食用菌組織分離制母種

食用菌組織分離制母種第1頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)訓(xùn)第一大部分講解及演示指導(dǎo)老師王德芝第2頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月食用菌味道鮮美風(fēng)味獨(dú)特下面請(qǐng)同學(xué)們欣賞幾道美味的菜肴第3頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月菇香美味迎客來(lái)第4頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月花好月圓蘑菇香第5頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月香菇招來(lái)蝶戀花第6頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月金針系珠相思豆第7頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月團(tuán)團(tuán)圓圓蘑菇圈第8頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月龍鳳呈祥猴頭宴第9頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月銀耳黑耳齊爭(zhēng)艷第10頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月蘑菇全席大師宴第11頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月味道鮮美君品嘗第12頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月食用菌保健酒及飲料系列第13頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第14頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月食用及藥用菌的藥用提取物第15頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月好樹結(jié)好果,好種出好菇!美味的食用菌及珍貴的藥用菌需要好菌種!組織分離制母種第16頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月你了解嗎?噢菌種很重要！母種

原種

栽培種食用菌的栽培子實(shí)體(菇體)第17頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

實(shí)訓(xùn)內(nèi)容母種培養(yǎng)基的配制

及組織分離接種（一）實(shí)訓(xùn)目的（二）實(shí)訓(xùn)原理（三）實(shí)訓(xùn)設(shè)計(jì)思路（四）實(shí)訓(xùn)器材（五）實(shí)訓(xùn)步驟（六）注意事項(xiàng)（七）實(shí)驗(yàn)作業(yè)第18頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（一）實(shí)訓(xùn)目的1.掌握母種培養(yǎng)基的配制操作及高壓滅菌方法;

2.理解組織分離法制母種的原理;3.掌握組織分離接種技術(shù);4.會(huì)使用超凈工作臺(tái)和培養(yǎng)箱.第19頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（二）實(shí)訓(xùn)原理組織分離法是利用子實(shí)體組織來(lái)分離獲得純菌絲的方法。組織分離系一種無(wú)性繁殖法，雙親的染色體沒有經(jīng)過重組，因此組織分離基本上可保持親本的生物學(xué)特性，優(yōu)良菌株用組織分離法能使遺傳特性穩(wěn)定下來(lái)。該法操作簡(jiǎn)便，取材廣泛，菌絲生長(zhǎng)發(fā)育快，比較常用。

第20頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)訓(xùn)設(shè)計(jì)思路1.

母種培養(yǎng)基的成分不同對(duì)菌絲生長(zhǎng)有什么影響；2.組織分離選用的材料及分離的部位不同有什么影響；3.培養(yǎng)溫度不同有什么影響；4.雜菌污染的原因第21頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（三）實(shí)訓(xùn)器材

新鮮菇(耳)體、刀片、鑷子或接種針試管斜面培養(yǎng)基接種箱或超凈工作臺(tái)、無(wú)菌室、酒精燈、75%酒精及酒精棉球等培養(yǎng)箱等。

第22頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月復(fù)習(xí)上一節(jié)

母種培養(yǎng)基的配制步驟1.按配方稱量：見下面的配方2.煮制3.分裝4.滅菌5.排斜面第23頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月母種培養(yǎng)基配方：

1.土豆200g、糖20g、瓊脂20g、水1000ml2.去皮馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g、水1000ml、PH值自然，另外添加：麩皮20g、玉米面5g或黃豆粉5g、磷酸二氫鉀2g，硫酸鎂2g，VB11片（10mg）。此配方適用于大多數(shù)菌種，金針菇、黑木耳、靈芝生長(zhǎng)尤其茁壯?？勺骱谀径⑾愎降膹?fù)壯培養(yǎng)基，效果顯著。第24頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第25頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)基的高壓滅菌使用高壓蒸汽滅菌鍋應(yīng)注意的事項(xiàng)？（提問同學(xué)）(1)鍋內(nèi)裝物品不應(yīng)過緊；(2)注意排出冷氣，否則不能保證滅菌效果；(3)加熱排冷氣后，使溫度達(dá)到121.3℃，壓力在0.1－0.15MPa之間維持30min；

(4)不耐高熱高壓之物品，不能用此法滅菌。第26頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（四）組織分離操作的主要步驟：

①挑選種菇：挑選生長(zhǎng)健壯，菌齡適中，無(wú)病蟲害，具有本品種優(yōu)良性狀的菇體或組織作為種菇。②環(huán)境、用具嚴(yán)格消毒：即超凈工作臺(tái)或無(wú)菌室的使用，形成無(wú)菌的環(huán)境。第27頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月超凈工作臺(tái)的使用

超凈臺(tái)可將空氣通過由特制的微孔的“超級(jí)濾清器”后吹送出來(lái)，形成連續(xù)不斷的無(wú)塵無(wú)菌的超凈空氣層流，即所謂“高效的特殊空氣”，它除去了大于0.3μm的塵埃、真菌和細(xì)菌孢子等等。工作人員就在這樣的無(wú)菌條件下操作，保持無(wú)菌材料在轉(zhuǎn)移接種過程中不受污染。第28頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月超凈工作臺(tái)⑴

使用注意事項(xiàng)（提問同學(xué)）①提前接通電源，開啟紫外線殺菌燈，30分鐘后關(guān)閉殺菌燈；②然后開啟日光燈、風(fēng)機(jī)，20分鐘后方可進(jìn)行操作。第29頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月組織分離操作③菇體消毒：將子實(shí)體菌柄基部切除，置接種箱內(nèi)，在無(wú)菌箱內(nèi)以0.1％的升汞水浸幾分鐘，再用無(wú)菌水沖洗并揩干，或用75％酒精棉球擦拭菌蓋與菌柄2次，進(jìn)行表面消毒。第30頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月組織分離部位的選擇菌肉組織如圖菌核組織如圖第31頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第32頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月示范操作④組織分離：解剖刀經(jīng)火焰滅菌，在菇柄中部縱切一刀，用手掰開菌再用刀片在菇蓋與菇柄交界處切取黃豆大小的小方塊。⑤接種：在無(wú)菌條件下，隨后挑取一組織小塊，迅速移接到PDA斜面培養(yǎng)基上，并塞好棉塞。

第33頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月示范操作⑥貼標(biāo)簽培養(yǎng)：試管從接種箱取出之前，應(yīng)逐支試管正面的上方貼上標(biāo)簽，寫明菌種編號(hào)、接種日期，隨后把試管放入培養(yǎng)箱（室）中，置適宜溫度（平菇22℃，香菇25℃）下培養(yǎng)，待組織塊長(zhǎng)出菌絲無(wú)污染即為純種。第34頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)置于適宜溫度下培養(yǎng)3-5天，就可以看到組織上產(chǎn)生白色絨毛狀菌絲，轉(zhuǎn)管擴(kuò)大即得到菌種。如香菇、平菇、雙孢菇、草菇、猴頭菌等多采用此方法。附：數(shù)顯式恒溫培養(yǎng)箱的使用第35頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月數(shù)顯式恒溫培養(yǎng)箱的使用培養(yǎng)箱是通過對(duì)周圍環(huán)境條件的控制制造出一個(gè)能使細(xì)胞、組織更好地生長(zhǎng)的環(huán)境，條件控制的結(jié)果就會(huì)形成一個(gè)穩(wěn)定的條件①調(diào)節(jié)適宜溫度，并使溫度穩(wěn)定，再放培養(yǎng)物;②培養(yǎng)過程中要觀察溫度穩(wěn)定性和生長(zhǎng)狀態(tài)，并注意培養(yǎng)時(shí)間；第36頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月注意③培養(yǎng)終止，關(guān)掉電源，取出培養(yǎng)物；④培養(yǎng)箱的環(huán)境應(yīng)清潔整齊，干燥通風(fēng)；保持培養(yǎng)箱內(nèi)空氣干凈，并定期消毒；第37頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)訓(xùn)第二大部分學(xué)生分組操作第38頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月分組操作每班同學(xué)可分為二大組6小組；第一大組3臺(tái)雙人超凈工作臺(tái)，每次可6人操作；第二大組可在無(wú)菌室內(nèi)操作；第一大組采用菌蓋與菌柄交界處組織進(jìn)行分離，第二大組采用菌蓋帶菌褶部分進(jìn)行組織分離，作對(duì)比觀察。第39頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月分組輔導(dǎo)注意同學(xué)們的操作；及時(shí)糾正不規(guī)范動(dòng)作。接種操作完畢，收集試管進(jìn)行培養(yǎng)。第40頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月數(shù)顯式恒溫培養(yǎng)箱的使用注意事項(xiàng)（提問同學(xué)）第41頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)訓(xùn)第三大部分結(jié)果觀察第42頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月母種培養(yǎng)生長(zhǎng)狀態(tài)觀察母種培養(yǎng)生長(zhǎng)狀態(tài)可分4種情況.1.菌絲已萌發(fā)，生長(zhǎng)旺，無(wú)污染(如圖所示)；2.菌絲已萌發(fā)，但有雜菌污染；3.菌絲未萌發(fā)，無(wú)污染；4.菌絲未萌發(fā)，且雜菌污染嚴(yán)重；第43頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月原因分析1.菌絲未萌發(fā)：①組織塊太小②燙傷嚴(yán)重③培養(yǎng)條件如溫度不適宜。2.有雜菌污染：①培養(yǎng)基滅菌不徹底；②培養(yǎng)基成分適宜雜菌生長(zhǎng)；③環(huán)境、用具消毒不嚴(yán)格；④菇體耳體消毒不嚴(yán)格；⑤接種操作控制不當(dāng)，要無(wú)菌操作。第44頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月常見的雜菌觀察常見的雜菌主要有細(xì)菌、放線菌；第45頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月常見的雜菌觀察細(xì)菌、霉菌等。第46頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月常見的雜菌觀察青霉、黑曲霉第47頁(yè)，課件共50頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（五）組織分離制母種應(yīng)注意的事項(xiàng)

（提問同學(xué)）

環(huán)境用具嚴(yán)格消毒；組織小塊大小要適宜(