tài),前噬菌體脫離細(xì)菌染色體時,脫離的前噬菌體基因攜帶出與它緊密連鎖的細(xì)菌的DNA片斷,使受體菌獲得供體菌的某種遺傳性狀的過程。2、所轉(zhuǎn)導(dǎo)的只限于供體菌染色體上特定的基因。如λ噬菌體進(jìn)入大腸埃希菌。局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)12溶原性轉(zhuǎn)換(lysogenicconversion)在溫和噬菌體的溶原期,因前噬菌體與細(xì)菌染色體整合而導(dǎo)致細(xì)菌基因型發(fā)生改變而獲得新的性狀。無毒的白喉桿菌感染了β-棒狀桿菌噬菌體后變成了產(chǎn)毒的白喉桿菌。五、原生質(zhì)體融合(protoplastfusion)人工將兩種不同的細(xì)菌經(jīng)溶菌酶或青霉素等處理,失去細(xì)胞壁成為原生質(zhì)體后進(jìn)行相互融合的過程。融合劑:PEG(聚乙二醇)應(yīng)用:基因轉(zhuǎn)輸、實(shí)驗工具第四節(jié)細(xì)菌遺傳變異的實(shí)際意義在疾病的診斷、治療與預(yù)防中的應(yīng)用在測定致癌物質(zhì)中的應(yīng)用在流行病學(xué)中的應(yīng)用在基因工程中的應(yīng)用目的基因(從生物體細(xì)胞基因組中制備的DNA片段)載體(質(zhì)粒、噬菌體)重組DNA分子工程菌(大腸埃希菌、酵母菌)目的基因產(chǎn)物:胰島素、干擾素、生長因子、白細(xì)胞介素、乙肝疫苗等
連接酶轉(zhuǎn)移人工培養(yǎng)基因工程方面的應(yīng)用思考題一、名詞解釋1.接合(conjugation)
2.轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction)3.轉(zhuǎn)化(transformation)二、簡答題1.舉例說明細(xì)菌變異類型。2.簡述F+菌、F-菌、Hfr菌和F’菌的區(qū)別3.簡述質(zhì)粒的概念及主要特性。4.簡述普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)與局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)的區(qū)別。5.何謂彷徨試驗?意義如何?6.何謂影印培養(yǎng)試驗?意義如何?1、字體安裝與設(shè)置如果您對PPT模板中的字體風(fēng)格不滿意,可進(jìn)行批量替換,一次性更改各頁面字體。在“開始”選項卡中,點(diǎn)擊“替換”按鈕右側(cè)箭頭,選擇“替換字體”。(如下圖)在圖“替換”下拉列表中選擇要更改字體。(如下圖)在“替換為”下拉列表中選擇替換字體。點(diǎn)擊“替換”按鈕,完成。462、替換模板中的圖片模板中的圖片展示頁面,您可以根據(jù)需要替換這些圖片,
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