第節(jié)基因工程的基本操作程序

1.2基因工程的基本操作程序基因工程基本操作的四個步驟1、目的基因的獲取2、基因表達載體的構(gòu)建3、目的基因?qū)胧荏w細胞4、目的基因的檢測與鑒定有了目的基因，我們才能賦予一種生物以另一種生物的遺傳特性。使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并可進行遺傳、表達和發(fā)揮作用

載體進入受體細胞穩(wěn)定表達，才能實現(xiàn)一種生物的基因在另一種生物中的轉(zhuǎn)化。

才能確定目的基因是否真正在受體細胞中穩(wěn)定遺傳和正確表達。一、目的基因的獲取1目的基因主要是編碼蛋白質(zhì)的基因：如：與生物抗性相關(guān)的基因、與優(yōu)良品質(zhì)相關(guān)的基因、與生物藥物和保健品相關(guān)的基因、與毒物降解相關(guān)的基因、與工業(yè)用酶相關(guān)的基因、具調(diào)控作用的因子等。2獲取目的基因的常用方法：1、從基因文庫中獲取2、利用PCR技術(shù)擴增3、人工合成1摩.從休基駐因夸文包庫扒中只獲佩取監(jiān)目盒的本基隊因1蜓.基卵因爸文臭庫霉的帥概碗念:將艱含執(zhí)有披某犯種梢生損物忌不主同汗基滋因納的隱許源多D冊N枯A片拌斷棉，愿導(dǎo)割入群到住受傾體基菌優(yōu)的群瞞體口中址，妙各碎個瓣受逐體告菌渾分除別芽含吊有困這邀種段生酒物掘的崗不畏同鼠基闊因瓜。2母.基溉因減文勇庫反的損種跪類:基仙因湯組禁文碌庫陜：含距有托一探種驢生滿物疊的全憑部基煩因部容分耀基英因輝文宴庫高：只驚包浮含腦了豬一赤種坦生屯物逆的部秒分基逃因彼，如衣：c年D鄉(xiāng)豐N誰A文傭庫3元.基肢因聽文柄庫聞的哪目外的子：為青了嘗在不撫知目五的還基陳因寨序先列炎的己情辰?jīng)r梢下并，秤便頸于沈獲確得虜所剪需篇的棟目經(jīng)的抵基障因闖?；胍蛩俳MD彼N蹲A文屈庫晉與c智D多N刻A文辜庫某應(yīng)生蟻物許體瘡內(nèi)侵全萌部D割N吼A許臨多D災(zāi)N屑A片威段受碼體喊菌箭群驗體限制酶與憑運秤載售體迅連華接粒導(dǎo)爺入基愚因桶組賄文白庫c竟D接N結(jié)A反轉(zhuǎn)錄受樣體仗菌漢群疤體與聞運垮載炭體蜘連刮接泳導(dǎo)跡入c鉆D輕N很A文川庫某寒種把生女物捆某湖個間時耀期返的m運R男N奏A基駐因水的逢結(jié)志構(gòu)非黎編蚊碼怎區(qū)非荒編截碼除區(qū)編紀碼諒區(qū)R霉N艦A聚夢合乎酶嫂結(jié)把合恢位喜點外懲顯急子內(nèi)然含旺子終拘止錦子啟反動坦子原惹核真熊核原衰核扎細廚胞妻的襯基基因鐘結(jié)所構(gòu)非場編形碼漆區(qū)非牙編唉碼君區(qū)編詢碼量區(qū)編豈碼旱區(qū)悲上獄游編筆碼誘區(qū)價下璃游與R喂N仆A聚鐘合觀酶帖結(jié)吳合登位弟點啟肚動灶子終捆止趁子①不盡編稿碼腿蛋噸白谷質(zhì)鄰。：槽編挑碼漢蛋崇白猴質(zhì),連霧續(xù)吐不剃間餡斷編封碼稈區(qū)非皮編誘碼燙區(qū)②調(diào)絕控頭遺瞞傳條信正息濁表礎(chǔ)達,上游舒的R借N狂A聚陷合嗽酶訂結(jié)州合湯位族點:基饞因挎結(jié)約構(gòu)真遺核鞋細遮胞泄的初基惹因叨結(jié)俗構(gòu)編運碼弦區(qū)非譽編粥碼者區(qū)非茄編封碼涉區(qū)內(nèi)煤含烤子外林顯稿子啟痛動割子終馬止訓(xùn)子編序碼板區(qū)旬上毒游編篩碼懸區(qū)赴下告游編違碼宇區(qū)非爹編慣碼變區(qū)外翠顯窮子私：趟能纖編泛碼耗蛋紙白哭質(zhì)胳的餅序定列內(nèi)擋含理子中：譜不僑能饞編暮碼疑蛋魔白陸質(zhì)葵的泥序賞列：帆有舞調(diào)惠控華作鞋用,上兩游悶有R永N寬A聚她合狼酶樓結(jié)楊合換位褲點(啟拆動固子)。與R乖N宋A聚臘合紋酶勝結(jié)職合沫位地點基延因凳結(jié)守構(gòu)原貫核驚細貓胞擴與貪真回核獻細五胞凝的青基阻因挖結(jié)使構(gòu)窗比樂較原核細胞真核細胞不同點編碼區(qū)是_____的編碼區(qū)是間隔的、_____的相同點都由能夠編碼蛋白質(zhì)的______和具有調(diào)控作用的______區(qū)組成的編興碼獄相仁同階數(shù)雪目艇氨編基擋酸悲的鼓蛋俗白箏質(zhì)妨，吩原盤核晴細差胞泛與魯真訂核云細口胞考基鳥因戴結(jié)姨構(gòu)爸一筆樣遵長碗嗎匙？連念續(xù)不豆連斗續(xù)編驚碼撒區(qū)非紐奉編誼碼思考基辟因腹文臟庫叨的蜻構(gòu)謠建腔方嫂法①基踐因爽組煙文怠庫專的嬸構(gòu)雅建提果取鬼某棕種鳳生應(yīng)物摟的全她部D見N乞A用剃適引當(dāng)池的義限煩制使酶植酶慰切一壁定期大乎小伸的D拆N傾A片略段將D誘N冶A片剪段廟與擠載償體機連佩接重圈組潤載膜體基冷因裙組脫文赴庫導(dǎo)釘入卷受密體嫌菌壯中境儲抄存②c翠D仙N撿A文酬庫浸的向構(gòu)壘建-秒-階-漠-虎-逆皮轉(zhuǎn)里錄撞法為：提巡壽取嘉某趨種源生缺物畢的牧某猶器歡官表或特錘定發(fā)翠育賣時丈期方的m畢R剃N罪A單勢鏈D筍N熱A雙胞鏈D銹N旺A片門段重譽組紹載宋體與夜載楊體哄連攀接c著D敵N略A文溜庫反傅（似逆夠）括轉(zhuǎn)寄錄殃酶D魚N棵A聚窩合乎酶導(dǎo)坑入猶受靈體蒜菌呆中距儲不存思逆考偵？真需核思生狠物原的奧基臉因善用逆堅轉(zhuǎn)墓錄隔法得此到倡的c呼D贏N邁A與酸原滅基中因走相狀同筍嗎酸？真亞核搶細有胞住的c母D樂N招A的烈獲毅取編博碼往區(qū)非辱編狠碼堤區(qū)非吊編些碼六區(qū)D慰N證A聚臟合岸酶剪叮接輪有種關(guān)靜的欣酶R背N宮A聚魂合考酶m澡R渾N娃A前黨體m評R么N窩A單隆鏈D鐘N游A雙的鏈D炸N膨A逆濤轉(zhuǎn)這錄海酶轉(zhuǎn)廚錄剪早接逆腦轉(zhuǎn)狐錄復(fù)融制啟企動院子終鬧止陸子基企因不慨含非戲編禍碼紛序些列。淘即誓不偷含非純編途碼底區(qū)和內(nèi)贊含筒子基榜因兄組D反N污A文包庫礎(chǔ)與c及D技N李A(yù)文寒庫換的番比雀較

文庫類型cDNA文庫

基因組文庫

文庫大小基因中啟動子（具有啟動作用的DNA片段）基因中內(nèi)含子(位于編碼蛋白質(zhì)序列的非編碼DNA片段）

基因多少

物種間的基因交流小大無有無有某媽種誘生丟物常的城部弓分救基僵因某墨種引生懷物渴的芹全癢部沃基約因可候以部柴分旺基夸因訂可叼以2屬.利張用P銳C柱R技惰術(shù)卸擴病增沃目揪的鈔基感因1概念：PCR全稱為_______________，是一項在生物____復(fù)制___________的核酸合成技術(shù)。2原理：DNA復(fù)制原料：模板DNA；DNA引物；四種脫氧核苷酸；熱穩(wěn)定DNA聚合酶多君聚參酶摸鏈宮式濫反巷應(yīng)體糕外特蛾定D貴N宏A片符段3前提：已知目的基因的一段核苷酸序列P庸C券R技屈術(shù)卻的窄操求作恥過溝程a、D介N淘A變汽性（9蒙0親℃闖-信9鄉(xiāng)豐5?！妫┎桑何针p洞鏈D關(guān)N在A模愚板磚在六熱惕作咳用囑下半，_仇_挺_乒_悄_斷并裂虛，誼形酸成_旅_喘_肺_植_泄_滋_奏_b、否退蓋火（復(fù)搏性5幼5盞℃妨-資6繪5音℃）釀：閥系多統(tǒng)白溫顫度值降謙低得，引益物與D握N讀A模繪板共結(jié)辨合坊，珍形愚成趨局意部_元_咱_業(yè)_未_銳_汪_面_。c、糊延暮伸（7艱0肝℃哨-液7湯5凱℃）騰：稈在T憑a蕉q酶的胡作勾用打下糠，援合唐成紋與浙模類板附互挺補梯的_鞋_足_忍_接_座_絡(luò)_園_。氫栽鍵單呀鏈D局N和A雙司鏈D坑N筍A鏈d嫂.重肺復(fù)a供.頭b敲.攜c步印驟崗：疊每缺重崖復(fù)動一皂次傭，亞目探的眼基服因致增利加_缸_琴_倍一P狀C寒R技方術(shù)決的議操矩作虛過能程P窗C老R技娛術(shù)圾的詳操憑作枯過充程P葡C透R反吧應(yīng)浩體堡系刺中踩目彎的滿基謝因工成指喬數(shù)(剝2n)形蝕式植擴抖增P誰C哀R技址術(shù)危擴治增崗與D定N牽A復(fù)蛇制帥的框比企較DNA復(fù)制PCR技術(shù)場所原理條件解旋方式酶特點結(jié)果堿廁基使互懂補脈配剝對逮原須則堿鐘基野互厚補板配冤對宵原沸則四討種繡脫戴氧還核孤苷旗酸萍、悔模移板鈴、躲酶臟、A俗T增P四升種刻脫默氧才核梢苷牽酸序、您模凈板吹、敢酶捎、引笑物D拌N屬A在攏高山溫啄下宰變羊性交解雖旋解感旋千酶無催摸化閘解皂旋半櫻保案留債復(fù)封制灘、邊狀解豪旋丙邊劇復(fù)社制半曾保劃留攪復(fù)龜制摸、全親解諷旋敗再適復(fù)裙制體射外持復(fù)樹制主配要記在面細額胞殖核太內(nèi)大壩量壇的D初N圣A片座段形愚成營整毯個D棍N屈A分傻子熱繭穩(wěn)棵定刷的D貍N搜A聚珍合廚酶細辦胞喂內(nèi)框的D促N泰A聚飾合想酶嬌、迅解鵲旋題酶宰等3刷.人輸工很合輕成時法在基散因過較李小格，者核退苷拌酸液序深列蓬已尋知的抹情竹況區(qū)下疾，跳可烘以齒利腳用D卸N話A合霞成鄉(xiāng)豐儀攤?cè)私泄ど缀鲜獬傻颁z白獨質(zhì)楚的臥氨烏基物酸佳序扇列m音R改N臉A的出核秒苷仿酸鉆序喚列基恥因俊的危核胃苷介酸版序肅列目嗚的遣基庭因化拾學(xué)念合阿成推爆測推胃測思勸考跳：化塔學(xué)慣法齡合麗成書的乓目半的舌基北因堅含內(nèi)妙含磨子掉、籍啟些動錦子濁和鴨終籮止膠子嗎離？人關(guān)工刮合屠成劉法（真高核起生交物）反湖轉(zhuǎn)似錄注法目方的隔基瓶因摸的偵信謹使R披N碎A目拉的忠基餅因化塘學(xué)漲合利成欲法肽宵鏈蛛氨任基喂酸跟序沉列信授使R憑N莖A序似列基獎因蘇的愛核昂苷屑酸拿序圓列目神的再基搞因合種成推武測推盞測單滾鏈D礎(chǔ)N扛A合帆成課焦堂呆小珠結(jié)目辱的使基笑因第的側(cè)獲豆取1、輸從譜基倘因用文話庫開中膽獲概取2、鉗利置用P屑C務(wù)R技滿術(shù)拖擴狗增3、憐人爹工斑合鄰成種女類基司因鏡組渾文徑庫軟：含栗有那一伯種乖生襲物惹的全繭部基擦因部俱分耕基歪因啟文貍庫怎：只生包雙含暖了耕一初種仙生吉物侮的部允分基蛇因劑，如謎：c昏D轎N閉A文犬庫二確、澤基傲因溝表甘達國載考體伐的勸構(gòu)青建—嘩—基盆因洞工口程憐的柜核汁心1目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。2基因表達載體的組成：復(fù)制原點+目的基因+啟動子+終止子+標記基因表侵達吸載芒體啟芒動什子勿：位撈于府基激因押的延首輪端零的盲一漫段離特牌殊宋的D吹N隸A片貸斷挑，扒它箱是R突N義A聚僵合碎酶撥識萌別抗和餓結(jié)拆合邀的古部搏位，蛾有旨了般它鹿才扒能驅(qū)艱動厚基孩因殺轉(zhuǎn)樹錄羞出m售R初N棗A，最償終共獲月得抄蛋篩白因質(zhì)終紐奉止聚子地：位撲于鞋基第因盆的長尾迅端創(chuàng)的枕一消段鞠特石殊逝的D然N朗A片威斷倦，能琴終域止m漏R篩N從A的紀轉(zhuǎn)遵錄標哲記銀基窄因的級作煩用外是為贈了鑒殖別受丟體嗽細銷胞陰中溉是沙否糞含虛有括目璃的架基鑒因狠，想從粘而扮將濕有著目拔的輕基旋因妥的新細繭胞拍篩夢選瞞出巡壽來基拿因叨表偷達銅載方體彈的票構(gòu)搏建帖過陣程質(zhì)陪粒D測N秘A分辮子限藝制捉酶某處領(lǐng)理兩僑個獵切及口獲蒸得勞目偉的掃基點因D殘N劑A連作接繡酶重嘗組D叢N丹A分去子羅（忠重碼組菌質(zhì)偉粒眨）同平一促種一動個昨切申口兩抹個享黏日性努末村端注堅意彎：①載樹體與表頂達棕載樣體的吼區(qū)藏別泄：腐二網(wǎng)者膜都各有按標攀記邊基敢因炸和砍復(fù)咐制物原蓬點怒兩寒部攪分D燃N耗A片辭段街。弟表貝達宴載蘋體臥在竿載濃體壤基健礎(chǔ)娛上奔增陰加伏了目陡的俯基替因須、姜啟褲動岡子籍、目終土止診子三黎部復(fù)分泥結(jié)糧構(gòu)②用匙到同的否工懂具別酶如：既須用冤到寫限柴制黎酶謠切復(fù)割航載籍體菌，秤又墊用餅到D期N接A連獸接奮酶釘將勝目井的絨基咐因途和波載優(yōu)體劃拼捎接少，舊兩田種住酶柱作慨用漠的傳化果學(xué)毯鍵飽都問是充磷滑酸隨二紗酯祥鍵③啟斗動經(jīng)子狂、窯終頓止續(xù)子對楚于切目弟的姐基他因檢表遭達欣必書不枕可廢少④目搭的徹基久因倦不宗能楊單箱獨商進賢入欣受洽體孟細紡胞真，必爛需師以袖表導(dǎo)達河載饞體騙的較方震式摸攜塘帶啟進岔去振。三望、葵將擋目漏的歌基可因朵導(dǎo)優(yōu)入耀受恒體奪細螺胞1轉(zhuǎn)化：目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程。2常用的受體細胞：大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動植物細胞等。3目的基因?qū)胧荏w細胞的原理：借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑。1、剃目惑的珍基隔因罷導(dǎo)支入磁植鍛物撲細愧胞瓶的駐方杜法（1）靠農(nóng)絨桿青菌籠轉(zhuǎn)篩化臂法①喬農(nóng)辟桿目菌頑特昌點廢：蓮易巖感抄染雙內(nèi)子銀葉伍植襲物和裸國子蚊植揉物，攤對窗大臂多言數(shù)媽單父子摸葉如植梯物相沒產(chǎn)有睛感別染客能來力赤。②胳原猴理議：T言i質(zhì)砌粒住上燃的T量-借-飲-許D塞N替A可恐以隆轉(zhuǎn)挺移貪到籠受襯體鏈細棕胞若，狼并壘整攜合巡壽到皆受遺體已細致胞豪染嫌色陜體叨的D呈N壓A上。三救、蟻目穴的解基尋因刻導(dǎo)填入距受影體描細買胞構(gòu)驗建評基導(dǎo)因恐表店達橫載市體轉(zhuǎn)挖入農(nóng)輪桿板菌植學(xué)物繩細穴胞導(dǎo)可入穩(wěn)英定解維慚持燙和垃表肅達③過切程集：1、限目屠的挎基掀因培導(dǎo)儲入廊植轉(zhuǎn)物或細濃胞企的數(shù)方鵲法（2）授基咽因摩槍恒法推：目喚的街基謝因越導(dǎo)怎入庸單冶子經(jīng)葉怨植頌物阻細念胞①膠操注作觸方恩法祥：習(xí)利萌用逆壓槍縮吐氣胃體爐產(chǎn)倉生標的纏動金力稻，歪將大包宏裹煌在拖金持屬逆粒梢表僅面宜的率表基達訪載趟體D勢N捐A打獲入簡受闊體愿細座胞掉中撈，誓使耽目樓的鼠基澇因摘與鹽其吹整從合睡并貝表蔬達陶的饅方致法。②鎢蟲粉株粒暮子嗎和李金愉粉舟粒胞子籌，兇粒瓦子完的千直屯徑藝一亂般傭在0血.凍6～4從u蒼m。③適眼用輩：單架子牙葉亂植破物1、楊目年的鐮基受因侄導(dǎo)冷入綢植紐奉物庫細城胞蠻的胡方張法（3）叢花卷粉雖管者通默道堤法乎：將沖目草的鬧基黨因谷導(dǎo)餡入價植塌物隆細友胞①趟操鞏作躲方努法莊：碎在有植幕物撫花遺受往粉菊后喉，扯花栗粉答形聚成林花丹粉靜管慶還況末扯愈戀合車前城期掩，浸剪坑去補柱血頭壩，擋然贊后拍，特滴狂入D氧N公A（灑含燭的盛基子因條）強使器目掛的爸基魯因招借克助爺花頑粉忽管擋通毫道鄙進鼻入尿受勾體宏細匠胞②特伍點:十葡分不簡腫便怎經(jīng)亮濟刷。③例淡：慣轉(zhuǎn)裳基厭因壇抗蒙蟲狼棉2、掌將抓目詳?shù)腻懟镆蛩螌?dǎo)冷入寬動機物妹細娘胞①遺方攏法氧：煎顯厚微亦注時射構(gòu)法①撕程秒序目棚的瓣基帆因衣表雖達奮載庭體炮提走純鋪取溉卵嬸（川受貴精訓(xùn)卵丟）殺顯答微肢注漫射日受赤精鉗卵罷新童性塌狀脾動誰物3、姨將煤目儲的府基懂因束導(dǎo)介入倉微湊生佛物凡細代胞①微遵生仆物陽作撓受栗體賄細煙胞羊原樹因：繁略殖羞快或、跨多秩為京單仆細凡胞招、抓遺盈傳冤物送質(zhì)專相透對室少②曾常處用徐菌陶：而大憤腸桌桿激菌③蟻常年用區(qū)法葵：C鉗a2某+處渡理獲昆得縮慧感監(jiān)受腥態(tài)葉細谷胞④方過慈程唯：C挎a2加+處埋理大繡腸杯桿阿菌感煤受沉態(tài)細猾胞感順受劫態(tài)吉細抖胞吸傾收D睛N畏A表棄達叛載料體與浮感賊受伏態(tài)細塑胞苗混尾合小背結(jié)蓋：將裳目邪的洋基扒因谷導(dǎo)押入端受訪體壞細杏胞生物種類植物細胞動物細胞微生物細胞常用方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射技術(shù)Ca2+處理法受體細胞體細胞受精卵原核細胞轉(zhuǎn)化過程將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上→農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細胞→整合到受體細胞的DNA→表達將含有目的基因的表達載體提純→取卵（受精卵）→顯微注射→受精卵發(fā)育→獲得具有新性狀的動物Ca2+處理細胞→感受態(tài)細胞→重組表達載體與感受態(tài)細胞混合→感受態(tài)細胞吸收DNA分子四畢、衫目咬的博基杯因曬的瘦檢神測低與歲鑒嬸定導(dǎo)超入奪過危程份完顆成義后納，過全濫部南受刷體跨細留胞繳都欺能拖攝書入礙重帝組D蚊N述A分乖子砌嗎擋？1真巨正率能絕攝既入殿重糾組D議N顫A分挺子噴的姐受唉體窩細春胞畫很劑少證。2目歪的絲式基陪因毛進俯入暫受征體撞細態(tài)胞元后理，籌是夫否縱都瞞能夢穩(wěn)裳定烤維圖持痕和計表痰達迅？不貍一績定易，略需蠶要蠟檢肅測1、作鑒今定—辯—分形子想水續(xù)平裁的窮鑒嘉定轉(zhuǎn)任基草因帝生物么的銹D獻N魄A探鹿針1花5N1告5N14N14N（1刊）栗檢府測謎轉(zhuǎn)剩基娘因姥生筍物錯染欣色晃體俊的眉D偏N這A壺上映是膚否把插睬入傻了目肥的橫基盆因基錯因急探徑針滿：放蛙射弓性鼻同悼位抗素吼等乘標慚記療的木D局N糖A舍分凳子方恨法—歇—D貪N魔A分朽子擁雜覆交狂技聰術(shù)變禾性變監(jiān)性1、慨鑒貴定—表—分預(yù)子伸水必平挎的飽鑒逝定變歷性方播法—迷—分閉子眉雜昆交挑技改術(shù)（2）志檢晃測屑目注的槳基濟因毅是騙否飄轉(zhuǎn)祝錄泊出槳了m午R悶N險A探摸針1應(yīng)5N1晨5N轉(zhuǎn)勉基俘因萬生罵物的m薦R兵N棉A14N14N1、攝鑒洋定—慣—分據(jù)子軍水控平革的頸鑒泊定提臟?。?）與檢個測譯目紹的粱基拼因喬是刃否肚翻謝譯逃成碧蛋類白夸質(zhì)方舍法枝—張—毒抗教原-抗師體酒雜例交蘇云金桿菌B蛙t毒侍素屢蛋掀白將B虎t毒垂蛋異白屑注蘋射治小丈鼠補體忘內(nèi)從憤小溫鼠皂血無管滴抽去出便血西液滿分個離抖出瞎抗B瓜t毒泥素綱的眨抗旗體抗虛體蛋游白申質(zhì)出患現(xiàn)冊雜轟交經(jīng)帶脫屬分范化組蘋織歉培義養(yǎng)2、植鑒市定—根—個酷體興水堪平注的肅鑒耀定抗溜蟲災(zāi)、挨抗抬病恰接念種坦實腳驗堪，血活蔥性宏比濾較禁實霞驗例庸：慣用豎棉爸鈴幅飼薦喂掩棉浴鈴港蟲廳，增如令蟲紀吃世后炸不世出竭現(xiàn)馬中辭毒逗癥抵狀食，判說腥明蜜未紙攝呼入階目你的搬基測因吼或叉攝躁入別目閘的巡壽基虹因度未飾表款達穩(wěn)。醋如腸蟲鐘吃俊后雷中腰毒才死持亡例，克則乒說初明語攝杠入省了恥抗挎蟲科基儀因賤并享得籃到種表戚達北。思捏考壺？不薪能捧，翼受篇體哪細栗胞燈必帥須嫁表療現(xiàn)陶出畫特種定吩的盼性膀狀溝，立才坊能怒說霞明卵目克的毅基擁因需完秤成旬了表亡達。受埋體老細鳳胞單攝發(fā)入D其N鋤A分怖子完后雪就旺說毅明索目士的漏基臟因還完捷成董了下表即達或嗎睜？課辦堂暖練梳習(xí)1、有桑關(guān)汗基涉因立工失程俘的騎敘葵述電中靜，納錯彎誤生的旨是(店)A、D友N凈A連計接劑酶饑將鵲黏才性熱末堂端凱的菜堿殖基偉對醉連哪接特起鍬來B、稀限犬制祖性逼內(nèi)杏切唇酶蓄用姥于推目下的撤基隆因嶼的炎獲慕得C、盯目熔的隨基啄因束須節(jié)由好運曠載鉗體運導(dǎo)娃入健受愈體崗細盟胞D、臟人身工區(qū)合利成飯目小的狂基窄因輛不蛛用恰限詳制細性賞內(nèi)宅切醫(yī)酶A課生堂尼練植習(xí)2、下塵列披屬淋于托獲膝取咸目鮮的佛基艱因選的爭方啞法湯的理是(賀)①利蟲用m損R注N羞A反補轉(zhuǎn)烤錄陰形袖成②縱從版基房誠因恰組譯文沙庫逮中遍提疼?、廴麖南伿芘铙w繭細厭胞蜘中草提旱取④敞利含用P掙C邪R技榨術(shù)⑤勤利小用D加N擾A轉(zhuǎn)男錄⑥輸人裕工穗合鴉成A跳.閘①緩②社③烈⑤理B舞.累①斜②寬⑤厘⑥C巧.掠①與②?、蹐A④坡D安.培①煌②糟④則⑥D(zhuǎn)課團堂隊練獻習(xí)3、堅有辱關(guān)紫基姨因猛工朱程破的裕敘蘇述坑正喉確蜘的咱是相（碧）A、國限饅制拆酶肆只爽在培獲柔得收目瓦的蘿基腥因食時踐才老用B、盾重尋組禁質(zhì)穗粒服的想形茅成遲在童細訴胞栗內(nèi)娘完劣成C、稀質(zhì)章粒紋都奮可套作徹為歲運材載話體D、疾蛋迎白晃質(zhì)弦的惡結(jié)躍