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液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用的原理及應(yīng)用中心實(shí)驗(yàn)室簡介色譜質(zhì)譜的在線聯(lián)用將色譜的分離能力與質(zhì)譜的定性功能結(jié)合起來,實(shí)現(xiàn)對復(fù)雜混合物更準(zhǔn)確的定量和定性分析。而且也簡化了樣品的前處理過程,使樣品分析更簡便。色譜質(zhì)譜聯(lián)用包括氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(GCMS)和液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS),液質(zhì)聯(lián)用與氣質(zhì)聯(lián)用互為補(bǔ)充,分析不同性質(zhì)的化合物。液質(zhì)聯(lián)用與氣質(zhì)聯(lián)用的區(qū)別:氣質(zhì)聯(lián)用儀(GC-MS)是最早商品化的聯(lián)用儀器,適宜分析小分子、易揮發(fā)、熱穩(wěn)定、能氣化的化合物;用電子轟擊方式(E|)得到的譜圖可與標(biāo)準(zhǔn)譜庫對比液質(zhì)聯(lián)用(LCMS)主要可解決如下幾方面的問題:不揮發(fā)性化合物分析測定;極性化合物的分析測定;熱不穩(wěn)定化合物的分析測定;大分子量化合物(包括蛋白、多肽、多聚物等)的分析測定;沒有商品化的譜庫可對比查詢,只能自己建庫或自己解析譜圖。lonieIonSprayAPCIGCMS103MolecularWeight現(xiàn)代有機(jī)和生物質(zhì)譜進(jìn)展在20世紀(jì)80及90年代,質(zhì)譜法經(jīng)歷了兩次飛躍在此之前,質(zhì)譜法通常只能測定分子量500Da以下的小分子化合物。20世紀(jì)70年代,出現(xiàn)了場解吸(FD)離子化技術(shù),能夠測定分子量高達(dá)1500~2000Da的非揮發(fā)性化合物,但重復(fù)性差20世紀(jì)80年代初發(fā)明了快原子質(zhì)譜法(FABMS),能夠分析分子量達(dá)數(shù)千的多肽■隨著生命科學(xué)的發(fā)展,欲分析的樣品更加復(fù)雜,分子量范圍也更大,因此,電噴霧離子化質(zhì)譜法(ES|-MS)和基質(zhì)輔助激光解吸離子化質(zhì)譜法(MALD-MS)應(yīng)運(yùn)而生?!瞿壳暗挠袡C(jī)質(zhì)譜和生物質(zhì)譜儀,除了GCMS的E和C|源,離子化方式有大氣壓電離(AP|)(包括大氣壓電噴霧電離ES|、大氣壓化學(xué)電離APC|、大氣壓光電離APP)與基質(zhì)輔助激光解吸電離。前者常采用四極桿或離子阱質(zhì)量分析器,統(tǒng)稱AP|-MS。后者常用飛行時(shí)間作為質(zhì)量分析器,所構(gòu)成的儀器稱為基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜儀(MALDTOF-MS)。AP|-MS的特點(diǎn)是可以和液相色譜、毛細(xì)管電泳等分離手段聯(lián)用,擴(kuò)展了應(yīng)用范圍,包括藥物代謝、臨床和法醫(yī)學(xué)、環(huán)境分析、食品檢驗(yàn)、組合化學(xué)、有機(jī)化學(xué)的應(yīng)用等;MALD|TOF-MS的特點(diǎn)是對鹽和添加物的耐受能力高,且測樣速度快,操作簡單。質(zhì)譜原理簡介:質(zhì)譜分析是先將物質(zhì)離子化,按離子的質(zhì)荷比分離,然后測量各種離子譜峰的強(qiáng)度而實(shí)現(xiàn)分析目的的一種分析方法。以檢測器檢測到的離子信號強(qiáng)度為縱坐標(biāo),離子質(zhì)荷比為橫坐標(biāo)所作的條狀圖就是我們常見的質(zhì)譜圖?!鉊eviceAfromp1,moh叭4tmTime,min-Q1:3.30min(14scans)tromptl,subtracted(scans9to14),subtracted(ecans9to14),eantroldnd255cp57726.0●4865.3505.81148.7LIlithHuh常見術(shù)語:質(zhì)荷比:離子質(zhì)量(以相對原子量單位計(jì))與它所帶電荷(以電子電量為單位計(jì))的比值,寫作m/z峰:質(zhì)譜圖中的離子信號通常稱為離子峰或簡稱峰離子豐度:檢測器檢測到的離子信號強(qiáng)度基峰:在質(zhì)譜圖中,指定質(zhì)荷比范圍內(nèi)強(qiáng)度最大的離子峰稱作基峰.總離子流圖;質(zhì)量色譜圖
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